Υποδοχή στο μοριακό σταθμό!

Πρέπει να καταχωρήσετε προτού να μπορέσετε να ταχυδρομήσετε στα φόρουμ μας ή να χρησιμοποιήσετε τα προηγμένα χαρακτηριστικά γνωρίσματά μας. Κατάλογος τώρα! Ελεύθερος και γρήγορος του!

Ήδη καταχωρημένος; Αδεια εισόδου τώρα κατωτέρω.

Όνομα χρηστών:

Κωδικός πρόσβασης:

Με θυμηθείτε;

Ήδη καταχωρημένος και ξέχασε τον κωδικό πρόσβασής σας; Χτυπήστε κατωτέρω για να το ανακτήσετε.

Ανακτήστε το χαμένο κωδικό πρόσβασης

Ενώστε τώρα - είναι γρήγορο και ελεύθερο!

Ο μοριακός σταθμός είναι το μεγαλύτερο δίκτυο ερευνητών, επιστημόνων και εραστών επιστήμης οπουδήποτε!

Πρόσφατες θέσεις φόρουμ

 

Πρωτόκολλα DNA

Εγκυκλοπαίδεια DNA

Βιοπληροφορική DNA

Φόρουμ DNA

DNA Blog

Ειδήσεις DNA

Βιβλία DNA

 

Τεμάχια DNA καθαρισμού αγαρόζης

Μοριακός σταθμός πνευματικών δικαιωμάτων 2007

Καθαρισμός τεμαχίων DNA από το πρωτόκολλο αγαρόζης

1. DNA τρεξίματος στο πήκτωμα αγαρόζης "χαμηλών λειωμένων μετάλλων".
2. Για τα τεμάχια DNA 600bp 5kb use1% Για 300- 700bp τη χρήση 2% αγαρόζη. Εάν πρέπει να τρέξετε τη μικρότερη χρήση 2% τεμαχίων "Nusieve" + 1% "χαμηλά λειώνουν".
3. Αφότου έχουν χωρίσει οι ζώνες, απεικονίστε τη ζώνη σε ένα UV κιβώτιο (ελαχιστοποιήστε την έκθεση του DNA στο UV)
4. Κόψτε τη ζώνη έξω (μην γρατσουνίστε το UV φίλτρο στο ελαφρύ κιβώτιο!).
5. Προσθέστε το ul 100 T.E. του προσωρινού χώρου (10mM τρης- HCl pH EDTA 7,6, 1mM) στη ζώνη, συντριβή, θερμότητα σε 65oC για περ. 5 λ., προσθέστε 200l της φαινόλης, δίνη, θερμότητα 65°C για 3 λεπτά, δίνη.
6. Το Microfuge 5 mins, αφαιρεί supernant
7. Προσθέστε 100 λ T.E. στη φαινόλη, δίνη, θερμότητα 65°C 3 ελάχιστη δίνη
8. Microfuge, λίμνη supernants.
9. Εκχύλισμα χλωροφορμίου (ul περ. 400), microfuge 3 λ..
10. Ίζημα EtOH, που προσθέτει 1/10 ένταση 3M Na0Ac, 2,5 τόμους EtOH.
11. -20°C 1- 1-2+ η περιστροφή 30 λεπτά, ξεραίνει κάτω, φέρνει επάνω στην κατάλληλη ένταση T.E. 0.1X

Ακρες για τον καθαρισμό πηκτωμάτων αγαρόζης DNA

• Θέστε το δια-φωτιστικό στο μακροχρόνιο UV μήκος κύματος (ή το χαμηλής ισχύος). Αυτό είναι ένας μεγάλος τρόπος να ελαχιστοποιηθεί το χρονικό διάστημα και η ενέργεια της UV έκθεσης DNA. Αυτό θα ελαχιστοποιήσει την UV μεταλλαξιγένεση του DNA.
• Περιποίηση μακριά όσο το δυνατόν περισσότερο του αγαρόζης από τη ζώνη χωρίς αφαίρεση του DNA. Αυτό βοηθά στην ελαχιστοποίηση της μόλυνσης αγαρόζης που θα ενισχύσει τον καθαρισμό DNA.
• Εάν παίρνετε τα προβλήματα χρησιμοποιούν τις εμπορικές εξαρτήσεις όπως οι περιστροφή-στήλες Υπάρχουν μερικές άριστες εξαρτήσεις για την εξαγωγή του DNA εάν μπορείτε να τις αντέξετε οικονομικά. Αυτοί περιλαμβάνουν τις εξαρτήσεις από Qiagen, το σίγμα, και άλλες επιχειρήσεις.

Σχετικά άρθρα για τον καθαρισμό DNA