πρωτόκολλα ποσού

Κατηγορία: Πρωτόκολλα της βιολογίας φυτού: Πρωτόκολλα απομόνωσης RNA DNA εγκαταστάσεων

Το πρωτόκολλο περιλαμβάνει: organelle απομόνωση, deoxyribonuclease επεξεργασία, λύση, deproteinisation και ένας τελικός καθαρισμός DNA με το dodecyl θειικό άλας νατρίου και το οξικό άλας καλίου. Η organelle παραγωγή DNA είναι 5-10 μικρογραμμάρια ανά γραμμάριο ιστού και το DNA είναι πλήρως restrictable. Η τεχνική είναι ανέξοδη και κατάλληλη για την απομόνωση των πολλαπλάσιων δειγμάτων organelle του DNA από ένα μικρό ποσό ιστού. - [Διαβασμένος μια μέθοδο για την απομόνωση του DNA χλωροπλαστών και του μιτοχονδριακού DNA από τον ηλίανθο]

Κατηγορία: Pcr πρωτόκολλα: Bisulfite βασισμένα στη μετατροπή pcr πρωτόκολλα

Πρωτόκολλο για την ανάλυση της μεθυλίωσης DNA που χρησιμοποιεί bisulphite την αλληλοuχία. Η μέθοδος επιτρέπει ότι η ακριβής ανάλυση της μεθυλίωσης σε μια ορισμένη περιοχή με τη μετατροπή όλων τα cytosines στα tymines, ενώ τα μεθυλιωμένα cytosines παραμένουν αμετάβλητα.  Αυτή η μέθοδος απαιτεί το μικρό ποσό του genomic DNA και επομένως φαίνεται να είναι πολύ χρήσιμη για την ανάλυση των κλινικών δειγμάτων, όπου το υλικό ποσό είναι περιορισμένο.
- [Διαβασμένος την ανάλυση της μεθυλίωσης DNA που χρησιμοποιεί bisulphite που τοποθετεί διαδοχικά το πρωτόκολλο]

Κατηγορία: Η βιολογία κυττάρων και κυτταροκαλλιέργεια: Πρωτόκολλα Cytometry ροής

Οι διαφορετικοί τύποι κυττάρων ποικίλλουν phosphatidylserine τους (PS) στην περιεκτικότητα σε, μαζί με το ποσό έκθεσης PS στην επιφάνεια κυττάρων μετά από το θάνατο κυττάρων. Αυτό το πρωτόκολλο είναι μια οδηγία για να πάρει αρχισμένο, εντούτοις μπορεί να είναι απαραίτητο να ρυθμιστεί η συγκέντρωση του Annexin β- FITC. - [Διαβασμένος σε Annexin Β το πρωτόκολλο για τη ροή Cytometry]

Κατηγορία: Δοκιμές γονιδίων δημοσιογράφων: Β-γαλακτοξιδάση πρωτόκολλα δοκιμής

Η μέθοδος περιγράφει πώς ένα ακατέργαστο απόσπασμα προετοιμάζεται, και η δραστηριότητα είναι κανονικοποιημένη στην ποσότητα της πρωτεϊ'νης που δοκιμάζεται. Αυτή η μέθοδος είναι ιδιαίτερα κατάλληλη για τα κύτταρα που αυξάνονται υπό τους πολύ διαφορετικούς όρους ή που έχουν τα διαφορετικά γενετικά υπόβαθρα. - [Διαβασμένος τη δοκιμή της SS-GALAKTOXJDA'SIS στη ζύμη: Δοκιμή των ακατέργαστων αποσπασμάτων]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα ζύμης: Πρωτόκολλα γενετικής ζύμης: Β-γαλακτοξιδάση πρωτόκολλα δοκιμής

Το πρωτόκολλο περιγράφει πώς ένα ακατέργαστο απόσπασμα προετοιμάζεται, και η δραστηριότητα είναι κανονικοποιημένη στην ποσότητα της πρωτεϊ'νης που δοκιμάζεται. Αυτή η μέθοδος είναι ιδιαίτερα κατάλληλη για τα κύτταρα που αυξάνονται υπό τους πολύ διαφορετικούς όρους ή που έχουν τα διαφορετικά γενετικά υπόβαθρα. - [Διαβασμένος τη δοκιμή της SS-GALAKTOXJDA'SIS στη ζύμη: Η δοκιμή του ακατέργαστου πετρελαίου εξάγει το πρωτόκολλο]

Κατηγορία: Δοκιμές γονιδίων δημοσιογράφων: Β-γαλακτοξιδάση πρωτόκολλα δοκιμής

Το συνιστώμενο ποσό πλασμιδίου ρΣΒ-SS-GALAKTOXJDA'SIS για να χρησιμοποιήσει για transfection των κυττάρων (πιάτο 60 χιλ. ή 100 χιλ.) είναι 1-2 ΅g. Το βέλτιστο ποσό του DNA πλασμιδίων θα καθοριστεί από την αποδοτικότητα transfection, η οποία εξαρτάται πολύ από το ιδιαίτερο γραμμών και transfection κυττάρων πρωτόκολλο. - [Διαβασμένος το β - πρωτόκολλο δοκιμής γαλακτοξιδάσησ]

Κατηγορία: Pcr πρωτόκολλα: Pcr πρωτόκολλα κλωνοποίησης

Πρωτόκολλο για την κλωνοποίηση αμβλύς-τελών pcr των προϊόντων. Η επώαση μιας ligation αμβλύς-τελών αντίδρασης παρουσία ενός υπερβολικού ποσού ενός κατάλληλου ενζύμου περιορισμού μπορεί εντυπωσιακά να αυξήσει την παραγωγή των ανασυνδυαζόμενων πλασμιδίων.  Ο ρόλος του ενζύμου περιορισμού είναι να διασπαστούν κυκλικά και γραμμικά concatemers επί των τόπων περιορισμού που ανασχηματίζονται όταν γραμμικά, αμβλύς-τελειωμένα μόρια πλασμιδίων επιδένουν σε τους.  Ι - [διαβασμένος την κλωνοποίηση αμβλύς-τελών pcr του πρωτοκόλλου προϊόντων]

Κατηγορία: Πρωτεϊνικά πρωτόκολλα: Πρωτεϊνικά πρωτόκολλα συγκέντρωσης ποσοτικού προσδιορισμού: Πρωτεϊνικά πρωτόκολλα δοκιμής του Μπράντφορντ

Μια λεπτομερής και καλά σκεπτόμενη έξω σελίδα δοκιμής του Μπράντφορντ πρωτεϊνική που χρησιμοποιεί spectrophotometer. Περιλαμβάνει τις πληροφορίες όπως η δοκιμή του Μπράντφορντ είναι πολύ γρήγορος και χρησιμοποιεί τη σχεδόν ίδια ποσότητα της πρωτεϊ'νης όπως τη Lowry δοκιμή, σχόλια, διαδικαστικά βήματα, εξοπλισμός χρησιμοποιούμενος και περισσότερο. - [Διαβασμένος στο Μπράντφορντ την πρωτεϊνική δοκιμή]

Κατηγορία: Transfection πρωτόκολλα: Transfection φωσφορικού άλατος ασβεστίου πρωτόκολλα

Αυτή η transfection φωσφορικού άλατος ασβεστίου μέθοδος λειτουργεί καλύτερα στις γραμμές κυττάρων που είναι 1) ιδιαίτερα μετασχηματισμένος και 2) υποστηρικτής (hela, U2OS, SAOS2, AdAH, νπθ- KT και λαμβάνει από 20% transfection 100% στην αποδοτικότητα ανάλογα με τη γραμμή κυττάρων). Εργάζεται καλά για τα παροδικά πειράματα αλλά οι προφυλάξεις πρέπει να χρησιμοποιηθούν στο σχέδιο και την ερμηνεία των πειραμάτων βασισμένων στη συζήτηση κατωτέρω. Επίσης εργάζεται πολύ καλά για την παραγωγή των σταθερών γραμμών κυττάρων. Αυτή η μέθοδος είναι αρκετά ευαίσθητη στο ποσό πλασμιδίου εισόδου. - [Διαβασμένοσ transfection φωσφορικού άλατος ασβεστίου τη μέθοδο]

Κατηγορία: Η βιολογία κυττάρων και κυτταροκαλλιέργεια: Πρωτόκολλα βιωσιμότητας κυττάρων

Η luminescent® δοκιμή βιωσιμότητας κυττάρων θελλΤητερ- Glo είναι μια ομοιογενής μέθοδος για να καθορίσει τον αριθμό βιώσιμων κυττάρων στον πολιτισμό. Η ανίχνευση είναι βασισμένη στη χρησιμοποίηση της αντίδρασης luciferase να μετρηθεί το ποσό του ATP από τα βιώσιμα κύτταρα. Το ποσό του ATP στα κύτταρα συσχετίζει με τη βιωσιμότητα κυττάρων. - [Διαβασμένος τις δοκιμές βιωσιμότητας κυττάρων που μετρούν το πρωτόκολλο ATP]

Κατηγορία: Pcr πρωτόκολλα: Αντίστροφα πρωτόκολλα ρτ-πθρ Transcriptase

Σε αυτό το πρωτόκολλο, το δείγμα και ο ανταγωνιστής RNAs είναι αντίστροφοι που μεταγράφονται (χωριστά) σε ένα πειραματικό πείραμα.  Ένα σταθερό ποσό rt δειγμάτων προϊόντος συνδυάζεται έπειτα με μια 2- logserial διάλυση rt ανταγωνιστών του προϊόντος για pcr. Η διαδικασία παρέχει έναν κατά προσέγγιση αριθμό αντιγράφων για το δείγμα, το οποίο καθορίζεται με ακρίβεια έπειτα με την επανάληψη του πειράματος με μια σειρά διπλών διαλύσεων του ανταγωνιστή.  Το πείραμα περιλαμβάνει τους ελέγχους για τις παραλλαγές δείγμα-$$$-ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ rt στην αποδοτικότητα. - [Διαβασμένος το ανταγωνιστικό ρτ-πθρ: Εκτίμηση του πρωτοκόλλου αριθμού αντιγράφων]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα καθαρισμού νουκλεϊνικού οξέος: Πρωτόκολλα απομόνωσης DNA: Πρωτόκολλα απομόνωσης DNA Genomic

Σε αυτό το πρωτόκολλο, η DNA-DESMEYTJKI' ικανότητα των μορίων μάγων MagneSil χρησιμοποιείται για να συλλάβει και να αποδεσμεύσει ένα συνεπές ποσό του DNA (100 NG) πέρα από ένα ευρύ φάσμα των δειγμάτων.  Στο τέλος της διαδικασίας, το DNA διαχωρίζεται με εκχύλιση στον προσωρινό χώρο εκλεκτικής προσρόφησης 100 ΅l για να δώσει μια τελική συγκέντρωση 1 NG/$l*΅l, που ανακουφίζει την ανάγκη για τον ποσοτικό προσδιορισμό DNA postpurification. - [Διαβασμένος την απομόνωση ΔΕΊΚΤΗ ΝΟΗΜΟΣΎΝΗΣ DNA του DNA Genomic από τους λεκέδες και το στοματικό πρωτόκολλο πατσαβουρών]

Κατηγορία: Transfection πρωτόκολλα

Το πρωτόκολλο πρέπει να εμφανιστεί ως αφετηρία για τη συστηματική βελτιστοποίηση transfection που μεσολαβούν με οι πράκτορες. Μόλις ληφθεί ένα θετικό σήμα από το α το πλασμίδιο που φέρνει ένα πρότυπο γονίδιο δημοσιογράφων, οι βέλτιστοι όροι για transfection μπορούν να καθιερωθούν από τη συστηματική παραλλαγή των παραμέτρων όπως η αρχική πυκνότητα κυττάρων, το ποσό και η αγνότητα του DNA, τα μέσα και ο ορός, και ο χρόνος της έκθεσης των κυττάρων στο κατιονικός-λιπίδιο-DNA σύνθετο. - [Διαβασμένοσ transfection DNA από Lipofection που μεσολαβεί Protocol]

Κατηγορία: Η αναπτυξιακή βιολογία: Πρωτόκολλα εμβρυολογίας

Οι δεσμευτικές εξαρτήσεις δοκιμής caspase FAM από atcc την εταιρία μπορούν να χρησιμοποιηθούν για να καθορίσουν τα ποσά ενεργών caspases στα κύτταρα. Ο φαμ-επονομαζόμενος ανασταλτικός παράγοντας caspase μπορεί ελεύθερα να διασκορπίσει στο κύτταρο. Το ενεργό caspase δεσμεύει αμετάκλητα τον ανασταλτικό παράγοντα. Επάνω στο πλύσιμο των κυττάρων, το ποσό φθορισμού είναι ανάλογο προς το ποσό ενεργού caspase στο κύτταρο. Φαμ- Letd (κατάλογος αριθ. 30-1306) χρησιμοποιείται για να ανιχνεύσει το caspase 8 και φαμ- Lehd (κατάλογος αριθ. 30-1308) χρησιμοποιείται για το caspase 9. - [Διαβασμένοσ Fam δεσμευτική δοκιμή 8 και 9 Caspase για το πρωτόκολλο εμβρύων]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα Microinjection: Microinjection των πρωτοκόλλων DNA

Αυτό το πρωτόκολλο περιγράφει μια μέθοδο για το microinjection σταθερός-ροής χρησιμοποιώντας το πνευματικό PicoPump (όργανα παγκόσμιας ακρίβειας). Αυτός ο τύπος συστήματος είναι πολύ απλός και μπορεί να συγκεντρωθεί σε έναν σχετικά χαμηλό προϋπολογισμό. Σε αυτήν την μέθοδο, μια σταθερή ροή του δείγματος παραδίδεται από την άκρη του σιφωνίου, και το ποσό δείγματος που εγχέεται στο κύτταρο καθορίζεται από πόσο καιρό πολύ το σιφώνιο παραμένει στο κύτταρο. - [Διαβασμένος την παράδοση γονιδίων από την άμεση έγχυση (Microinjection) που χρησιμοποιεί ένα πρωτόκολλο συστημάτων ελέγχω-ροήσ]

Κατηγορία: Δυτικά πρωτόκολλα λεκέδων: Γενικά δυτικά πρωτόκολλα μεθόδων λεκέδων

Για τα πειράματα, είναι συχνά σημαντικό να συγκριθεί το συνολικό ποσό ενός αντιγόνου από πολλές διαφορετικές πηγές ή να μάθει εάν μια ιδιαίτερη πηγή έχει το αντιγόνο κάτω από τη μελέτη.  Στην προσέγγιση που περιγράφεται εδώ, οι καλλιέργειες ιστού, τα βακτηρίδια, τα κύτταρα ζύμης, οι ιστοί, και άλλες πηγές αντιγόνων αναστατώνονται άμεσα σε ένα δείγμα ηλεκτροφόρησης. - [Διαβασμένοσ Immunoblotting: Προετοιμάζοντας το πρωτόκολλο Lysates κυττάρων]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα ζύμης

Πρωτόκολλο για in vitro endoplasmic reticulum στην αντίδραση μεταφορών golgi στη ζύμη. Περιλαμβάνει: Προετοιμασία των μεμβρανών One-Stage αντίδραση Δύο σταδίων αντίδραση που χρησιμοποιεί το κανονικό ποσό μεμβρανών Δύο σταδίων αντίδραση που χρησιμοποιεί τη χαμηλή συγκέντρωση των μεμβρανών. - [Διαβασμένος in vitro endoplasmic reticulum στην αντίδραση μεταφορών Golgi στο πρωτόκολλο ζύμησ]

Κατηγορία: Ανοσολογία: Μονοπύρηνα πρωτόκολλα απομόνωσης κυττάρων

Αυτό το πρωτόκολλο χρησιμοποιεί το μέρος PBMC που εμπλουτίζεται μέσα με τα μονοκύτταρα από τις φυγοκεντρικότητες κλίσης πυκνότητας (το πρωτόκολλο μπορεί να βρεθεί σε www.methods.info). Η μείωση του ποσού μικροσφαιρωμάτων σε σύγκριση με το πρωτόκολλο Miltenyi μειώνει τις δαπάνες του πειράματος. - [Διαβασμένος την απομόνωση των μονοκυττάρων από εμπλουτισμένο PBMCs που χρησιμοποιούν CD14 το μαγνητικό πρωτόκολλο χαντρών]

Κατηγορία: Η βιολογία κυττάρων και κυτταροκαλλιέργεια

Αυτό το πρωτόκολλο χρησιμοποιεί το μέρος PBMC που εμπλουτίζεται μέσα με τα μονοκύτταρα από τις φυγοκεντρικότητες κλίσης πυκνότητας. Η μείωση του ποσού μικροσφαιρωμάτων μειώνει τις δαπάνες του πειράματος. - [Διαβασμένος την απομόνωση των μονοκυττάρων από εμπλουτισμένο το μονοκύτταρο μέρος PBMC που χρησιμοποιεί CD14]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα κλωνοποίησης

Πρωτόκολλο για την επίδεση του πλασμιδίου και του στόχου DNAs στο αγαρόζη χαμηλός-λειώνω-θερμοκρασίας. Ligation στο αγαρόζη χαμηλός-λειώνω-θερμοκρασίας είναι πολύ λιγότερο αποδοτικό από ligation με το καθαρισμένο DNA στην ελεύθερη λύση και απαιτεί ένα μεγάλο ποσό ligase DNA. Η μέθοδος χρησιμοποιείται κυρίως για γρήγορη των τμημάτων μνήμης του DNA στα dephosphorylated διανύσματα και τα ανασυνδυαζόμενα κατασκευάσματα συγκέντρωσης. - [Διαβασμένος την επίδεση του πλασμιδίου και του στόχου DNAs στο πρωτόκολλο αγαρόζης χαμηλός-λειώνω-θερμοκρασίασ]

Κατηγορία: Προερχόμενα από ιό πρωτόκολλα πολιτισμού και απομόνωσης: Προερχόμενα από ιό πρωτόκολλα πολιτισμού

5 μιλ. υγρού lysates είναι έτοιμα όταν απαιτείται ένα μικρό ποσό του DNA από έναν μεγάλο αριθμό κλώνων λάμδα. Τα lysates μπορούν να γίνουν χρησιμοποιώντας το ul 10 20 ενός αποθέματος lysate ή ενός 100 φορές ενισχυμένου phage "macroplaque" ως εμβόλιο. - [Διαβασμένος το υγρό phage πρωτόκολλο Lysates]

Κατηγορία: Πρωτεϊνικά πρωτόκολλα: Πρωτεϊνικά πρωτόκολλα συγκέντρωσης ποσοτικού προσδιορισμού

Βρείτε έναν κατάλογο δοκιμών για τον προσδιορισμό της πρωτεϊνικής συγκέντρωσης σε μια λύση.  Αυτός ο κατάλογος περιλαμβάνει τη σειρά ευαισθησίας, την ένταση του ήχου/το ποσό δείγματος που απαιτούνται, τα υποκειμενικά σχόλια στην ακρίβεια και την ευκολία, και τους σημαντικούς παρεμβαίνοντας πράκτορες.  Οι διαδικαστικές λεπτομέρειες, οι απαιτήσεις εξοπλισμού, και οι αναφορές περιγράφονται στα μεμονωμένα έγγραφα δοκιμής. - [Διαβασμένος τον κατάλογο πρωτεϊνικών δοκιμών]

Κατηγορία: Δοκιμές γονιδίων δημοσιογράφων: Πρωτόκολλα δοκιμής GFP

Το πρωτόκολλο που μετρά το ποσό έκφρασης GFP και περιεκτικότητας σε DNA μέσα τα κύτταρα. Περιλαμβάνει: Κύτταρα αποτυπώσεων με τη φορμαλδεϋ'δη Κύτταρα Permeabilize με την αιθανόλη Προετοιμασία της αποθηκευμένης λύσης φορμαλδεϋ'δης 2%. - [Διαβασμένος τη μέτρηση της έκφρασης GFP και της περιεκτικότητας σε DNA στα κύτταρα Permeabilized]

Κατηγορία: Πρωτόκολλα DNA: Pcr πρωτόκολλα αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσεων: Πρότυπο pcr πρωτόκολλο

Pcr και πολλαπλός οδηγός. Καταπληκτικός οδηγός για το ποσό εγχυτήρων, το ποσό MgCl2, την ανοπτώντας θερμοκρασία, και περισσότερους. Με τα παραδείγματα εικόνων. Octavian Henegariu. - [Διαβασμένοσ pcr και τον πολλαπλό οδηγό]

Κατηγορία: Pcr πρωτόκολλα: Πρότυπο pcr πρωτόκολλο

Pcr και πολλαπλός οδηγός. Καταπληκτικός οδηγός για το ποσό εγχυτήρων, το ποσό MgCl2, την ανοπτώντας θερμοκρασία, και περισσότερους. Με τα παραδείγματα εικόνων. Octavian Henegariu. - [Διαβασμένοσ pcr και τον πολλαπλό οδηγό]