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Empfängerhandeln des Histamins H2: Rolle von arrestin, von dynamin und von clathrin in... stand Artikel in Verbindung

Empfängerhandeln des Histamins H2: Rolle von arrestin, von dynamin und von clathrin im H2r internalization.

Mol Pharmacol. Jul 2008 10;

Autoren: Fernandez Nc, Monczor F, Baldi A, Davio Ca, Shayo C

Agonist-verursachtes internalization von GPCRs ist im Empfänger Desensitization, dem resensitization und dem downregulation impliziert worden. In der vorliegenden Untersuchung suchten wir, herzustellen, ob das H2r Agonist amthamine, außer der Förderung von von Empfänger Desensitization, H2r internalization verursacht. Wir studierten weiter die Einheiten, die in sowie seine mögliche Rolle im Empfänger resensitization mit einbezogen wurden. In COS7 transfected Zellen amthamine das verursachte H2r zeitabhängige internalization und zeigte ein 70% vom Empfänger endocytosis, das einer 60 Minuten Aussetzung zum amthamine folgt. Agonistabbau führte zu den schnellen Wiederanlauf von resensitized Empfänger zur Zelle Oberfläche. Ähnliche Resultate wurden in Anwesenheit des Cycloheximids, ein Hemmnis der Proteinsynthese erreicht. Behandlung mit okadaic Säure, ein Hemmnis der PP2A Familie der Phosphatasen, verringerte den Wiederanlauf der H2r Membrane Sites und DER Ampere Antwort. Arrestin 3, aber nicht arrestin 2 overexpresion verringerte H2r Membrane Sites und H2r-evoked Ampere Antwort. Empfänger cotransfection mit dominierenden negativen Durch Mutation entstehende Variationen für arrestin, dynamin, Eps15 (Bestandteil der clathrin-vermittelten endocytosis Maschinerie) oder RNAi gegen arrestin 3 schuf H2r internalization und resensitization ab. Ähnliche Resultate wurden in den Zellen U937 erreicht, die endogen H2r. Present ausdrücken, das, Entdeckungen, daß amthamine-verursachtes H2r internalization für H2r resensitization entscheidend ist, Prozeßunabhängiges H2r de Novo der Synthese aber Abhängiger auf PP2A-mediated Dephosphorylierung vorschlagen. Obgleich wir unmittelbaren Beweis nicht für H2r Interaktion mit betaarrestin, dynamin und/oder clathrin versehen, unterstützen unsere Resultate ihre Miteinbeziehung im H2r endocytosis. Der schnelle Empfänger, der zur Zelle Oberfläche aufbereiten und die spezifische Miteinbeziehung von arrestin 3 im Empfänger internalization schlagen weiter vor, daß das H2r Kategorie A GPCRs gehört.

PMID: 18617631 [ PubMed - wie vom Verleger angegeben ]


Ein systematischer RNAi Bildschirm deckt Miteinbeziehung der Endocytic Bahn in neuronalem... in Verbindung stand Artikel auf

Ein systematischer RNAi Bildschirm deckt Miteinbeziehung der Endocytic Bahn in der neuronalen Funktionsstörung innen auf {alpha}-Synuclein Transgenic C. elegans.

Summen Mol Genet. Jul 2008 9;

Autoren: Kuwahara T, Koyama A, Koyama S, Yoshina S, Ren Ch, Kato T, Mitani S, Iwatsubo T

Veränderungen oder Vermehrungen Alpha-synuclein Genursache in den familial Formen der Parkinson Krankheit oder des Dementia mit Lewy Körpern und die Absetzung des Wildtypen Alpha-synuclein als Lewy Körper tritt als Stempelverletzung dieser Störungen auf, zusammen gekennzeichnet als die synucleinopathies und impliziert Alpha-synuclein in der Pathogenese von synucleinopathy. Um Modifizierfaktorgene des Alpha-synuclein-verursachten neurotoxicity zu kennzeichnen, leiteten wir einen RNAi Bildschirm in den transgenic C. elegans (Tg Endlosschrauben) dieses overexpress menschliche Alpha-synuclein in einer Wanne-neuronalen Weise. Um den RNAi Effekt in den Neuronen zu erhöhen, kreuzten wir Alpha-synuclein Tg Endlosschrauben mit einer RNAi-erhöhten Durch Mutation entstehende Variation eri-1 Belastung. Wir prüften RNAi von 1673 Genen, die auf nervösem System oder synaptischen Funktionen in Verbindung gestanden wurden und kennzeichneten 10 Gene, die, nach Knockdown, strenge growth/motor Abweichungen selektiv in den Alpha-synuclein Tg Endlosschrauben verursachten. Unter diesen waren vier Gene (d.h., apa-2, aps-2, eps-8 und rab-7) in Verbindung gestanden auf der endocytic Bahn, einschließlich zwei Untereinheiten des Komplexes AP-2. Gleichbleibend mit den Resultaten durch RNAi, ergaben kreuzenalpha-synuclein Tg Endlosschrauben mit einer Durch Mutation entstehende Variation aps-2 strenges Wachstumanhalten und Endlosschrauben des Motor dysfunction.?alpha-Synuclein Tg zeigten eine verringerte Note Empfindlichkeit nach RNAi der Gene an, die in synaptisches Vesicle endocytosis mit einbezogen wurden, und sie zeigten auch die gehinderte neuromuscular Übertragung und vorschlugen, daß overexpression des Alphas-synuclein einen Ausfall im Heben oder die Wiederverwertung der synaptischen Vesicles verursachte. Ausserdem verursachte Knockdown von apa-2, eine Untereinheit AP-2, eine Aufspeicherung des phosphorylierten Alphas-synuclein in den neuronalen Zelle Körpern, das Nachahmen synucleinopathy. Zusammen werfen diese Entdeckungen ein pathogenes Link des Romans zwischen endocytic Bahn und Alpha-synuclein-verursachtes neurotoxicity in synucleinopathy auf.

PMID: 18617532 [ PubMed - wie vom Verleger angegeben ]


Die Oligonucleotidereihenfolgen, die kurze Selbst-höfliche Haarnadeln bilden, machen exped... in Verbindung standen Artikel ein

Die Oligonucleotidereihenfolgen, die kurze Selbst-höfliche Haarnadeln bilden, können die Untenregelung Coprinopsis der cinerea Gene beschleunigen.

J Microbiol Methoden. Jun 2008 17;

Autoren: Costa Morgens, Tausendstel Fotorezeptor, Bailey A, Pflege-GD, Challen Wartungstafel

Das Gen, das in den Pilzen zum Schweigen bringt, wird häufig durch die dsRNA Haarnadel verursacht, die Konstruieren bildet, dessen Vorbereitung mehrfaches Klonen benötigen kann tritt. Um das Gen zu vereinfachen, das in den faserigen Pilzen haben wir zum Schweigen bringt eine hohe Durchsatzklonenmethode für Zielreihenfolgen mit dem homobasidiomycete cinerea Coprinopsis, dem GFP Reporter und einem im Handel erhältlichen vektorsystem ausgewertet. Die pSUPER RNAi Systemtrade Markierung, die für Säugetier- Experimente entwickelt wurde, nutzt die menschliche H1 Polymerase III aus (Pol beschleunigt Iii) RNS-Genförderer und cloning/expression der spezifischen benutzerbestimmten Oligonucleotidereihenfolgen, um kurze Selbst-höfliche Haarnadeln zu bilden. Die Transformation von C. cinerea mit pSUPER konstruiert das Beherbergen des spezifischen aktivierten Wiederanlaufs der Oligonucleotides (19 NT Stammlänge) von transformants mit verringerten Abschriften des GFP transgene, und war in den Proteinproben und in den mikroskopischen Phänotypen weniger Leuchtstoff. Dieser technologische Fortschritt sollte genomic funktionellstudien in cinerea C. beschleunigen und hat breiteres Potential für Hilfsprogramm in anderem homobasidiomycete und in faserigen Pilzen.

PMID: 18616966 [ PubMed - wie vom Verleger angegeben ]


 

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