Patrocine/Anuncie & Conecte a nosotros & Éntrenos en contacto con & Sobre nosotros & Ayúdenos

Biología Molecular Blog

Postes Recientes Del Foro

 

Membranas Occidentales De la Mancha blanca /negra Que eliminan

Información del hallazgo sobre cómo eliminar las membranas occidentales de la mancha blanca /negra aquí.

Índice que elimina de la membrana occidental de la mancha blanca /negra

• ¿Qué la membrana está eliminando?
• Fondo
• Aplicaciones
• Materiales
• Almacenadores intermediarios
  
• Preparación
• Protocolo
• Visualización
• Análisis Del Gel
• ¡Mancha blanca /negra Occidental Que elimina Videos - Viniendo Pronto!
• Otros Protocolos Que eliminan De la Mancha blanca /negra Occidental
• El eliminar de localización de averías de la membrana
• Asuntos de la discusión para las manchas blancas /negras que eliminan
• Consiga la ayuda en su eliminar de la membrana

¿Qué la membrana está eliminando?

El eliminar de la membrana es el retiro de anticuerpos (primario y secundario incluyendo) de una membrana occidental de la mancha blanca /negra, permitir la incubación de los anticuerpos primarios y secundarios nuevos para el análisis de una proteína nueva por borrar occidental.

 

 

Aplicaciones de eliminar occidental de la mancha blanca /negra

El electrophoresis del gel del agarose se utiliza principalmente en análisis o la separación de las moléculas de la DNA y del RNA (aunque las proteínas se pueden también separar en los geles del agarose), no obstante la separación también permite la purificación de tallas específicas de DNAs después de la digestión de la enzima de la restricción. Esto se utiliza generalmente en reproducirse para obtener los plasmids del corte, en los cuales el electrophoresis del gel del agarose separa vectores del corte los sin cortar.

Así el eliminar permite:

1. La reutilización de las membranas occidentales de la mancha blanca /negra a probar para la expresión de otra proteína
2. Al análisis para la proteína total
3. Para probar para la proteína no-non-phosphorylated (después de probar para la proteína phosphorylated).

 

 

Almacenadores intermediarios Que eliminan De la Membrana

El eliminar requiere almacenadores intermediarios y la incubación especiales en un horno.

Almacenadores intermediarios Usados:

Almacenador intermediario Que elimina

• 62.5 milímetros Tris-HCl (pH 6.8)
• el 2% SDS. (agregue UL 280 del merceptoethanol 2-beta o de una concentración final de 0.1 M 2-Mecaptoethanol).

Protocolo Que elimina

• agregue 280 μl de 2-beta-mercaptoethanol por 40 ml de almacenador intermediario que elimina (a una concentración final de 100 milímetros)
• 1. Lave la membrana en TBST (1 x 5 minutos)
  2. Incube la membrana en el almacenador intermediario que elimina por 30 minutos en 50-60°C (utilice un horno de la calefacción para esto - y guarde el cerrado puerta del horno debido al olor)
  3. Lávese en TBST (2 x 5 minutos)
  4. Bloquee la membrana para 1 h en leche de bloqueo del 5%
  5. Siga el protocolo normal para desarrollar manchas blancas /negras occidentales.

 

 

 

Alerta: main(/home/molec2/public_html/includes/western-borre -protocols.php) [function.main]: no pudo abrir la secuencia: Ningún tal fichero o directorio en /home/molec2/public_html/protein/western-blot/stripping-western-blot-membranes/includes/body.php en la línea 83

Alerta: main() [function.include]: ' fallado/home/molec2/public_html/includes/western-blot-protocols.php ' de la apertura para la inclusión (include_path='.:/usr/lib/php:/usr/local/lib/php ') en /home/molec2/public_html/protein/western-blot/stripping-western-blot-membranes/includes/body.php en la línea 83