Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

 

Πρωτόκολλα DNA

Εγκυκλοπαίδεια DNA

Βιοπληροφορική DNA

Φόρουμ DNA

DNA Blog

Ειδήσεις DNA

Βιβλία DNA

 

Πρωτόκολλο αλκαλικών φωσφατάσεων γαρίδων SAP

Η αλκαλική φωσφατάση γαρίδων ή το SAP, είναι ένα ένζυμο που καταλύει dephosphorylation 5’ φωσφορικών αλάτων από τις dephosphorylating άκρες RNA νουκλεϊνικού οξέος ή DNA.

Σημειώστε ότι pcr τα προϊόντα και επίσης εγχυτήρες δεν έχουν τις φωσφατάσεις στις ελεύθερες άκρες τους, και επομένως να πρέπει να είναι phosphorylated πριν από την κλωνοποίηση εάν πρόκειται να χρησιμοποιήσετε ένα de-phosphorylated διάνυσμα!

Το SAP είναι θερμοκρασία ασταθής είναι επομένως εσείς μπορεί εύκολα να απενεργοποιήσει αυτό το ένζυμο (έναντι σε CIP!). Το SAP απενεργοποιείται με την επώαση λουτρών ύδατος 65°C για 15 λεπτά.

Δεν παίρνετε ουσιαστικά καμία αντίδραση. Το SAP απαιτεί τουλάχιστον 10mM MgCl2 (αλλά η βέλτιστη ενζυμική δραστηριότητα της αλκαλικής φωσφατάσης γαρίδων είναι κατά 2025mM MgCl2) και λειτουργεί καλά στο pH 8,0.

Dephosphorylate 1 pmol του DNA τελειώνει

Dephosphorylate 1 pmol των ακρών DNA (2,5 ug του πλασμιδίου 3 KB), για 1hr σε 37°C πρέπει:

0,1 μονάδες του SAP για 5 "προεξοχές, 0,2 μονάδες για αμβλύ και 0,5 μονάδες για 3" κρεμούν.
Το ένζυμο έρχεται 1 μονάδα ανά ul, κατά συνέπεια για να είστε ασφαλείς μπορείτε να χρησιμοποιήσετε τις μονάδες approx.0.5 για 2 ug.

ΑΚΡΕΣ: Το ένζυμο SAP μπορεί να προστεθεί άμεσα στην αφομοίωση περιορισμοΰ Κατά συνέπεια το σύνολο που προχωρά συμπεριλαμβανομένης της ενζυμικής πέψης περιορισμού, dephosphorylation, της ενζυμικής αδρανοποίησης, ligation ή 5’ τέλος-που ονομάζουν μπορεί να εκτελεσθεί σε έναν ενιαίο σωλήνα με ακριβώς να προσθέσει τα κατάλληλα αντιδραστήρια. Αυτό θα επιτρέψει σε σας για να κερδίσει χρόνο και να είναι αποδοτικούς!

Ανιχνευώντας λάθη αλκαλική φωσφατάση γαρίδων SAP;

Συζητήστε και ταχυδρομήστε τις ερωτήσεις για το στην αλκαλική φωσφατάση γαρίδων και το κλωνοποιώντας φόρουμ DNA !

Πρωτόκολλα και μέθοδοι άλλα DNA

Οδηγός κλωνοποίησης DNA

Ηλεκτροφόρηση πηκτωμάτων DNA

Η ενζυμική πέψη περιορισμού - όλοι εσείς πρέπει να ξέρεϊ

Πρωτόκολλο απομόνωσης DNA Genomic

Απομόνωση DNA Baceteria

Μετασχηματισμός DNA - περιέχει την ιστορία του DNA

Βρείτε άλλα πρωτόκολλα στον εξωτερικό κατάλογο αρχείων των στοιχείων συμπεριφοράς πρωτοκόλλων DNA μας ή δείτε τα πρωτόκολλα DNA μασ.

Σχετικός:

Πρωτόκολλα DNA Microarray

Pcr πρωτόκολλα

Βιοπληροφορική DNA

Βιοπληροφορική DNA επίσκεψησ.

DNA-SHETJKO'S ειδήσεις

Ειδήσεις DNA