Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

Pcr πρωτόκολλα	Pcr βιοπληροφορική και βάσεις δεδομένων	Μάθετε για pcr	Pcr εξαρτήσεις και προϊόντα	Pcr φόρουμ	Pcr βιβλία

Pcr δείγματα και DNA προτύπων

DNA προτύπων και δείγματα για pcr

Οδηγίες για το DNA προτύπων και τα δείγματα για pcr:

Pcr δείγματα:  Τύποι, ποσό και αγνότητα

Τύποι δειγμάτων για pcr

Ενιαίος - ή το double-stranded DNA οποιασδήποτε προέλευσης μπορεί να είναι ένα pcr δείγμα. Τα πρότυπα που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ενίσχυση περιλαμβάνουν ζωικός, βακτηριακός, το φυτό, ή προερχόμενος από ιό. Την η μετατροπή των μορίων RNA, συμπεριλαμβανομένου του συνολικού RNA, πολυ (A +) RNA, προερχόμενο από ιό RNA, tRNA, ή rRNA πρέπει να εμφανιστεί πριν από την ενίσχυση κατά χρησιμοποίηση αυτών ως πρότυπα στο αποκαλούμενο συμπληρωματικό DNA (DNA) από το ενζυμικό αντίστροφο transcriptase (είτε πολυμεράση DNA MuLV είτε ανασυνδυαζόμενος, rTth).

Ποσό υλικού για pcr

Το ποσό αρχικού υλικού, που απαιτείται για pcr μπορεί να είναι τόσο λίγα όσο ένα ενιαίο μόριο.  Δεδομένου ότι μια βάση, μέχρι τα ποσά nanogram του DNA κλωνοποίησε το πρότυπο, μέχρι τα ποσά μικρογραμμαρίων του genomic DNA, ή μέχρι 105 DNA τα μόρια στόχων είναι καλύτερα για την αρχική pcr δοκιμή.

Αγνότητα του προτύπου και του δείγματος για pcr

Η αγνότητα του δείγματος DNA που θα χρησιμοποιηθεί για pcr την ενίσχυση δεν χρειάζεται να είναι υψηλή. Ένα μονό κύτταρο, ένα ακατέργαστο κύτταρο lysate, ή ακόμα και ένα μικρό δείγμα του υποβιβασμένου προτύπου DNA είναι συνήθως επαρκή για την επιτυχή ενίσχυση. Οι απαιτήσεις της αγνότητας δειγμάτων πρέπει να είναι ότι ο στόχος περιέχει τουλάχιστον ένα άθικτο σκέλος DNA καλύπτοντας την ενισχυμένη περιοχή και ότι οι ακαθαρσίες που συνδέονται με το στόχο είναι αραιές ώστε να μην εμποδιστεί η ενζυμική δραστηριότητα. Να είστε ότι όπως μπορεί, για μερικές ενισχύσεις, όπως μακροχρόνιο pcr, μπορεί να είναι απαραίτητο να εξετάσει η ποιότητα και η ποσότητα του δείγματος DNA. Παραδείγματος χάριν: 1. Όταν περισσότερα μόρια προτύπων είναι διαθέσιμα, υπάρχουν λιγότερα περιστατικά των ψεύτικων θετικών που προκαλούνται από είτε την παράλληλη μόλυνση μεταξύ των δειγμάτων είτε “της μόλυνσης” μεταφοράς από τις προηγούμενες pcr ενισχύσεις.

2. Όταν οι pcr ενισχύσεις στερούνται την ιδιομορφία ή την αποδοτικότητα, ή όταν περιορίζονται οι ακολουθίες στόχων, υπάρχει μια μεγαλύτερη πιθανότητα της ανεπαρκούς παραγωγής προϊόντων.

3. Όταν το μέρος του αρχικού DNA διαθέσιμο pcr είναι αβέβαιο, είναι όλο και περισσότερο δύσκολο να καθοριστεί η περιεκτικότητα σε DNA στόχων.