Fijación

Los fijadores y los preservativos se utilizan para preservar los tejidos para su estudio. Fijadores comunes tales como formalina protegido neutral (formaldehído del 10% en salino protegida fosfato (PBS)) también se utilizan para estudiar las estructuras de la célula, y los organelos de la célula encontrados en las células individuales (e.g., núcleo, retículo endoplásmico áspero, y mitocondrias). Los tejidos se deben primeros mecánicamente y bioquímico estabilizarse en un fijador. Es importante considerar que un fijador no debe ser demasiado tóxico a su programa piloto, y no debe dañar el tejido que es preservado.

Índice de la fijación

Introducción a la fijación y a la histología del tejido

Cuando un tejido se quita de una condición viva, varios cambios se inician en sus células. Las bacterias comienzan a mtiltiply y los destruyen. También el autólisis (uno mismo-digestión), una lisis o una disolución de las células por las enzimas contenidas, fija adentro. Las enzimas aparecen invertir su acción; en vez de sintetizar los aminoácidos en las proteínas de la célula, comienzan a partir las proteínas en los aminoácidos. Estos aminoácidos difunden de las células, y pues las proteínas de un sult del re son no más coagulables por los reactivo químicos. Los cambios antedichos llevan a las condiciones post mortem supuestas. Con objeto de la examinación del oratorio del laboratorio es necesario tratar el tejido para prevenir estos efectos post mortem; es también necesario convertir las piezas de la célula en los materiales que seguirá habiendo insolubles durante el tratamiento subsecuente, y proteger las células contra la distorsión y la contracción cuando está sujetado a los líquidos tales como alcoholes y parafina caliente. Otros objetivos importantes de la preparación del tejido son mejorar el potencial de coloración de las piezas del tejido y cambiar sus índices refractivos hacia visibilidad mejorada. El procedimiento usado para cumplir los requisitos antedichos se llama fijación y los líquidos se llaman los fijadores o las soluciones de fijación. Las soluciones de fijación deben lograr los objetivos principales siguientes:

Propósito de la fijación:

El propósito de la fijación es:

1. Penetre rápidamente para prevenir cambios post mortem.
2. Coagule el contenido de célula en sustancias insolubles.
3. Proteja el tejido contra la contracción y la distorsión durante la deshidratación, embutiendo y seccionando.
4. Permita que las piezas de la célula lleguen a ser selectivamente y claramente visibles por medio de los tintes y de los índices refractivos mejorados.

Fijadores

En algunos casos el fijador puede tener (que combina insoluble) un efecto que mordienta sobre el tejido, de tal modo trayendo los dos juntos en una acción de coloración y asistiendo a la conexión de tintes y de proteínas el uno al otro.

Los tejidos se deben colocar en fijadores cuanto antes después de muerte. Si, sin embargo, el retardo es inevitable, ellos se coloca en un refrigerador, así la reducción de autólisis y de la putrefacción a un mínimo hasta el fixa tive puede ser aplicada. Un solo producto químico posee raramente todas las calidades indispensables de un buen fijador; una solución de fijación por lo tanto se compone raramente de solamente un producto químico. Una anomalía familiar es formalina. Otros fijadores confiables con el tain uno o más productos químicos para coagular las proteínas de las células, y uno o más productos químicos para hacer las proteínas insolubles sin actu alían la coagulación de ellas.

Los fijadores del coagulante cambian el spongework de proteínas en los acoplamientos a través de los cuales la parafina puede pasar fácilmente, así ing de la forma un tejido del estado coherente apropiado para seccionar. Además, los favorables acoplamientos del tein son consolidados por los coagulantes contra la subdivisión durante procedimientos posteriores. Utilizado solamente, sin embargo, coagulantes tenga tages disadvan en que pueden formar una red demasiado gruesa para el mejor detalle citológico. También, la coagulación tiende a inducir la formación de estructuras artificiales (artefactos). Los fijadores de Noncoagulant producen pocos artefactos pero si están utilizados solamente tienen la desventaja de dar al tejido un sistency pobre de la estafa para embutir.

Por lo tanto sigue que el líquido ideal de la fijación es una combinación de uno o más coagulantes de la proteína y de uno o más no coagulantes. Las soluciones más eficientes están de esta naturaleza, y combinan si es posible todos los tipos de acción. Esto excluye ésos diseñados para la fijación de un cierto componente específico de la célula, tal como cromosomas, glicógeno, mitocondrias.

Protocolos de la fijación

Porque contienen los ingredientes que actúan sobre uno a, muchas mezclas son las más eficientes cuando fresco compuesta.

Sin embargo, las piezas individuales se pueden componer como soluciones comunes y mezclar generalmente juntas inmediatamente antes de uso. Entre los productos químicos con frecuencia usados son el aldehino de la forma, el alcohol etílico, el ácido acético, el ácido pícrico, el dicromata de potasio, el cloruro mercúrico, el ácido crómico y el tetróxido del osmio.

Puesto que cada producto químico posee su propio conjunto de ventajas y de desventajas, cada componente de la solución debe, siempre que sea posible, compensar un defecto en un cierto otro componente. Por ejemplo, en el caso del fijador ampliamente utilizado, solución de Bouin: 1. El formaldehído fija el citoplasma pero de manera que retarde la penetración de la parafina. Fija cromatina mal y hace el citoplasma basiphilic. 2. El ácido pícrico coagula el plasma del cyto de modo que admita la parafina, salga del tejido suave, fije cromatina y haga el citoplasma acidófilo, pero encoja y haga los productos químicos de la croma de uso general en la lata de las soluciones de fijación 5 acidófila. 3. El ácido acético compensa ambos los últimos defectos. Ninguna regla dura y rápida existe referente a la opción de un fijador; la selección del gen es determinada realmente por el tipo de investigación.

Si hay cualquier pregunta en cuanto a los planes futuros para un tejido, el formalina es una opción segura; permite secundario o la poste-fijación. Algunas sugerencias pueden ser incluidas. Si la anatomía total del tisstie es satisfactoria, los fijadores del rotitine pueden ser utilizados: formalina, Siisa, Zenker, Helly, o Bouin. Los fijadores especiales para los inckisions de la célula son Carnoy, Flemming, Champy, Helly, Schaudinn, Regand, y otros. Para la histoquímica limitan al investigador al formalina, a la acetona, o al alcohol etílico. La mayoría de las soluciones de fijación se nombran después de la persona que los origina; Zenker y Bouin son ejemplos. Si el mismo hombre originó más de una combinación de productos químicos, los medios adicionales de señalarlos se han utilizado. Las soluciones débiles y fuertes de Flemming, la serie de B3 de Allen, de Ely, el líquido del etc. Susa fueron nombrados por Heidenhain después de las primeras dos cartas de dos palabras: sublime y salte.