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Índice:
Asuntos de la localización de averías y del foro de la esterilización
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Boletín de noticias De la Microbiología
La esterilización se define como la destrucción de todas las formas de vida. Puede ser efectuada por los varios agentes. En relación a los requisitos prácticos del laboratorio bacteriológico muchos de esos agentes tales como electricidad, luz del sol, etc., están de poco valor y se limitan en sus aplicaciones; otros están tan bien satisfechos a los propósitos determinados que su uso está restringido casi enteramente a tales aplicaciones. Los métodos del principio usados lo más a menudo posible están esterilizando (calor, vapor y presión - una combinación) y producto químico, no obstante el autoclave es el más eficaz si está realizado correctamente
Hay dos métodos importantes de esterilización.
A)
1) las soluciones concentradas destruyen microorganismos retirando el agua de sus células (plasmolysis), e.g., en la preservación del alimento por las soluciones concentradas de la sal o del azúcar. Los microorganismos acostumbrados a un substrato nutriente concentrado pueden sufrir el plasmoplysis (el repartir de la célula) si está colocada en un medium.In menos concentrado cualquier caso, si se sujetan gradualmente a las condiciones que cambian, se retrasa o se previene la muerte.
2) la desecación es destructiva a muchos microbios, espe cially los que no formen las esporas. Por ejemplo, el picosegundo Radicicola es muy sensible a la desecación sobre el cubrir-cristal ordinario o en algodón.
3).
Esto se utiliza generalmente mientras que a bunsen la hornilla en el laboratorio, no obstante hay varios métodos de calefacción:
1. En la esterilización en una llama descubierta,
(a) Los medios más simples de esterilizar un instrumento del metal son calentarlo a los ness rojos en una llama. Este método se adopta siempre para el platino del ster, cobre, etc., los alambres e hierro y las espátulas del níquel, fórceps, etc ilizing.
Una aguja del platino se debe secar siempre cuidadosamente antes de la esterilización, llevándola a cabo cerca de la llama. Esto evita de farfullar, que dispersaron microorganismos, especialmente si el material húmedo, e.g., grasa o proteína, en la aguja se empuja inmediatamente en la llama.
(b) Un instrumento se puede esterilizar por llameante él, es decir, pasándolo rápidamente a través de una llama caliente. Este método es útil para los instrumentos, el etc., puliendo las superficies desprovistas de los pliegues en los cuales los microorganismos pudieron escapar la destrucción, e.g., cuchillos, barras de cristal, manijas de las agujas del platino, bocas de los tubos de prueba, frascos, pipetas, etc.
(c) Las heridas profundas son esterilizadas por el cautery con un instrumento calentado a un calor rojo opaco.
2.
En una emergencia, los instrumentos pequeños, agujas, etc., puede ser esterilizado sumergiéndolos en éter o alcohol absoluto y después del retiro que enciende el líquido adherente y que permite que se queme de la superficie de los instrumentos. Relance el proceso. Puede entonces ser asumido con seguridad que el aparato así que tratado es estéril.
3.
Las velas de filtro de la porcelana son esterilizadas calentándolos al calor blanco en el horno de mufla. Este método de esterilización no se puede aplicar a los filtros de la porcelana con las guarniciones del metal, tales como filtros de Berkefeld.
La destrucción de animales autopsied y de pérdidas acumuladas de laboratorio es también la mejor realizada de este modo.
4.
La exposición al aire caliente es el método generalmente de esterilizar toda la cristalería, los instrumentos con las manijas del metal, el etc., pero no es conveniente para las posturas secundarias orgánicas, a excepción de las lanas, del algodón y del papel.
Para asegurar la esterilización eficiente, la cristalería preparada, el etc., debe ser colocado en un gas o un horno eléctricamente calentado (que contiene un termómetro que se coloca sobre 200 C.) de quién temperatura se mantiene en aproximadamente 150 C. para una hora, o 180 C. por diez minutos. El horno se debe permitir refrescarse abajo a 60 C. antes de abrir la puerta para evitar romperse de la cristalería por las corrientes del aire frío. El algodón, las lanas, y el papel se chamuscan levemente en esta temperatura,
El aparato debe ser absolutamente limpio y seco antes de ser esterilizada.
4.
La esterilización por calor húmedo se puede efectuar en una de cuatro maneras:
1.
Algunas sustancias usadas como medios de cultivo, siendo ricas en sustancias volátiles o de otra manera químicamente inestables, no se pueden calentar a 100 C. sin una alteración marcada (e.g., coagulación) y a un cierto fragmento un tion del destruc de sus características; suero de sangre, por ejemplo.
Pasteur mostró que tales media pueden ser un ster mejor ilized calentándolas en una baja temperatura (55-60 C.) durante mucho tiempo que en un de alta temperatura (70 C. o aún 100 C.) por un tiempo corto. En este proceso, el calor no se aplica ' directamente, en general. El control de la temperatura se logra ordinariamente por medio del agua calentada al grado deseado.
La calefacción prolongada en una baja temperatura constituye la pasterización. En la práctica, sin embargo, se encuentra que para matar a todos los organismos que la pasterización debe ser COM bined con el método de calefacción discontinua ideado por Tyndall. Los media albuminosos sujetados al método de Tyndall se deben incubar finalmente en 37 C. por horas del forty-eight para eliminar todos los especímenes que muestran la contaminación.
2.
(a) Calefacción Continua. El agua en 100 C. destruye las formas vegetativas de bacterias casi instantáneamente, y las esporas adentro a partir cinco a quince minutos ordinariamente, aunque muchas esporas de especies resistentes no son matadas por la calefacción de varias horas en 100 C. Water sospechada de la contaminación de las aguas residuales se pueden así hacer seguras para los propósitos que beben simplemente hirviendo por algunos minutos.
Este método es aplicable a los instrumentos del metal, las jeringuillas, los tapones de goma, el aislante de tubo del caucho y del cristal, y el otro aparato pequeño.
(b) Calefacción Discontinua. (método de Tyndall.) Tyndall observó que ciertas formas resistentes encontraron en una infusión hecha del heno no fueron destruidas calentando la infusión en 100 C., una vez que, uniformes cuando la temperatura fue sostenida por un período prolongado, con todo hirviéndola por un tiempo corto en tres días sucesivos todos los organismos vivos fueran destruidos. Su teoría era ésa calentando en 100 C., las formas tative del vege pero no las esporas fueron matadas. El últimos germinan como el líquido se refresca y se matan durante la segunda calefacción. Algunas esporas, sin embargo, escapan a de struction en la segunda calefacción;
éstos habrán germinado para el momento en que la tercera calefacción sea debida. Después de la tercera esterilización térmica se logra.
La explicación ahora dada, sin embargo, es que el ance del resistir de microorganismos está bajado gradualmente bajo influencia de heatings relanzados. Este principio de la calefacción en tres días sucesivos, un media que se esterilizará ahora se conoce como el método de Tyndall de esterilización. En práctica general del laboratorio, el vapor se utiliza en vez del agua en 100., pero éste hace necesario el aparato especial, mientras que el agua se presta fácilmente a los medios actuales.
La naturaleza física del media, la resistencia extraordinaria de las esporas de ciertas especies de bacterias o ambas en la combinación, pueden requerir que esta calefacción intermitente esté continuada sobre un período del tiempo más largo, es decir, cuatro, cinco, seises, etc., días en la sucesión para igual o un período más largo cada vez, o que el período entre los inter heatings mittent esté alargado a partir de veinticuatro horas a las horas del forty-eight.
El método de Tyndall tiene valor en que los media de la composición delicada pueden ser esterilizados sin producir cambios indeseables, por ejemplo es producido a menudo por el ture alto del tempera del autoclav.
3. Esterilización en vapor que fluye en 100 C. Continuous o discontinuo, (a) calefacción continua. El hervir o la exposición simple al vapor en 100 C., aunque se prolongue la exposición, no es un método de confianza de la esterilización. Cuando se han secado los microorganismos, su resistencia a los efectos de calor se realza mucho, y es especialmente ésta el caso cuando se mezclan con las sustancias de una naturaleza coloidal. Ciertas formas resistentes de protoplasma conocidas como esporas no se pueden destruir por una calefacción a 100 C., incluso cuando la temperatura se ha mantenido por minutos eral del sev.
(b) Calefacción Discontinua. Uso general para el ilization del ster de media.
Este principio de la esterilización avanzó por los hallazgos de Tyndall su aplicación más amplia del trabajo bacteriológico con el uso del vapor que fluía. El vapor de alta presión se puede utilizar a la ventaja el bueno si una estación de la calefacción central está disponible. El esterilizador de Arnold hace uso el vapor para el proceso de la esterilización y se presta fácilmente al método continuo y discontinuo.
4. Esterilización de Superheated Steam (bajo presión y por lo tanto sobre 100 C.). El agua, las jeringuillas, las preparaciones quirúrgicas, lecho, aparato del India-caucho, filtros, viejas cultivaciones, medios de cultivo, etc., no dañados por termperatures altos, pueden ser esterilizadas más rápidamente calentando en vapor bajo presión.
La exposición al vapor en una temperatura de 115 C. por veinte minutos está en la mayoría de los casos suficientes asegurar la esterilización,
Pero algunos media, patata por ejemplo, requieren una temperatura de 120 C. por diez a quince minutos. Ahora se observa que los media sujetados a esta temperatura alta experimentan los cambios hidrolíticos que los hacen inadecuados para la cultivación de microorganismos más delicados. La esterilización en el vapor sobrecalentado se continúa en un aparato especial llamado una autoclave, que puede ser así que construido en cuanto a funcionamiento por el vapor directo o indirecto. El último es el ma's desireable para la esterilización de media.
5)
La luz se parece actuar produciendo las germicidas químicas de gran alcance, probablemente orgánicas por los óxidos, en el medio rodeando las bacterias. Ciertos rayos de la luz, del azul, del violeta y ultravioleta en detalle son destructivos a las células vivas. Es a estos rayos que la luz del sol debe su acción de desinfección. El uso práctico ha sido hecho de los rayos ultravioletas en la esterilización del agua empleando la lámpara de vapor del mercurio del Fabricante de vinos-Hewitt que tenía un cuarzo en vez de un tubo de cristal, pues estos rayos no pasan a través del cristal.
6)
La esterilización se puede efectuar por la filtración de gases o de líquidos a través de los materiales que conservarán microorganismos.
El mejor ejemplo de la filtración de gases es el uso del algodón enchufa los frascos y los tubos que contienen microorganismos. El algodón es bastante poroso permitir el intercambio necesario de gases pero permitirá que ni el polvo ni los microorganismos no nativos entre. La esterilización del aire o de otros gases si 3d delantero a través del algodón dependería del espesor de la capa del algodón y también de la fuerza que fue ejercida.
Ciertos líquidos usados en trabajo bacteriológico no se pueden sujetar incluso a una cantidad moderada de calor sin profundo alterar su naturaleza. Para hacer un estéril tan flúido, se pasa a través de un recipiente cilíndrico, está cerrada en un extremo como un tubo de prueba, y hecha cualquiera de porcelana porosa de la "galleta", quemado difícilmente y unglazed (filtro de la pista del compartimiento) o del kieselgur, una tierra diatomaceous fina (filtro de Berkefeld) y llamó un bougie o una vela.
Los poros de los filtros más finos son tan pequeños que mientras que los líquidos, y los sólidos en la solución pasan a través, los microorganismos están conservados y los pasos del líquido a través en condiciones libres de gérmenes.
Pasteur en su trabajo temprano utilizó las placas del yeso como el media de filtración, pero como resultado de Chamberland investiga, porcelana porosa ahora reemplaza el yeso. El asbesto finalmente destrozado pila de discos firmemente en un crisol de Gooch servirá como un filtro bacteriano proporcionó a la capa del asbesto es suficientemente grueso. El índice de la filtración es generalmente muy lento porque los poros del filtro son tan muy minuciosos; por lo tanto para superar esta aspiración o presión de la desventaja se emplea generalmente para acelerar el proceso. Este método puede no excluir organismos filterable.
7)
En uno de los métodos más recientes ideó para la preparación de vacunas antirabic que la vacuna es preparada colocando el virus (médula espinal de un conejo rabioso) en un saco del collodion y dializándolo en ejecutar el agua destilada. Se destruye el virus vivo, con todo sus características de inmunización son intactas conservado. El efecto opuesto se puede obtener absolutamente bajo algún qué diversas circunstancias. Si un saco del collodion que contiene una suspensión de un organismo patógeno se coloque en la cavidad del cuerpo de un animal susceptible los organismos dentro del saco prosperan, siendo alimentado por los fluídos corporales que difunden a través de la membrana semipermeable.
ENGOMANDO, J. G.: Rabia Hydrophobia. Un estudio del virus fijo, determinación del M. L. D., tratamiento vaccíneo (Hogyes, Pasteur, y vacuna dializada), y pruebas de la inmunidad. Diario de las enfermedades infecciosas, vol. XIV (1914), pp. 33-52.
8)
La pulverización o el machacamiento real de las células microbianas se recurre para a demostrar las enzimas intracelulares.
B.
1)
La esterilización por los infectants de los dis tiene solamente uso limitado en trabajo bacteriológico. La cantidad de desinfectante necesaria para destruir organismos existentes en un media nutriente es mayor que la cantidad necesaria para inhibir la multiplicación de un organismo que se pueda utilizar posteriormente como inoculum; el media por lo tanto se hace inútil.
Pues un ejemplo, un formalina 1-1000 el cloruro mercúrico, 1.5%, un fenol del 5%, una solución compuesta del 2% del cresol, un etc., sea barato y adaptable en muchos casos. El tinte del iodin tiene valor para las heridas de la pintura.
Los jabones del campo común, y más jabón determinado verde, tienen un valor germicida del apuro, y éste conjuntamente con su acción solvente sobre las grasas y la proteína, y el limpiamiento mecánico que acompaña su uso, alinea el asignar les de un lugar importante entre los desinfectantes químicos.
Los desinfectantes usados para esterilizar la piel antes de pus de la columna, de sangre, del etc. lecting, del tema vivo deben ser quitados cuidadosamente lavando la pieza bien con alcohol antes de recoger el material, si no la presencia del desinfectante interferiría materialmente con el crecimiento subsecuente de organismos en la cultura.
3. Los desinfectantes también se agregan a los líquidos filtrados estériles que son no más largos requeridos como medios de cultivo. Para este propósito a la cantidad pequeña de algún desinfectante (tal como thymol o alcanfor) que está sin la acción química en los componentes del líquido se selecciona.
Una cantidad del ácido fénico (0.5%) o del otro producto químico se agrega con frecuencia a las vacunas, a los términos del bac, a los sueros, al etc., para los propósitos preservativos.
4. Los desinfectantes se utilizan a veces para esterilizar una cultura cuando los productos de los microorgansims están bajo el tigation de los inves. El cloroformo, el éter, el toluol, el aceite del ajo o de la mostaza, los etc., que se pueden eliminar luego por la evaporación, están entre el más útil de esta conexión.
2)
Los reactivo químicos por ejemplo pertenecen a la clase conocida como antisépticos, es decir, las sustancias de las cuales inhiba el crecimiento, pero no destruyen vida bacteriana, son obviamente inútiles.
Las bocas de los tubos de prueba, de los tubos de la fermentación, de las pipetas, del etc., se tapan ordinariamente con algodón antes de la esterilización. Para este propósito el algodón es ideal como es barato y adaptable, sirve para filtrar hacia fuera microorganismos del aire, mientras que no prohiba a ing la difusión lista de gases, y después una vez utilizado le puede ser quemado.
El papel (periódico ordinario) se puede utilizar para envolver las mercancías de cristal como los platos de petri, los platos de la profundo-cultura, las pipetas, etc., que uno desea salvar en condiciones estériles y para qué algodón no es adaptable.
La cristalería se esteriliza con el fin de los microorganismos que destruyen presentes en su superficie y en o en el algodón o el papel usado respectivamente para tapar o envolverse. Después de que la esterilización el algodón y el papel sirva para evitar que los organismos micro entrar en y contaminen los utensilios estériles.
Seque el calor, aunque no como eficaz un destructor del germen como calor húmedo, es más adaptable a la esterilización de los frascos de cultura vacíos, de las pipetas y de la otra cristalería. El ization de aire caliente del steril logra no sólo la esterilización de las mercancías, de los enchufes del algodón, del etc. de cristal, sino que "fija" los enchufes para poderlos manejar con mayor recurso.
Toda la cristalería debe ser absolutamente limpia y seca o contener rastros del alcohol solamente antes de preparar para la esterilización; si no la esterilización no puede ser lograda. Si considere la humedad capaz está presente en tubos de prueba, frascos, el etc., no se evaporará durante el proceso de aire caliente de la esterilización, y es muy evidente que la temperatura de tales porciones húmedas de la cristalería no alcanzará o en el leastwill no exceder de 100 C.
Direcciones. Los tubos y los frascos de prueba se tapan con algodón. Los fórceps ordinarios se utilizan para este propósito. (la barra de cristal de A se puede también utilizar.) Un pedazo pequeño de algodón se agarra en el borde con el fórceps y se inserta en la boca del tubo de prueba. Los enchufes deben proyectar en los tubos de prueba a partir del 3 a CMS 4, y a partir CMS el 3 a 5. En el cuello de frascos, según la talla del frasco. Solamente una cantidad de algodón debe proyectar fuera de la boca que es suficiente proteger la porción dada vuelta exterior (labio) de los tubos o de los frascos de prueba contra el polvo.
Un efecto del "Navidad-a'rbol" debe ser evitado. Los enchufes no deben ser así que en cuanto a quítese firmemente con dificultad, ni tan flojamente en cuanto a oferta ninguna resistencia al retiro. Una poca experiencia será suficiente demostrar la cantidad de algodón al uso y a la firmeza con los cuales el enchufe debe caber.
El algodón tapa para los tubos de prueba, frascos, etc., puede ser rodado. Esta clase de enchufe es más estable y se puede utilizar varias veces. Haga que el instructor demuestre el método de balanceo.
Para la esterilización de aire caliente, los tubos de prueba tapados con algodón se pueden atar en manojos grandes o colocado en cestas del alambre (nunca en tazas de la ágata), el algodón tapa para arriba. Algunos tubos de prueba no se deben colocar en una alambre-cesta grande o en un estante del prueba-tubo del alambre, pues es necesario economizar espacio en el esterilizador de aire caliente.
Los platos de petri se envuelven por separado en papel y se atan juntos en conjuntos de tres, una hoja de periódico hace cuatro papeles de la talla apropiada para envolver los platos de petri y es barata.
Tres o más platos de petri pueden ser envueltos junto si se van todos a ser utilizados en el mismo tiempo. Marque cada uno llano con el número del escritorio.
Pipetas. Coloque un pedazo de algodón en el fondo de un tubo de prueba, tape la tapa solamente de la pipeta con el algodón (no demasiado firmemente}, el irse pero poco del algodón que proyecta hacia fuera. Envuelva una porción pequeña de algodón alrededor del tercero más bajo de la pipeta, inserte la pipeta en el tubo de prueba hasta los restos de la extremidad en el algodón, haciendo el servicio que se envuelve del algodón como enchufe para el tubo.
Envuelva las pipetas así que preparado en el papel (una capa) y átelas y marque llano con el número del escritorio.
Una caja cubierta del metal se utiliza a menudo para sostener las pipetas que se esterilizarán. El extremo superior de las pipetas se tapa con algodón, la pipeta se insertan en el caso, el extremo abierto del caso tapado con algodón, y la cubierta substituida. (este último método no se recomienda para el nuevo estudiante, como la necesidad de la técnica cuidadosa en quitar una pipeta estéril del caso sin la contaminación de esos restantes es difícil de impresionar sobre él).
Los tubos de la fermentación se tapan con algodón según lo dirigido para los tubos de prueba; el enchufe del algodón no debe proyectar en el bulbo.
Los platos de cultura profundos se envuelven solo en papel según lo dirigido para los platos de petri.
Las diapositivas y los cubrir-cristales son esterilizados generalmente por llameante, pero solamente según lo necesitado.
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| 09-06-2006 11:02
por
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