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3'-Ende-DNA Verstärkung Mit Klassischem RENNEN
Protokoll -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/14/pdb.prot4130 Kategorie: PCR Protokolle: DNA Synthese-Protokolle "3'-Enden, die" festlegen teilweise DNA klont, mRNA, wird Rück-übertragen mit einer "hybriden" Zündkapsel (Qtotal, Quart) die aus zwei gemischten Unterseiten besteht (GATC/GAC folgte vorbei [ T]17) und eine eindeutige Reihenfolge des Oligonucleotide 35-base (QI-QO). Verstärkung wird dann mit einem besser gekleideteren enthaltenen Teil dieser Reihenfolge (Qouter, Qo) durchgeführt (die jetzt an jede DNA an seinen 3'-Enden bindet) und eine Zündkapsel berechnet vom Gen des Interesses, GSP1 (Gen-spezifische Zündkapsel 1). - [Gelesene 3'-Ende-DNA Verstärkung Mit Klassischem RENNEN Protokoll] |
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5'-Ende-DNA Verstärkung Mit Klassischem RENNEN
Protokoll -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/14/pdb.prot4131 Kategorie: PCR Protokolle: DNA Synthese-Protokolle "5'-Ende" teilweise DNA festzulegen klont mit klassischem RENNEN, die Erstfaser Produkte werden festgelegt durch Rückübertragung (besser gekleidetere Extension) von einer bekannten Gen-spezifischen Zündkapsel (GSP-RT). Dann wird ein poly(A) Endstück mit Terminaldeoxynucleotidyltransferase (Tdt) und dATP hinzugefügt. Verstärkung wird mit drei Zündkapseln durchgeführt. - [Gelesene 5'-Ende-DNA Verstärkung Mit Klassischem RENNEN Protokoll] |
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5'-Ende-DNA Verstärkung Mit Neuem RENNEN Protokoll -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/14/pdb.prot4132 Kategorie: PCR Protokolle: DNA Synthese-Protokolle Neues RENNEN, eine Variante von RNS ligase-mediated-RACE (RLM-RACE) (Liu und Gorovsky 1993) reist vom klassischen RENNEN (sehen Sie 5'-Ende-DNA Verstärkung mit klassischem RENNEN), dadurch ab, daß eine "Anker" Zündkapsel zu den 5'-Enden des mRNA vor dem Rückübertragungjobstep angebracht wird; folglich wird die Ankerreihenfolge in die Erstfaser DNA wenn verbunden und nur wenn, die Rückübertragung durch die gesamte Länge des mRNA des Interesses fortfährt. - [Gelesene 5'-Ende-DNA Verstärkung Mit Neuem RENNEN Protokoll] |
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Beschäftigen Übertrag-Verschmutzung in PCR:
Ein Enzymatisches Strategie Protokoll -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/1/pdb.prot4092 Kategorie: PCR Protokolle Protokoll für das Beschäftigen Übertragverschmutzung PCR- in der enzymatischen Strategie. Wiederholter Gebrauch PCR und Handhabung seiner Produktursache Aerosole, die benachbarte Proben und Arbeit Bereiche verschmutzen können. Solche "Übertragverschmutzung" kann verhindert werden, indem man dUTP anstatt des dTTP für alle Verstärkung Reaktionen einschließt. - [gelesenes Beschäftigen Übertrag-Verschmutzung in PCR: Ein Enzymatisches Strategie Protokoll] |
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DNA Electroelution -
http://rothlab.ucdavis.edu/protocols/dna-electroelution.html Kategorie: DNA Protokolle: DNA Extraktion-Protokolle: DNA Extraktion-Polyacrylamid-Gele DNA Electroelution. Dieses Protokoll beschreibt die Reinigung von DNA, indem es in einem Hochsalz Kissen in einem "UEA AnalyticalElectroeluter" einschließt (IBI). Diese Maschine wird nicht mehr, zu unserem Wissen hergestellt. Jedoch kann eine smiliar Einheit von Plexiglas entsprechend dem folgenden Diagramm, genommen worden von Cornel Mulhardt, molekularer Biologie und Genomics (2007) akademischer Presse, p.52 leicht gebildet werden: Schimenti Labor - [Gelesene DNA Electroelution] |
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Lokalisierung der DNA Fragmente von den
Polyacrylamid-Gelen durch die Zerstampfung und tränken Methode
Protokoll -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot2936 Die "Zerstampfung und tränken" Methode, die gut für DNAs < 1 KB in der Größe funktioniert, kann verwendet werden, beides singleand double-stranded DNAs von Polyacrylamidgelen zu erholen. Das Ergebnis eluierter DNA schwankt von < 30% bis > 90% abhängig von der Größe des DNA Fragments. - [gelesene Lokalisierung der DNA Fragmente von den Polyacrylamid-Gelen durch die Zerstampfung und tränken Methode Protokoll] |
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Protein-bindene Sites auf DNA durch Dnase I
Footprinting abbildend, führen Sie -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3947
Protokoll Kategorie: DNA Protein-Interaktionen Protokolle: DNAse Footprinting Probe Protokolle DNAse I wird benutzt, um eine radioaktive Ziel DNA im Vorhandensein und in Ermangelung eines Kernextraktes zu zersplittern. Ein "Abdruck" wird festgelegt, wenn ein Protein an das Ziel bindet und ein spezifisches Segment von DNA vor der nucleolytic Aktivität von DNAse I schützt. Indem sie die elektrophoretische Mobilität der Spaltungprodukte der DNAse I mit denen der Reihenfolge verglich, berechnete eine Strichleiter vom gleichen DNA Fragment, das position(s) der DNA Reihenfolgen, die durch DNA-BINDENE Proteine erkannt wurden, kann festgestellt werden. - [gelesen, Protein-bindene Sites auf DNA durch Dnase I Footprinting Protokoll abbildend] |
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Site-Spezifische Foto-Kreuz-Bindung Protein-DNA:
Analyse der strukturellen Organisation von Protein-DNA -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/abstract/2006/29/pdb.prot4588 Kategorie: DNA Protein-Interaktionen Protokolle Der Komplex MultiproteincDna des Interesses wird mit dem Site-spezifisch derivatisierten DNA Fragment gebildet. Der Komplex wird dann UV-BESTRAHLT und initialisiert kovalente Vernetzung mit Proteinen in der direkten körperlichen Nähe zum Vernetzung Mittel. Umfangreiche Nukleaseverdauung wird durchgeführt, um unvernetzte DNA und Bekehrter querverbundene DNA zu einem querverbundenen, radioaktiven Nukleotid "Marke zu beseitigen." - [Gelesene Site-Spezifische Foto-Kreuz-Bindung Protein-DNA: Analyse der strukturellen Organisation von Protein-DNA] |
Lambda Bakteriophagenprotokoll Große DNA VorbereitungLambda Bakteriophagenprotokoll Große DNA Vorbereitung |
Tubulin Polymerisierung-Protokoll mit GTP und GMPCPPTubulin wird in microtubules durch Ausbrüten tubulin an 37°C mit GTP polymerisiert. Ein Kernbildungstartwert für Zufallsgenerator wird hinzugefügt, wenn der Zweck ist, microtubule Verlängerung zu prüfen. Tubulin kann zu den Zwecken der Wiederverwertung des tubulin oder des Beschriftens der microtubules mit fluorescently beschriftetem tubulin auch polymerisiert werden. Gegründet auf dem Protokoll durch Timothy Mitchison der Universität Harvard. |
Prüfen Sie Vorbereitung für 22 x 40 Millimeter DNA MicroarraysPrüfen Sie Vorbereitung für 22 x 40 Millimeter DNA Microarrays Protokoll. |
Saure Guanidinium Schwefelcyanat RNS Lokalisierung Phenol-Chloroform-ExtraktionEin Einzelschritt-RNS-Lokalisierung Protokoll mit Phenol-Chloroform-Extraktion und saurem Guanidinium Schwefelcyanat. Diese RNS-Lokalisierung Methode verwendet die Tatsache, daß guanidinium Schwefelcyanat die Zellen gleichzeitig auflösen kann und unaktiviertes zellulares RNAses während des Ausgangs-RNS-Lokalisierung Jobsteps einen Einzelschritt in der Methode erlauben. |
Übersetztes Xenopus MOS Kinase-Probe In-vitroprotokollÜbersetztes Xenopus MOS Kinase-Probe In-vitroprotokoll. In Erwiderung auf Progesteron reifen unreife Xenopus oocytes zu den Eiern, die befruchtet werden können. Die MOS Proteinkinase ist für oocyte Entwicklung wesentlich, am wahrscheinlichsten wegen seiner Fähigkeit, die KARTE Kinasekaskade zu aktivieren. Diese KARTE Kinasekaskade führt schließlich zu die Aktivierung von Cdc2/cyclin B und Eintrag in M Phase. In diesem Protokoll wird etikettierte MOS Kinase in vitro übersetzt, immunopurified, und verwendet in einer Kinaseprobe. |
Koppelung Cysteine, der Peptide zum Fördermaschine-Protein für Immunisierung und Polyclonal Antikörper enthältDieses Protokoll wird in der Produktion der polyclonal Antikörper verwendet, die eine Peptidreihenfolge des Interesses erkennen. |
DNA Verbindung-ProtokollDas DNA Verbindungprotokoll, das hier beschrieben wird, enthält die Jobsteps, die benötigt werden, um zu verbinden zusammen sind mit Ligaseenzym Plasmid DNA und Einsatz DNA den Fragmenten, um ein neues Plasmid herzustellen. Dieses neue verbundene Plasmid kann nachher in kompetentes Bakterium umgewandelt werden, um DNA für Mini-, Midi oder Lokalisierung Maxivorbereitung zu produzieren. |
beendet schnelle Verstärkung 3' von DNA RENNEN mit PCR Protokollbeendet schnelle Verstärkung 3' von DNA RENNEN mit PCR Protokoll. Dieses Protokoll enthält die Jobsteps für Ende 3' schnelle Verstärkung von mRNA durch PCR. Die Erstfaser DNA wird von der Gesamtmenge oder poly(A+) von der RNS synthetisiert, indem man vom Poly-Ein Endstück des mRNA mit einer oligo (Papier.lösekorotron) Adapterzündkapsel vorbereitet. Die DNA wird dann über PCR mit einer Gen-spezifischen Zündkapsel und einer Adapterzündkapsel verstärkt. |
Electrotransformation von BMH 81-17mut S für das Lokalisieren der Site-Verwiesenen dsDNA Durch Mutation entstehende VariationenDieses Protokoll beschreibt das electroporation der BMH 81-17 mut S Belastung, die für tranformation der Sites verwies Mutagenese von dsDNA empfohlen wird (sehen Sie Protokoll auf Site-Verwiesener Mutagenese auf doppelter angeschwemmter DNA). BMH 81-17 mut S sind eine defekte Nichtübereinstimmung Reparatur (mut S) Escherichia Coli Belastung. Die Wahrscheinlichkeit, der die zwei Veränderungen cosegregate während des ersten Umlaufes der DNA Reproduktion willen, wird dieser Belastung erhöht. |
Vector Design-Protokoll für Transgenic MäuseerzeugungDas Protokoll gibt allgemeine Erwägungen für das Design des Zielens der Vektoren für transgenic Mäuse. Das Protokoll teilt Spitzen im Design von Knock-out und klopfen- in den Vektoren und in einigen ihrer Strategien für das Produzieren der homologously wiederverbundenen embryonalen Stammzellen. |
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