Μεμβράνη που γδύνει και πρωτόκολλο επαν-εξέτασης -
δυτικό λέκιασμα
Γδύσιμο μεμβρανών και πρωτόκολλο Reprobing για το
δυτικό λέκιασμα
Λεκέδες Stipping και επαν-εξέτασης
- προσθέστε 280 μλ του
2-βήτα-μερθαπτοετχανολ ανά 40 mL του γδυσίματος του
προσωρινού χώρου (σε μια τελική συγκέντρωση 100 mM)
- Πλύντε τη μεμβράνη σε TBST (1 Θ*Ξ 5 λ.)
- Επωάστε τη μεμβράνη στο γδύσιμο του προσωρινού χώρου
για 30 λ. σε 50- 60°C (χρησιμοποιήστε έναν φούρνο θέρμανσης
για αυτό - και κρατήστε την πόρτα φούρνων κλειστή λόγω για να
μυρίσει)
- Πλύσιμο σε TBST (2 Θ*Ξ 5 λ.)
- Μεμβράνη ομάδων δεδομένων για 1 χ στο εμποδίζοντας
γάλα 5%
- Ακολουθήστε το κανονικό πρωτόκολλο για την ανάπτυξη
των δυτικών λεκέδων.
- Συνταγή προσωρινών χώρων γδυσίματος μεμβρανών:
- Γδύνοντας προσωρινός χώρος: 62.5 mM τρης-
HCl (pH 6.8), 2% SDS. (προσθέστε το ul 280 του
2-βήτα merceptoethanol ή μια τελική συγκέντρωση 0,1 μ 2-
mecaptoethanol).
- Δείτε το δυτικό λεκιάζοντας πρωτόκολλό μας
Αλλα πρωτεϊνικά πρωτόκολλα στη βάση δεδομένων πρωτοκόλλου μας
Τα πρωτεϊνικά πρωτόκολλά
μας