Protocolos ines vitro de la reconstitución

Este protocolo describe un análisis in vitro de la transcripción que permita un solo redondo de la transcripción de la cromatina ensamblada in vitro. Comparar la actividad de un receptor o de un coactivator transcriptivo en un análisis que mida solamente un solo redondo de la transcripción con los resultados de redondos múltiples de la transcripción puede ayudar a aclarar el mecanismo de la activación transcriptiva por esos factores. - [Análisis leído: Solo redondo de la transcripción in vitro de modelos ensamblados de la cromatina usando una célula HeLa ex]

La capacidad de sintetizar el ARN en el laboratorio es crítica a muchas técnicas. Las puntas de prueba radiactivas y nonisotopically etiquetadas del ARN, generadas en reacciones de la transcripción de la pequeña escala se pueden utilizar en hibridaciones de la mancha blanca /negra y análisis de la protección de la nucleasa. Este artículo incluye la información encendido: Requisitos para la transcripción, polimerasas bacteriófagas del ARN, opciones del modelo: Plásmidos, productos de la polimerización en cadena, Oligonuclotides y cDNA, sentido o síntesis antisentido, convencional o del gran escala, productos para la transcripción in vitro. - [Información básica leída sobre la transcripción in vitro]

Proporciona a la información en parámetros específicos que usted necesita ser consciente de al usar sistemas ines vitro eucarióticos de la traducción. Incluye: Consideraciones del modelo de la DNA; Etiquetado de la proteína; Etiquetado no radiactivo de la proteína. - [Sistemas ines vitro eucarióticos leídos de la traducción]

Este protocolo describe el uso de las células de SEMV (una variedad de células derivada de las vesículas seminales de la RAM) en estudios en el metabolismo synthase-mediado H de la prostaglandina del xenobiotics en células intactas. - [Modelo in vitro leída para los estudios del Synthase de Prostagland H (PHS) - genotoxicidad mediada de Xenobiotics]

Protocolo para las reacciones que empalman ines vitro en la Drosophila kc o extractos nucleares HeLa. El protocolo incluye: Procedimiento, soluciones, BioReagents y productos químicos e indirectas del protocolo. - [In vitro reacciones que empalman leídas en la Drosophila kc o extractos nucleares HeLa]

Protocolo para la transcripción in vitro y traducción usando el sistema juntado del lysate del reticulocyte. Este protocolo se diseña para probar muestras escogidas al azar en un gel de proteína. Aumente proporcionalmente las reacciones por consiguiente. El protocolo incluye: Procedimiento, soluciones, BioReagents y productos químicos e indirectas del protocolo. - [Transcripción y traducción ines vitro leídas usando el sistema juntado de Reticulocyte Lysate]

Con este protocolo, las transcripciones que fueron iniciadas de genes específicos por las polimerasas de ARN antes del permeabilization pueden ser medidas. En vez de un extracto nuclear, se utilizan las células permeabilized. Incluye la información encendido: Permeabilization de células; Reacción in vitro de la transcripción (salida); Aislamiento del ARN; Preparación de la membrana de la mancha blanca /negra de la ranura para el hibridación; Hibridación de la membrana de la nitrocelulosa; Precipitación del TCA para determinar la incorporación [32P] de GTP en el ácido nucléico [análisis in vitro leído de la transcripción (análisis de la salida) usando las células de Permeabilized]

Protocolo para la transcripción in vitro. Incluye la información encendido: Reacciones, notas y localización de averías calientes de la transcripción. - [Protocolo in vitro leído de la transcripción]

Protocolo para la transcripción in vitro con protocolo de la polimerasa SP6. - [Transcripción in vitro leída con protocolo de la polimerasa SP6]

Protocolo para la transcripción in vitro con el extracto nuclear de la levadura. Incluye las recetas para: almacenador intermediario de la transcripción del acetato 5x; Cinasa del phospho de la creatina; Creatina de Phospho; Pare la mezcla; Ha de + acetato del potasio 0.1 M; almacenador intermediario de la transcripción del glutamato 5x (5 ml). Incluye también el protocolo para el análisis de la extensión de la cartilla. - [Transcripción in vitro leída con el extracto nuclear de la levadura]

El protocolo contornea el procedimiento general y los requisitos para la traducción in vitro de CFTR y contornea algunos análisis usando producto traducido in vitro. El glycosylation de la base de CFTR ocurre en el ER. Un análisis para esta fase de tratamiento requiere la adición de membranas microsomales a la mezcla in vitro básica de la traducción. Este protocolo toma en cuenta esto. - [Análisis ines vitro leídos de la traducción para CFTR]

El protocolo describe un sistema que incluya todos los componentes necesarios para la transcripción in vitro así como un modelo positivo del control que proporcione a transcripciones de la salida de un promotor temprano inmediato CMV. Este sistema se diseña para la transcripción de la salida. Alternativamente, los productos de la transcripción se pueden analizar por la extensión de la cartilla. - [Sistema in vitro leído de la transcripción del extracto nuclear]

Protocolo para la preparación del extracto nuclear del kc para in vitro empalmar. El protocolo hace 3.4 ml del extracto para cada 4 litros de células (dependiendo de la concentración inicial de la célula). El protocolo incluye: Procedimiento, soluciones, BioReagents y productos químicos e indirectas del protocolo. - [Preparación leída del extracto nuclear del kc para in vitro empalmar]

Protocolo para la preparación del lysate mensajero-dependiente del reticulocyte del conejo. Informamtion también agregado para probar que el lysate está trabajando antes de hacer la inactivación de la nucleasa - [preparación leída del conejo Mensajero-Dependiente Reticulocyte Lysate]

Protocolo para la preparación del sistema sin células del lysate del reticulocyte del conejo. El protocolo incluye la información encendido: Soluciones; BioReagents y productos químicos e indirectas de Protcol. - [Preparación leída del protocolo sin células del sistema de Reticulocyte Lysate del conejo]

El protocolo incluye la información encendido: Preparación de membranas; Reacción One-Stage; Reacción de dos etapas usando la cantidad normal de membranas; Reacción de dos etapas usando la concentración baja de membranas. - [Protcol leído para el retículo endoplásmico in vitro a la reacción del transporte de Golgi en levadura]

Este protocolo produce transcripciones del ARN de un gene reproducido que se pueda entonces utilizar en un análisis in vitro de la traducción. - [Protocolo leído para la transcripción in vitro del ARN]

El protocolo describe una polimerasa de ARN III (análisis de la transcripción del político III) usando un extracto o las proteínas de la opción. El político III es la polimerasa responsable de transcribir el ARN 5S, los tRNAs, y el otro pequeño RNAs. α-Amanitin inhibe la transcripción del político II en el análisis. El ARN nuevo-transcrito, radiactivo es visualizado por la autoradiografía después de la electroforesis del gel de poliacrilamida de la urea. - [Protocolo leído para la transcripción in vitro de la polimerasa III]

Amplificación del ARN por protocolo in vitro de la transcripción. Incluye protocolos en el etiquetado y el hibridación del cDNA en microarrays del cDNA. - [Protocolo leído para la amplificación del ARN por la transcripción in vitro]

El protocolo incluye el procedimiento para los análisis ines vitro de la migración de Transwell. - [Protocolo leído para el análisis de la migración Transporte-Bien]

En los núcleos de este protocolo aislados de las células que expresan el gene del interés se incuban con UTP radiactivo que sea incorporado en transcripciones nacientes del ARN por las moléculas de la polimerasa de ARN que transcribían activamente en ese entonces las células fueron cosechadas. Porque el lanzamiento muy pequeño del denovo de la síntesis del ARN ocurre en núcleos aislados, la transcripción del gene de la blanco puede ser medida cruzando el ARN por hibridación radiactivo a un exceso del gene de la blanco inmovilizado en una nitrocelulosa o un nilón - [protocolo leído para el funcionamiento transcriptivo en análisis]

Este protocolo describe una reacción in vitro para probar el ensamblaje mitotic del eje de rotación. El extracto citoestático del factor de las aplicaciones del análisis hecho de los huevos del Xenopus, fluorescente-etiquetado tubulin, y núcleos preparados de la esperma. El ensamblaje del eje de rotación es vigilado por microscopia de la inmunofluorescencia. - [Asamblea leída del eje de rotación del protocolo in vitro]

Las reacciones ines vitro de la transcripción que emplean el T3, T7 o las polimerasas de ARN bacteriófago-codificadas SP6 son ampliamente utilizadas sintetizar el ARN de los vectores recombinantes que contienen a promotores apropiados. La producción de granes cantidades de ARN específico tiene valor en la preparación de las puntas de prueba del hibridación y de los estudios ines vitro de la traducción; en la síntesis de ribozymes, del rRNA, de SRP, del ARN antisentido y de los substratos para empalmar del ARN; y en estudios de la interacción de la ARN-proteína. - [Protocolo leído: Purificación del mRNA sintetizado in vitro con los filtros centrífugos de Microcon o de Centricon]

Los sistemas ines vitro de la transcripción incluyen las instrucciones para el uso de los productos P1420, P1430, P1440, P1450 e información y protocolos de P1460.Includes en la transcripción del ARN in vitro. Información sobre la preparación del modelo de la DNA; La síntesis de la radio de la Alto-Específico-Actividad etiquetó puntas de prueba del ARN; Determinación de la incorporación del por ciento y de la actividad específica de la punta de prueba; Retiro del modelo de la DNA después de la transcripción; Retiro de nucleótidos no constituidos en sociedad anónima; Síntesis de granes cantidades de ARN; ARN que capsula para la traducción in vitro. - [Sistemas ines vitro leídos de la transcripción de Riboprobe]

Ejecutar-en la transcripción vigila la regulación de la transcripción en núcleos aislados. El protocolo incluye: Preparación de núcleos, Ejecutar-En la reacción de la transcripción, la hidrólisis alcalina de las transcripciones de la salida, la preparación de filtros y el hibridación. Soluciones incluidas: Solución de la ADNasa, mezcla del hibridación, solución de Denhardt (100X) etc. - [funcionamiento leído en protocolo de la transcripción]