Äthidiumbromid (auch abgekürztes EtBr) ist ein einschiebendes Mittel der Nukleinsäure, das als Nukleinsäurefleck in der Molekularbiologieforschung für Protokolle einschließlich Agarosegelelektrophorese häufig benutzt ist.
Wenn es UV (UV-Licht) herausgestellt wird, fluoresziert Äthidiumbromid mit einer rot-orange Farbe und verstärkt Falte fast 20, nachdem es zu DNA gebunden hat. Äthidiumbromid ist auch ein sehr starkes Mutagen und kann ein Karzinogen oder ein Teratogen vielleicht sein.
Anwendungen des Äthidiumbromids im Labor
Im Falle DNA, die dieses normalerweise double-stranded DNA von PCRs, Beschränkung ist, verdaut, kann etc.-Single-stranded RNS auch entdeckt werden, da sie normalerweise sich zurück auf sich faltet und folglich die lokale Unterseite zur Verfügung stellt, die damit die Färbung zusammenpaßt, einschiebt.
Abfragung bezieht gewöhnlich ein Gel mit ein, welches die Nukleinsäuren enthält, die auf oder unter eine UVlampe platziert werden. Da UV-Licht zu den Augen und zur Haut schädlich ist, wird eine Kamera für AufnahmeÄthidiumbromidfluoreszenz benutzt. In anderen Fällen wird ein schützender Bildschirm zwischen den Beobachter und die UVquelle gesetzt. Im cytogenetischen Labor sind die einschiebenden Eigenschaften lang verwendet worden, um chromosomale Kondensation herabzusetzen, als eine Kultur mitotic fesselnden Agenzien während der Ernte aussetzte. Die resultierenden Plättchenvorbereitungen ermöglichen einen höheren Grad an Auflösung und folglich Vertrauen, wenn sie strukturelle Vollständigkeit der Chromosomen nach mikroskopischer Analyse feststellen.
Alternativen zum Äthidiumbromid
Es gibt Alternativen zum Äthidiumbromid im Labor. Einige SYBR oder oder SYBR sichere Flecke werden durch einiges als sicherere Alternative verwendet. SYBR Färbungen sind, um als EtBr weniger Krebs erzeugend zu sein gefunden worden und Reinigungsmittel, höher angeschaltenes Beflecken zu geben. Jedoch werden sie in DMSO verschoben, das durch Haut schnell überschreiten kann. Jedoch bevorzugen viele Forscher noch Äthidiumbromid für schwierige Abfragungen. Beachten Sie, dass Sigma-Aldrich eine ähnliche Nachweisgrenze für den SYBR Fleck behauptet.
Sicherheitsanweisungen, wenn Äthidiumbromid verwendet wird
Streuungen oder persönliche Berührung
Wie mit irgendeiner Chemikalie, wenn Sie auf Haut oder Augen, Spülen für 15 Minuten unter Verwendung einer Sicherheitsdusche oder Eyewash verschüttet geworden werden. Wenn Sie inhaliert werden oder geschluckt werden, ärztliche Behandlung sofort suchen Sie.
Für Streuungen benutzen Sie ein Streuungkissen oder -absorptionsmittel, um wässriges Äthidiumbromid oben zu tränken. Räumen Sie sorgfältig festes Äthidiumbromid auf, um zu erstellen zu vermeiden abwischt. Legen Sie in einen versiegelbaren Behälter und schaffen Sie in einem medizinischen überschüssigen Kasten ab.
Säubern Sie die Streuung sorgfältig mit Äthanol, und dann muss die Lösung mit aktivierter Holzkohle behandelt werden.
Alle Lösungen, die Äthidiumbromid enthalten, müssen geentseucht werden, bevor man verworfen wird.
Zu mit aktivierter Holzkohle säubern:
1. Fügen Sie 100 mg aktivierte Holzkohleml-Färbungslösung hinzu.
2. Lassen Sie Standplatz mindestens 1 Stunde mit gelegentlichem Stirring.
3. Filtern Sie durch Whatman No.1 Filterpapier.
4. Gießen Sie das freie Filtrat in die Wanne.
5. Platzieren Sie das Filterpapier, welches die Färbungs-/Holzkohlemischung in den biohazard Abfall enthält.
Müllentsorgung des Äthidiumbromids
Äthidiumbromid sollte als Sondermüll gehandhabt werden und entledigt werden. Dieses trifft auf Handschuhe, Reagenzgläser, Papiertücher, etc. zu, die grob mit Äthidiumbromid außerdem verschmutzt werden. Allem Äthidiumbromidabfall sollte gelten als Zustand geregelten Sondermüll.
Sicheres Handhaben des Äthidiumbromids
Vorbereitung der auf lagerlösungen und aller möglichen der Operationen, die zum Generierung des Äthidiumbromidstaubes oder -aerosole fähig sind, sollte in eine Dampfhaube geleitet werden, um Einatmung zu verhindern. Handschuhe sollten ständig getragen werden. Latexhandschuhangebot wenig Schutz vor Äthidiumbromid †„die Handschuhe, die vom Nitrilgummi gebildet werden, sind viel wirkungsvoller. Beim Arbeiten mit hohen Konzentrationen (Aktien oder Puder) oder während eines verlängerten Zeitabschnitts, kann das doppelte Mit Handschuhen bekleiden das Risiko der Berührung weiter verringern, besonders wenn der äußere Handschuh ersetzt wird, wann immer erheblich verschmutzt.
Äthidiumbromid (10 mg/ml) Rezept
Lösen Sie 0.2 Gramm des Äthidiumbromids in 20 ml H2O auf
Mischen Sie und speichern Sie an 4°C, das in der Aluminiumfolie eingewickelt wird (dunkel).
ANMERKUNG: Vorsicht - Äthidiumbromid ist ein Mutagen und muss sehr sorgfältig gehandhabt werden.
