Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

"Οικία" Proteomics	Μοριακός σταθμός πρωτοκόλλων Proteomic	Πρωτόκολλα Proteomic (εξωτερικές συνδέσεις)	Βιοπληροφορική Proteomic	Proteomic FAQ	Εξαρτήσεις και προϊόντα Proteomic	Φόρουμ Proteomic	Proteomics Blog	Βιβλία σε Proteomics	Ειδήσεις Proteomic

Πρωτεϊνικές τεχνικές προσδιορισμού

Οι πρωτεϊ'νες μπορούν να είναι από τη 2$α ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων και προσδιόρισαν με τη μαζική φασματομετρία

Η περιεκτικότητα σε πρωτεϊ'νη ενός κυττάρου υπολογίζεται για να αποτελεσθεί από χιλιάδες διαφορετικοί τύποι πρωτεϊνών
με μια δυναμική περιοχή της έκφρασης. Η τεχνολογία που χρησιμοποιείται αυτήν την περίοδο περιλαμβάνει την ανάκτηση των πρωτεϊνικών συστατικών, fractionation αυτού του πολύ σύνθετου μίγματος,
ενζυματικό proteolysis κάθε ένα χώρισε και απομόνωσε τα είδη, την εκτενή μαζική spectrometric ανάλυση και τελικά το ταίριασμα των δομικών στοιχείων που παρήχθησαν ενάντια σε μια βάση δεδομένων των γνωστών πρωτεϊνών ή προσδόκησε τα προϊόντα έκφρασης γονιδιώματος.
Αυτή η διαδικασία περιλαμβάνει ένα αρχικό βήμα χρησιμοποιώντας 1 ή την 2-διαστατική ηλεκτροφόρηση (DE). Χρησιμοποιώντας το 1-de, οι πρωτεϊ'νες είναι χωρισμένες βάσει της μοριακής μάζας η τεχνική είναι αναπαραγώγιμη και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τις πρωτεϊ'νες στη μαζική σειρά 10–300 kDa, αλλά έχει περιορίσει το ψήφισμα.
Για το χωρισμό των πιό σύνθετων πρωτεϊνικών μιγμάτων, το 2-de είναι η συνιστώμενη μέθοδος. Αυτό περιλαμβάνει το χωρισμό των πρωτεϊνών fiρστ σύμφωνα με την καθαρή δαπάνη τους από ένα βήμα ισοηλεκτρικής εστίασης και έπειτα, στη δεύτερη διάσταση, σύμφωνα με τη μοριακή μάζα τους υιοθετώντας την dodecyl ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων άλας-πολυαθρυλαμηδε νατρίου (σδς-ΣΕΛΊΔΑ) που δίνει έναν υψηλό χωρισμό efficiency.
 Η μαζική φασματομετρία (MS) είναι η μέθοδος επιλογής για το identification
από τις χωρισμένες πρωτεϊ'νες, και τη φασματομετρία 2-de και μάζας
τώρα αντιπροσωπεύστε μια τεχνολογία από την οποία αρκετές χιλιάες πρωτεϊ'νες μπορούν να χωριστούν, ανιχνευμένος και identified σε μια αυτοματοποιημένη μόδα.
Η μεθοδολογία Proteomics γίνεται αρχικά από τον πρωτεϊνικούς χωρισμό και τη θέση από 2-DE που ακολουθείται από την αποκοπή των πρωτεϊνών ενδιαφέροντος που υποβάλλονται έπειτα στην proteolytic πέψη για να παραγάγουν ένα μίγμα τεμαχίων πεπτιδίων. Τα πεπτίδια αναλύονται από τη μαζική φασματομετρία, χρησιμοποιώντας αρχικά τα μαλδη-κράτη μέλη για το μοριακούς μαζικό προσδιορισμό και την παραγωγή μιας μάζας fiνγερπρηντ πεπτιδίων. Εάν η έρευνα βάσεων δεδομένων παράγει σε αυτή τη φάση τα διφορούμενα αποτελέσματα, μια spectrometric ανάλυση δεύτερης μάζας, εση-κράτη μέλη/κράτη μέλη, χρησιμοποιείται για να παραγάγει τις πληροφορίες ακολουθίας που χρησιμοποιούνται για την πιό αυστηρή έρευνα βάσεων δεδομένων.
Από το μαζικό φάσμα που λαμβάνεται στην ανάλυση του πρωτεϊνικού μίγματος αφομοιώσεων, του μαζικού χάρτη ή της μάζας fiνγερπρηντ πεπτιδίων πεπτιδίων δηλ. οι μοριακές μάζες των τεμαχίων πεπτιδίων, μπορούν να εξακριβωθούν. Συχνά, εάν η ακολουθία αμινοξέος είναι sufficiently μοναδικό και η μάζα
η ακρίβεια sufficiently υψηλή, ο μαζικός χάρτης μπορεί να χρησιμοποιηθεί στις βάσεις δεδομένων 12 15–αναζήτησης για να προσδιορίσει την πρωτεϊ'νη επιτυχώς χωρίς την ανάγκη για τις περαιτέρω αναλύσεις. Εάν, εντούτοις, η έρευνα βάσεων δεδομένων οδηγεί στα διφορούμενα αποτελέσματα, κατόπιν οι περαιτέρω αναλύσεις κρατών μελών, που περιλαμβάνουν τη χρήση της διαδοχικής μαζικής φασματομετρίας (κράτη μέλη/κράτη μέλη), αναλαμβάνονται διαδοχικά σε κάθε πεπτίδιο στο μίγμα για να παραγάγουν μια ακολουθία, ή τη μερική ακολουθία, γνωστή ως ετικέττα ακολουθίας, για αυτά τα πεπτίδια. Αυτό επιτυγχάνεται συχνά με την χρήση των εση-κρατών μελών/MS19 και συνήθως ένα πρόσθετο βήμα purification πρέπει να εκτελεσθεί για να χωρίσει τα πεπτίδια από τα άλατα και τα απορρυπαντικά που μπορούν να είναι παρόντα που προκαλούν τη μείωση του σήματος πεπτιδίων.

Περαιτέρω βάση δεδομένων που ψάχνει και με την δύο μοριακή μάζα του πεπτιδίου
και οι πληροφορίες ετικεττών ακολουθίας πρέπει να οδηγήσουν σε σαφές πρωτεϊνικό identification.