Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

Proteomics

Πληροφορίες για τον τρόπο με τον οποίο το proteome ή το σύνολο πρωτεϊνών σε ένα κύτταρο μελετάται.

Μέθοδοι Proteomoics

Η περιεκτικότητα σε πρωτεϊ'νη ενός κυττάρου υπολογίζεται για να αποτελεσθεί από χιλιάδες διαφορετικοί τύποι πρωτεϊνών με μια δυναμική περιοχή της έκφρασης. Η τεχνολογία που χρησιμοποιείται αυτήν την περίοδο περιλαμβάνει την ανάκτηση των πρωτεϊνικών τμημάτων, fractionation αυτού του πολύ σύνθετου μίγματος, ενζυματικό proteolysis κάθε ένα που χωρίζεται και που απομονώνεται είδη, της εκτενούς μαζικής spectrometric ανάλυσης και τελικά του ταιριάσματος των δομικών στοιχείων που παράγονται ενάντια σε μια βάση δεδομένων των γνωστών πρωτεϊνών ή προσδόκησε τα προϊόντα έκφρασης γονιδιώματος.

Αυτή η διαδικασία περιλαμβάνει ένα αρχικό βήμα χρησιμοποιώντας 1 ή την 2-διαστατική ηλεκτροφόρηση (DE). Χρησιμοποιώντας το 1-de, οι πρωτεϊ'νες είναι χωρισμένες βάσει της μοριακής μάζας η τεχνική είναι αναπαραγώγιμη και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τις πρωτεϊ'νες στη μαζική σειρά 10–300 kDa, αλλά έχει περιορίσει το ψήφισμα. Για το χωρισμό των πιό σύνθετων πρωτεϊνικών μιγμάτων, το 2-de είναι η συνιστώμενη μέθοδος. Αυτό περιλαμβάνει να χωρίσει τις πρωτεϊ'νες πρώτα σύμφωνα με την καθαρή δαπάνη τους από ένα βήμα ισοηλεκτρικής εστίασης και έπειτα, στη δεύτερη διάσταση, σύμφωνα με τη μοριακή μάζα τους υιοθετώντας την dodecyl ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων άλας-πολυαθρυλαμηδε νατρίου (σδς-ΣΕΛΙΔΑ) που δίνει ένα υψηλό eciency χωρισμού.

 Η μαζική φασματομετρία (MS) είναι η μέθοδος επιλογής για τον προσδιορισμό των χωρισμένων πρωτεϊνών, και η φασματομετρία 2-de και μάζας αντιπροσωπεύει τώρα μια τεχνολογία από την οποία αρκετές χιλιάες πρωτεϊ'νες μπορούν να χωριστούν, να ανιχνευθούν και να προσδιοριστούν σε μια αυτοματοποιημένη μόδα.

Η μεθοδολογία Proteomics γίνεται αρχικά από τον πρωτεϊνικούς χωρισμό και τη θέση από 2-DE που ακολουθείται από την αποκοπή των πρωτεϊνών ενδιαφέροντος που υποβάλλονται έπειτα στην proteolytic πέψη για να παραγάγουν ένα μίγμα τεμαχίων πεπτιδίων. Τα πεπτίδια αναλύονται από τη μαζική φασματομετρία, χρησιμοποιώντας αρχικά τα μαλδη-κράτη μέλη για το μοριακούς μαζικό προσδιορισμό και την παραγωγή ενός μαζικού δακτυλικού αποτυπώματος πεπτιδίων. Εάν η έρευνα βάσεων δεδομένων παράγει σε αυτή τη φάση τα διφορούμενα αποτελέσματα, μια spectrometric ανάλυση δεύτερης μάζας, εση-κράτη μέλη/κράτη μέλη, χρησιμοποιείται για να παραγάγει τις πληροφορίες ακολουθίας που χρησιμοποιούνται για την πιό αυστηρή έρευνα βάσεων δεδομένων.

Από το μαζικό φάσμα που λαμβάνεται στην ανάλυση του πρωτεϊνικού μίγματος αφομοιώσεων, του μαζικού χάρτη πεπτιδίων ή του μαζικού δακτυλικού αποτυπώματος πεπτιδίων δηλ. οι μοριακές μάζες των τεμαχίων πεπτιδίων, μπορούν να εξακριβωθούν. Συχνά, εάν η ακολουθία αμινοξέος είναι αρκετά μοναδική και η μαζική ακρίβεια αρκετά υψηλή, ο μαζικός χάρτης μπορεί να χρησιμοποιηθεί στις βάσεις δεδομένων 12 15–αναζήτησης για να προσδιορίσει την πρωτεϊ'νη επιτυχώς χωρίς την ανάγκη για τις περαιτέρω αναλύσεις. Εάν, εντούτοις, η έρευνα βάσεων δεδομένων οδηγεί στα διφορούμενα αποτελέσματα, κατόπιν οι περαιτέρω αναλύσεις κρατών μελών, που περιλαμβάνουν τη χρήση της διαδοχικής μαζικής φασματομετρίας (κράτη μέλη/κράτη μέλη), αναλαμβάνονται διαδοχικά σε κάθε πεπτίδιο στο μίγμα για να παραγάγουν μια ακολουθία, ή τη μερική ακολουθία, γνωστή ως ετικέττα ακολουθίας, για αυτά τα πεπτίδια. Αυτό επιτυγχάνεται συχνά με την χρήση των εση-κρατών μελών/MS19 και συνήθως ένα πρόσθετο βήμα καθαρισμού πρέπει να εκτελεσθεί για να χωρίσει τα πεπτίδια από τα άλατα και τα απορρυπαντικά που μπορούν να είναι παρόντα που προκαλούν τη μείωση του σήματος πεπτιδίων.

Η περαιτέρω βάση δεδομένων που ψάχνει και με τη μοριακή μάζα του πεπτιδίου και με τις πληροφορίες ετικεττών ακολουθίας πρέπει να οδηγήσει στο σαφή πρωτεϊνικό προσδιορισμό.

Σχετικές πληροφορίες Proteomics:

Proteomics

Σταθμός Proteomics

Μοριακός σταθμός 2006 πνευματικών δικαιωμάτων