Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

FACS

Η τεχνική FACS

Τα στηργμένος λεμφοκύτταρα περιλαμβάνουν πολλά λειτουργικά υποσύνολα πληθυσμού, τα οποία προσδιορίζονται και διακρίνονται το ένα από το άλλο βάσει της διαφορικής έκφρασης κληρονόμων των πρωτεϊνών επιφάνειας κυττάρων, η οποία μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας τα συγκεκριμένα αντισώματα.

Ροή Cytometry

Ένα ισχυρό εργαλείο για και τα λεμφοκύτταρα είναι το cytometer ροής, το οποίο ανιχνεύει και μετρά τα μεμονωμένα κύτταρα που περνούν σε ένα ρεύμα μέσω μιας ακτίνας λέιζερ. Ένα cytometer ροής που εξοπλίζεται για να χωρίσει τα προσδιορισμένα κύτταρα καλείται φθορισμός-ενεργοποιημένο διαλογέα κυττάρων (FACS). Αυτά τα όργανα χρησιμοποιούνται για να μελετήσουν τις ιδιότητες των υποσυνόλων κυττάρων που προσδιορίζονται χρησιμοποιώντας τα μονοκλονικά αντισώματα στις πρωτεϊ'νες κύτταρο-επιφάνειας. Τα μεμονωμένα κύτταρα μέσα σε έναν μικτό πληθυσμό κολλιούνται αρχικά από την επεξεργασία με τα συγκεκριμένα μονοκλονικά αντισώματα που ονομάζονται με τις φθορισμού χρωστικές ουσίες, ή από τα συγκεκριμένα αντισώματα που ακολουθούνται από τα επονομαζόμενα αντισώματα αντι-ανοσοσφαιρινών. Το μίγμα επονομαζόμενων κυττάρων αναγκάζεται έπειτα με μια πολύ ένταση του ήχου arger αλατούχου μέσω ενός ακροφυσίου, δημιουργώντας ένα λεπτό ρεύμα του υγρού που περιέχει τα κύτταρα που χωρίζονται κατά διαστήματα μεμονωμένα σε διαστήματα. Καθώς κάθε κύτταρο περνά μέσω μιας ακτίνας λέιζερ διασκορπίζει το φως λέιζερ, και οποιαδήποτε μόρια χρωστικών ουσιών που δεσμεύονται στο κύτταρο θα διεγερθούν και θα φθορίσουν.

Οι ευαίσθητοι σωλήνες φωτοπολλαπλασιαστών ανιχνεύουν και το διεσπαρμένο φως, που δίνουν τις πληροφορίες για το μέγεθος και την κοκκοποίηση του κυττάρου, και τις εκπομπές florescence, οι οποίοι δίνουν τις πληροφορίες για το συσχετισμό των επονομαζόμενων μονοκλονικών αντισωμάτων και επομένως στην έκφραση των πρωτεϊνών κύτταρο-επιφάνειας από κάθε κύτταρο. Στο διαλογέα κυττάρων, τα σήματα που περνούν πίσω στον υπολογιστή χρησιμοποιούνται για να παραγάγουν μια ηλεκτρική δαπάνη, η οποία περνούν από το ακροφύσιο μέσω του υγρού ρεύματος στον ακριβή χρόνο που το ρεύμα χωρίζει στα σταγονίδια, κάθε ένα που περιέχει ένα λιγότερος από μονό κύτταρο τα σταγονίδια που περιέχουν μια δαπάνη μπορούν έπειτα να εκτραπούν από το βασικό ρεύμα των σταγονίδιων καθώς περνούν μεταξύ των πιάτων της αντίθετης δαπάνης, έτσι ώστε τα θετικά χρεωμένα σταγονίδια προσελκύονται σε ένα αρνητικά χρεωμένο πιάτο, και αντίστροφα. Κατ' αυτό τον τρόπο, τα συγκεκριμένα υποσύνολα πληθυσμού των κυττάρων, που διακρίνονται από το συσχετισμό του επονομαζόμενου αντισώματος, μπορούν να καθαριστούν από έναν μικτό πληθυσμό των κυττάρων. Εναλλακτικά, για να μειώσει έναν πληθυσμό των κυττάρων, ίδιο fluorochrome μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να ονομάσει τα διαφορετικά αντισώματα που κατευθύνονται στις πρωτεϊ'νες δεικτών που εκφράζονται από τους διάφορους ανεπιθύμητους τύπους κυττάρων.

Ταξινόμηση κυττάρων

Ο διαλογέας κυττάρων μπορεί να χρησιμοποιηθεί στα άμεσα επονομαζόμενα κύτταρα σε ένα κανάλι αποβλήτων, που διατηρεί μόνο τα unlabeled κύτταρα. Όταν τα κύτταρα ονομάζονται με ένα ενιαίο φθορισμού αντίσωμα, τα στοιχεία από το cytometer ροής παρουσιάζονται συνήθως υπό μορφή ιστογράμμου της έντασης φθορισμού εναντίον των αριθμών κυττάρων. Εάν δύο ή περισσότερα αντισώματα χρησιμοποιούνται, κάθε ένα που συνδέεται με τη διαφορετική φθορισμού χρωστική ουσία, κατόπιν τα στοιχεία παρουσιάζεται πιό συνήθως αυτός διαμορφώνει ενός δισδιάστατου διαγράμματος διασποράς ή ως διάγραμμα περιγράμματος, όπου ο φθορισμός του ενός ουσία-επονομαζόμενος το αντίσωμα σχεδιάζεται ενάντια σε αυτόν ενός δευτερολέπτου, με αποτέλεσμα ένας πληθυσμός των κυττάρων που ονομάζουν με ένα αντίσωμα να μπορεί να υποδιαιρεθεί περαιτέρω με το μαρκάρισμά του με το δεύτερο αντίσωμα. Με την εξέταση των μεγάλων αριθμών κυττάρων, ρεύστε cytometry μπορεί να δώσει τα ποσοτικά στοιχεία όσον αφορά το ποσοστό των κυττάρων που αντέχουν τα διαφορετικά μόρια. Δεδομένου ότι η δύναμη της τεχνολογίας FACS έχει αυξηθεί, σταδιακά περισσότερα αντισώματα που ονομάζονται με τις ευδιάκριτες φθορισμού χρωστικές ουσίες μπορούν να χρησιμοποιηθούν συγχρόνως.

Τρία, τέσσερα και ακόμη και πέντε αναλύσεις χρώματος μπορούν τώρα να αντιμετωπιστούν από τις πολύ ισχυρές μηχανές

Πρωτόκολλα FACS