Ροή Cytometry

Στη ροή cytometry, θα βρείτε τις βασικές πληροφορίες και τα άρθρα σχετικά με τη cytometry μέθοδο ροής, τα λεπτομερή πρωτόκολλα, τα bioinformatic εργαλεία ανάλυσης και ένα cytometry φόρουμ ροής για όλες τις συζητήσεις της βιολογίας κυττάρων σας τις ερευνητικές ερωτήσεις και.

Υπόβαθρο Cytometry ροής

Η ροή cytometry (επίσης αποκαλούμενος FCM) είναι μια μοριακή μέθοδος της βιολογίας που χρησιμοποιείται συνήθως για να μετρήσει, να εξετάσει γρήγορα, να αναλύσουν και να ταξινομήσει τα κύτταρα ή ακόμα και τα μικροσκοπικά μόρια που αναστέλλονται στο ρευστό. Τα cytometers ροής επιτρέπουν μια ταυτόχρονη multiparametric ανάλυση των φυσικών ή/και χημικών χαρακτηριστικών των μονών κυττάρων ή των μορίων που ρέουν μετά από μια οπτική ή/και ηλεκτρονική συσκευή ανίχνευσης, σε ένα ρευστό ρεύμα χρησιμοποιώντας μια ακτίνα του φωτός λέιζερ.

Ο όρος cytometry προέρχεται από τις ελληνικές λέξεις για τη μέτρηση (metry), και το κύτταρο (cyto) που δίνει "στη ροή cytometry" τη μέτρηση των μονών κυττάρων καθώς ρέουν μετά από έναν ανιχνευτή.

Η ροή ή η ταξινόμηση κυττάρων είναι μια περαιτέρω λειτουργική ικανότητα της ροής cytometry που επιτρέπει στο χωρισμό των τύπων κυττάρων μέσω της χρήσης των ηλεκτρικών ή μηχανικών δυνάμεων για να συλλέξει τους πληθυσμούς των κυττάρων με ένα ή περισσότερα φυσικό ή χημικό χαρακτηριστικό που τίθεται από το χρήστη.

Εφαρμογές Cytometry ροής

Η ροή cytometry χρησιμοποιείται συνήθως στην ανάλυση του κύκλου κυττάρων, την ανίχνευση και την ανάλυση του apoptosis ή της νέκρωσης, την ταξινόμηση κυττάρων, την ανίχνευση αντιγόνων επιφάνειας κυττάρων για την ανοσολογία, και την ανάλυση κυττάρων μίσχων.

Μετρήσεις Cytometry ροής

Η ροή Cytomers μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να μετρήσει τις ακόλουθες παραμέτρους, ανάλογα με τη μηχανή, fluorophore και άλλη:

• ένταση του ήχου των κυττάρων
• μορφολογικά χαρακτηριστικά των κυττάρων
• αντιγόνα επιφάνειας κυττάρων (τομέας των δεικτών διαφοροποίησης (CD))
• ανίχνευση των χρωστικών ουσιών κυττάρων (δηλ. χλωροφύλλη ή phycoerythrin)
• apoptosis (προσδιορισμός της ποσότητας, μέτρηση της υποβάθμισης DNA, μιτοχονδριακή δυνατότητα μεμβρανών, αλλαγές διαπερατότητας, δραστηριότητα caspase)
• δοκιμές βιωσιμότητας κυττάρων
• αξιολογήστε το DNA (π.χ. στην ανάλυση κύκλων κυττάρων, τις κινητικές κυττάρων, τον πολλαπλασιασμό)
• αξιολογήστε το RNA
• χρωμοσωμική ανάλυση και ταξινόμηση (για την κατασκευή ή το χρωμόσωμα βιβλιοθηκών DNA που χρωματίζει)
• αξιολογήστε για την πρωτεϊνικούς έκφραση και τον εντοπισμό
• διαγενετικά προϊόντα in vivo, ιδιαίτερα οι πράσινες φθορισμού πρωτεϊνικές ή σχετικές φθορισμού πρωτεϊ'νες
• ενζυματική δραστηριότητα
• και πολλές άλλες παράμετροι

Πώς εργασία Cytometers ροής;

Μια ακτίνα του φωτός (συνήθως φως λέιζερ) ενός ενιαίου μήκους κύματος κατευθύνεται επάνω σε ένα hydro-dynamically ρεύμα του ρευστού. Διάφορους ανιχνευτές στοχεύουν στο σημείο όπου το ρεύμα περνά μέσω της ελαφριάς ακτίνας ένας σύμφωνα με την ελαφριά ακτίνα (μπροστινή διασπορά ή FSC) και διάφορη κάθετος σε το (πλευρική διάχυση (SSC) και ένας ή περισσότεροι φθορισμού ανιχνευτές). Κάθε ανασταλμένο μόριο που περνά μέσω της ακτίνας διασκορπίζει το φως με κάποιο τρόπο, και οι φθορισμού χημικές ουσίες που βρίσκονται στο μόριο ή που συνδέονται με το μόριο μπορούν να διεγερθούν στην εκπομπή του φωτός σε μια χαμηλότερη συχνότητα από την πηγή φωτός. Αυτός ο συνδυασμός διεσπαρμένου και φθορισμού φωτός παίρνεται από τους ανιχνευτές, και με την ανάλυση των διακυμάνσεων στη φωτεινότητα σε κάθε ανιχνευτή (ένας για κάθε φθορισμού αιχμή εκπομπής) είναι έπειτα δυνατό να παρεκτειθούν οι διάφοροι τύποι πληροφοριών για τη φυσική και χημική δομή κάθε μεμονωμένου μορίου. Το FSC συσχετίζει με την ένταση του ήχου κυττάρων και SSC εξαρτάται από την εσωτερική πολυπλοκότητα του μορίου (δηλ. μορφή του πυρήνα, του ποσού και του τύπου κυτταροπλασματικών κόκκων ή της τραχύτητας μεμβρανών). Μερικά cytometers ροής στην αγορά έχουν εξαλείψει την ανάγκη για την ελαφριά διασπορά φθορισμού και χρήσης μόνο για τη μέτρηση. Αλλα cytometers ροής διαμορφώνουν τις εικόνες του φθορισμού κάθε κυττάρου, του διεσπαρμένου φωτός, και του διαβιβασθέντος φωτός.