Diseño De la Cartilla de PCR

Cartillas para PCR

Guías de consulta para la selección superelegante:

• Las cartillas de PCR se diseñan como 15-30 nucleotides del oligo en longitud. Cartillas más largas permiten una especificidad más alta o permiten generalmente la adición de los sitios de la enzima de la restricción al extremo superelegante para la reproducción.
• El contenido superelegante de la CROMATOGRAFÍA GASEOSA del oligonucleotide debe estar en el rango de 40-60%. Los nucleotides de G y de C se deben distribuir uniformemente como racimos de los G's o el oscurecimiento no específico de la causa de la c puede ocurrir y el alto contenido de la CROMATOGRAFÍA GASEOSA deteriora la eficacia de PCR.
• Las cartillas no deben ser uno mismo-complementarias o complementarias a la otra cartilla en la mezcla de reacción. Las cartillas que complementan con uno a compiten con el modelo para el uso de la cartilla y del reactivo. Éstos se llaman dimers superelegantes y formación de la horquilla cuando los uno mismo-complementos de una cartilla.
• La temperatura que derrite Tm de las cartillas no debe tener una diferencia más que 5°C.

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