bereiten Sie Protokolle vor

Kategorie: Primärzellen-Lokalisierungs-und Kultur-Protokolle: Laser-Sicherung Microdissection Protokolle

Protokoll für 2-D Polyacrylamidgelelektrophorese. Schließt ein: 50 Zerstörung-Buffer ml-IEF; laufender Buffer der Elektrophorese-10X (10 L); 30% Acrylamid-Vorrat (1 Liter); Trennen des Acrylamid-Gels; 50 ml-Gleichgewichtherstellung-Buffer I; 50 ml-Gleichgewichtherstellung-Buffer II; Übergangsbuffer; Beispielvorbereitung; Gewebe-Verarbeitung; Reswelling; Bereiten Sie Steigung-Acrylamid-Gel vor (9-18%); Übertragung und Sequenziell ordnen der Proteine. - [Gelesenes 2-D Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese-Protokoll]

Kategorie: Hefe-Protokolle: Hefe-Nukleinsäure-Protokolle: Hefe PCR-Protokolle

Protokoll für PCR Hefe Bestätigung mit 96 Vertiefungen. Schließt ein: Klonische Reinigung; Legen Sie eine Vorlagenplatte fest (Format 96-well); Herstellung eines gefrorenen backupvorrates; Bestätigung PCR für eine Reihe; Orf-spezifischer Bestätigung PCR --> „A-B“ Zündkapseln (aufwärts gerichtete Verzweigung); Übergangsschablone DNA zur Multiwell PCR-Platte; Bereiten Sie vor und führen Sie Vorlagenmischung für A-BPCR zu. - [Gelesenes Hefe PCR-Protokoll der Bestätigungs-96-Well]

Kategorie: Nukleinsäure-Reinigung-Protokolle

Protokoll für eine einschrittige Methode für die simultane Vorbereitung von DNA, von RNS und von Protein von den Zellen und von den Geweben. Der Ertrag von Gesamt-RNS hängt von der Gewebe- oder Zellenquelle ab, aber er ist im Allgemeinen in der Strecke 4-7 µg/mg, das Gewebe oder 5-10 Zellen µg/106 beginnt.  WICHTIG: Bereiten Sie alle Reagenzien vor, die in diesem Protokoll mit Diäthyl- Pyrokarbonat (DEPC) benutzt werden - behandeltes H2O. - [Gelesen einer einschrittigen Methode für die simultane Vorbereitung von DNA, von RNS und von Protein von den Zellen und vom Gewebe]

Kategorie: BACs bakterielle künstliche Chromosom-Protokolle

Protokoll benutzt den BIOPRIME Reaktionsinstallationssatz von GibcoBRL, um Biotin-beschriftete BAC-DNA vorzubereiten, die unter Verwendung des FITC-Avidins entdeckt wird (vektorlabors, DCS-Grad). Reagenzien von anderen Herstellern können gleichmäßig wohles bearbeiten aber nicht geprüft worden sein. Schließt ein: Kennzeichnung der BAC-Klone; Äthanolniederschlag; Hybridation; Pfosten-Hybridation Behandlung/Abfragung. - [Gelesenes BAC-FISH Protokoll]

Kategorie: Gen-Anlieferungs-Protokolle: Protokolle DNA-Nanoparticles

Dieses Protokoll beschreibt eine schrittweise Prozedur, um die Nukleinsäuren vorzubereiten, die in einem Polyäthylenglykol (STÖPSEL) eingekapselt werden - abgeschirmtes nanolipoparticle (NLP) die ein bioresponsive Lipid und einen Ligand enthalten. Dieser Prozess stellt einige Vorteile für Körpergenanlieferung zur Verfügung. Die in vivo Zirkulationszeit ist ausgedehnt. Auch niedrige pH-empfindliche Lipide erhöhen das DNA-Entpacken und endosomal Entweichen. Schließlich können die Ligands, die in die NLP-Oberfläche eingesetzt werden, Genanlieferung zu den spezifischen Geweben oder zu den Zellen in vivo zielen. - [Gelesene Bioresponsive gerichtete Ladung-NulllipidVesicles für Körpergen-Anlieferungs-Protokoll]

Kategorie: Protein-Protokolle: Westliches Fleck-Protokoll

Wie man Zelle lysates für das westliche Beflecken vorbereitet. - [Gelesene Zelle Lysates für das westliche Beflecken]

Kategorie: DNA-Protokolle: Chromatin-Immunopräzipitation-Protokolle

Bereiten Sie Chromatin, Immunoprecipitate, Wäsche vor, eluieren Sie, IP-Prozedur. Im Hinterland. - [Gelesenes Chip SPITZT pdf]

Kategorie: DNA-Protokolle: cDNA Bibliotheks-Protokolle: cDNA Bibliotheks-Aufbau-Protokolle

Protokoll für Klonengene von einer Bakteriophagenbibliothek. Schließt ein: Titer und der Platte Bakterium heraus; Heben Sie Plaketten auf Filter an und bereiten Sie sie für Siebung vor; Bilden Sie eine Prüfspitze; Hybridisieren Sie die Prüfspitze zu den Filtern; Waschen Sie die Filter und das Exposee, um zu filmen; Reinigen Sie mutmaßliche Plaketten; Besteuern Sie Plasmid vom gewünschten Bakterium. - [Gelesene Klon-Gene von einem Bakteriophagenbibliotheks-Protokoll]

Kategorie: DNA-Protokolle: Genomic DNA-Bibliotheks-Protokolle

Protokoll für den Aufbau einer genomic Bibliothek der Hefe. Schließt ein: Bereiten Sie die genomic DNA vor; Bereiten Sie den Bibliotheks-Vektor vor; Verbinden Sie die verdaute Genomic DNA zur verdauten Vektor-DNA; Bereiten Sie Bibliothek DNA vom Bakterium vor. - [Gelesener Aufbau eines Hefe Genomic Bibliotheks-Protokolls]

Kategorie: Nukleinsäure-Elektrophorese-Protokolle: RNS Elektrophorese-Protokolle

Protokoll für die Denaturierung von Agarosegelelektrophorese von RNS. Schließt ein:  Bereiten Sie das Gel vor; Bereiten Sie die RNS-Probe vor; Elektrophorese. - [Gelesen, Agarose-Gel-Elektrophorese des RNS Protokolls denaturierend]

Kategorie: Mikrobiologie: Bakterielle Escherichia- Colikultur-Media u. Platten

Wie man minimale Media M9 vorbereitet und in den Media M9 wächst. Chazin Labor, Vanderbilt Univ - [gelesenes Ausdruck-Protokoll in den minimalen Media M9 über Förderer T7]

Kategorie: Zellen-Biologie und Zellkultur: Fluss Cytometry Protokolle: Zelle, die Protokolle sortiert

Fragen und Antwort über das Zellensortieren. Schließt ein: Wann sollte ich die Fluoreszenz aktivierte Zelle benutzen, die über Massentrennungmethoden wie Schwenken oder magnetischen Korntrennungen sortiert? Werden meine Zellen durch den sortierenden Prozess geschädigt? Wieviele Zellen muss ich vorbereiten, um 1 x 106 einer Bevölkerung wieder herzustellen, die 10% von den Zellen enthält? Gibt es Methoden, Sortierungwiederanlauf zu verbessern? ETC… - [gelesene FAQ über das Zellen-Sortieren]

Kategorie: Hefe-Protokolle

Dieses Protokoll erlaubt Ihnen, gefrorene Hefezellen vorzubereiten, die für Transformation kompetent sind, nachdem sie aufgetaut haben. - [Gelesenes gefrorenes Hefe-Transformations-Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle

Methode beschreibt, wie man die Termini der PCR-Produkte ändert, indem sie Beschränkungssites und andere Merkmale vorstellt.  Zu die Wahrscheinlichkeit der Verschmutzung mit exogenem DNAs verringern, ein spezielles Set Reagenzien und Lösungen für nur PCR vorbereiten und benutzen.  Backen Sie alle Glaswaren 6 Stunden lang an 150°C und sterilisieren Sie alles plasticware. - [Gelesenes Gentechnikmit PCR-Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Optimierung

Methode beschreibt, wie man die Termini der PCR-Produkte ändert, indem sie Beschränkungssites und andere Merkmale vorstellt.  Zu die Wahrscheinlichkeit der Verschmutzung mit exogenem DNAs verringern, ein spezielles Set Reagenzien und Lösungen für nur PCR vorbereiten und benutzen.  Backen Sie alle Glaswaren 6 Stunden lang an 150°C und sterilisieren Sie alles plasticware. - [Gelesenes Gentechnikmit PCR-Protokoll]

Kategorie: Laborvorbildliche Organismus-Protokolle

Protokoll beschreibt das Wachstum und die Konzentration des Alge Chlorogonium elongatum als Nahrungsmittelquelle für das Züchten von Frischwasserhypotrichs. Die meisten Frischwasserhypotrichs (einschließlich Oxytricha Nova, O. fallax und O. trifallax; Euplotes aediculatus und E. eurystomous; und Stylonychia lemnae) können entwickelter High-density mit Chlorogonium als der Nahrungsmittelorganismus sein. Eine ähnliche Regierung kann verwendet werden, um andere Nahrungsmittelquellen wie Tetrahymena oder Bakterium (z.B., Aerobakteraerogene) vorzubereiten. - [Gelesenes Wachstum und Konzentration von Chlorogonium für das Züchten des FrischwasserHypotrichs Protokolls]

Kategorie: Pilz-Protokolle: Neurospora-Protokolle

Informationen und Spitzen auf, wie man Media wählt und vorbereitet. - [Gelesen, wie man Media wählt und vorbereitet]

Kategorie: Pilz-Protokolle: Neurospora-Protokolle

Informationen und Spitzen auf, wie man Acetoorcein Kürbisse, besonders für Pachytenchromosomen zubereitet. - [Gelesen, wie man Aceto-Orcein Kürbisse, besonders für Pachyten-Chromosomen zubereitet]

Kategorie: Pilz-Protokolle: Neurospora-Protokolle

Informationen und Spitzen auf, wie man Steigungplatten vorbereitet und benutzt. - [Gelesen, wie man Steigung-Platten vorbereitet und benutzt]

Kategorie: Pilz-Protokolle: Neurospora-Protokolle

Informationen und Spitzen auf, wie man Askusrosetten für mikroskopische Prüfung vorbereitet. - [Gelesen, wie man Askus-Rosetten für mikroskopische Prüfung vorbereitet]

Kategorie: Nukleinsäure-Reinigung-Protokolle: DNA-Lokalisierungs-Protokolle: DNA-Lokalisierung von den Säugetier- Zellen-Protokollen

Prozedur wird verwendet, um DNA aus vielen verschiedenen Typen Proben oder Gewebe gleichzeitig vorzubereiten.  Obgleich die DNA im Allgemeinen (Kb ca. 80) für leistungsfähigen Aufbau der genomic DNA-Bibliotheken zu klein ist, gibt sie ausgezeichnete Resultate in den südlichen Hybridationen und in PCRs.  Kultivierte aneuploid Säugetier- Zellen (2 x 107 z.B. Helazellen) erbringen 100 µg von DNA in einem Datenträger von 1 ml. - [Gelesene Lokalisierung von DNA von den Säugetier- Zellen durch spoolendes Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Standard-PCR-Protokoll

Protokoll kann verwendet werden, um DNAkb bis 25 in der Länge zu verstärken.  Zu die Wahrscheinlichkeit der Verschmutzung mit exogenem DNAs verringern, ein spezielles Set Reagenzien und Lösungen für nur PCR vorbereiten und benutzen.  Backen Sie alle Glaswaren 6 Stunden lang an 150°C und sterilisieren Sie alles plasticware. - [Gelesenes langes PCR-Protokoll]

Kategorie: Zellkultur-Protokolle: Zellen-Speichern und Zellen-einfrierende Protokolle

Keine besondere Behandlung wird benötigt, um ein lysate für die aktive Ansammlung vorzubereiten. Die folgende Prozedur sollte für langfristige Lagerung der Lambda-Klone in den archivalischen Ansammlungen verwendet werden. Das Bakterium werden in den Media verdünnt, die 7% DMSO enthalten und eingefroren bei -80 Grad C. - [gelesenes langfristiges Lambda-Bakteriophagenspeicher-Protokoll]

Kategorie: Chromatographie-Protokolle: Stillgestellte Metallionenaffinitäts-Chromatographie-Protokolle

Protokoll ist der erste Jobstepp in einem dreistufigen Prozess für die Vorbereitung und in der Bereicherung der Phosphopeptide unter Verwendung der stillgestellten Metallaffinitätschromatographie (IMAC) für das Kennzeichen der Phosphopeptide durch LC-MS/MS.  Diese Prozedur wird verwendet, um Proteinauszüge von den Zellen WEHI-231 vorzubereiten.  Diese Vorbereitungsmethode liefert zellulare Proteintotalproben, die von der Verseuchung der Nukleinsäuren frei sind. - [Gelesene Zerstörung-und Protein-Extraktion von den Zellen WEHI-231 mit TriPure Lokalisierungs-Reagens-Protokoll]

Kategorie: Stammzelle-Protokolle: Stammzelle-Kultur-Protokolle

Beschreibt die Jobstepps im Detail, um neurale Stammzellen in Form von neurospheres von den Gewebezerlegungen des postnatalen Mäusegehirns zu lokalisieren und zu erweitern. Durchgang der Prozeduren langfristig von neurospheres und das cryopreservation von neurospheres werden auch zur Verfügung gestellt. Zusätzlich zusätzlich den Korrekturlinien und zu den Spitzen für das Generierung der neurosphere Kulturen, beschreiben wir die Methode, um neurospheres für Analyse durch Lichtmikroskopie vorzubereiten. - [Gelesene neurale Stammzelle-Kultur: Neurosphere Erzeugung, mikroskopische Analyse und Cryopreservation]