Cromatografía líquida de alto rendimiento de la CLAR

La técnica de alto rendimiento de la cromatografía líquida

El análisis de péptidos y de proteínas ha sido revolucionado por la introducción de CLAR. La CLAR permite el análisis rápido y sensible de la estructura del péptido y de la proteína. Ha simplificado nuestro análisis en la comprensión de procesos biológicos y en el desarrollo del péptido y de productos farmacéuticos a base de proteínas.

Pero la CLAR no para allí, es aplicaciones en péptido y la purificación de la proteína continúa ampliándose a una tarifa extremadamente rápida. Por ejemplo la síntesis solid-phase del péptido y las técnicas de la DNA recombinante han permitido la producción de granes cantidades de péptidos y de proteínas que necesitan ser purificados altamente. También otra aplicación muy importante para la CLAR en la edad del poste-genomic es que sus técnicas están utilizadas extensivamente en el aislamiento y la caracterización de proteínas nuevas.

La característica más significativa de la CLAR sería su resolución excelente que se alcanza fácilmente bajo amplia gama de las condiciones para las moléculas muy estrechamente vinculadas, así como las moléculas estructural absolutamente distintas. Esta característica es del hecho de que todos los modos interactivos de cromatografía están basados en las fuerzas del reconocimiento que se pueden manipular sutil a través de cambios en las condiciones de la elución que son específicas para el modo determinado de cromatografía. Los péptidos y las proteínas obran recíprocamente con la superficie cromatográfica de una manera específica de la orientación, de la cual su tiempo de retención es determinado por la composición molecular de las regiones específicas del contacto. Para polipéptidos y proteínas más grandes que adopten un grado significativo de estructura secundaria y terciaria, la región cromatográfica del contacto abarca una pequeña proporción de la superficie molecular total. Todos los procesos biológicos dependen de interacciones específicas entre las moléculas y la cromatografía de afinidad explota estas interacciones específicas para permitir la purificación de una biomolécula en base de su función biológica o estructura química individual.

Lazos de la retención y de la anchura de banda de la CLAR

El tiempo de retención o el tr en CLAR es la época llevada para que un soluto pase a través de una columna de cromatografía. Este tiempo de retención se mide como el tiempo llevado por el soluto, después de la inyección, para emerger de la columna y para ser detectado. Para permitir que los tiempos de retención sean comparados a diversas columnas o bajo diversas condiciones, la época de retención de un soluto se compara normalmente con la época de retención de una molécula que no se conserve en la columna específica del interés. Esto permite que el k unitless del factor de capacidad de un soluto sea expresado en términos de tiempo de retención tr, con el lazo