örtlich festgelegte Protokolle

Kategorie: Cytoskeleton-Protokolle: Actin-Myosin-Protokolle

Phalloidin bindet spezifisch an F-Actin, und Leuchtstoff-etikettiertes phalloidin befleckt das Actin skeleton in den Zellen in gewissem Sinne, das sehr nah an dem befleckenden gesehenen Muster Anti-Actin, Antikörper zu verwenden ist. - [gelesenes Actin, das in örtlich festgelegtem Hefe-Zellen Protokoll befleckt]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle: DNA befleckende Protokolle für Fluß Cytometry

Einfache und allgemeinhin anwendbare Methoden für das Beflecken der örtlich festgelegten Zellen werden dargestellt, wie Methoden, die Reinigungsmittel und proteolytische Behandlung verwenden, permeabilize Zellen sind. Zusätzlich wird die supravital Zelle, die mit Hoechst 33342 befleckt, das hauptsächlich für das Sortieren der Phasenzellen für das folgende Züchten basiert auf DNA-Inhalt Unterschieden verwendet wird, auch beschrieben. Auch gestellt Methoden für das Beflecken der Zelle Kerne dar, die von Paraffin-eingebetteten Geweben lokalisiert werden, und Entwindung der DNA-Inhalt-Frequenz... - [gelesene Analyse des zellularen DNA Inhalts durch Fluß Cytometry Protokoll]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle: DNA befleckende Protokolle für Fluß Cytometry

Dieses Protokoll stellt eine Methode für Analyse der DNA Zerteilung mit dem Fluß zur Verfügung, der nachdem es cytometry ist, des propidium Jodids (PU) der örtlich festgelegten apoptotic Zellen beschriftet hat. Der cytometry Fluß deckt apoptotic Kerne in der subdiploid Region des Zelle Schleifehistogramms... auf - [gelesene Analyse der DNA Zerteilung mit dem Propidium Jodid (PU) befleckend nach Äthanol-Fixierung-Protokoll]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle

Eine empfindliche Methode für die Abfragung von apoptosis durch den einzelnen Laser Fluß cytometry. Methodenlehre schließt ein: Für Abfragung von apoptosis beflecken, direkte befleckende Prozedur, indirekte befleckende Prozedur, Protokoll für den Gebrauch Aktinomycins D (ANZEIGE) auf Proben, die mit 7-AAD für apoptosis befleckt wurden und im Formaldehyd geregelt. - [Gelesenes Apoptosis Abfragung Protokoll Durch Single Laser Fluß Cytometry]

Kategorie: Antikörper-Protokolle: Antikörper-Beschriftende Protokolle

Sobald Gewebe örtlich festgelegt sind und permeabilized, werden die Antikörper hinzugefügt. Diese Antikörper können direkt beschriftet werden oder durch ein beschriftetes Sekundärreagens entdeckt werden. Für indirekte Abfragung kann jedes mögliches Reagens, das spezifisch an den Primärantikörper bindet, "etikettiert werden" und benutzt werden, um den Antikörper zu lokalisieren. Die möglichen Reagenzien schließen Anti-Immunoglobulin Antikörper, Protein A oder G oder, wenn der erste Antikörper mit Biotin beschriftet wird, streptavidin ein. Sie können mit Enzymen oder Gold beschriftet werden. - [gelesene verbindliche Antikörper zum Gewebe unterteilt Protokoll]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle: Fluß Cytometry Kalibrierung Protokolle

Fluß cytometers müssen vor Fluoreszenzintensität Messen wegen der zugehörigen Instrumentveränderlichkeit kalibriert werden. Um für diese Veränderlichkeit zu beheben, müssen ein Standardpartikel (rote Blutzellen des örtlich festgelegten Huhns oder CRBCs) auf dem Instrument vor jedem Experiment und den Spannungen des Photovervielfachergefäßes analysiert werden (PMT), die dementsprechend justiert werden um die CRBC Fluoreszenz-Emissionspitzen in vorbestimmte Zielführungen zu plazieren. - [gelesene Kalibrierung Becton Dickinson des Flusses Cytometers für relative Fluoreszenz-Intensität Messen]

Kategorie: Xenopus Protokolle

Protokoll beschreibt den Gebrauch einer grundlegenden wasserbasierten Färbung, für saure mucosubstances und essigsauren die mucins zu beflecken, die auf dem Knorpel der örtlich festgelegten Embryos gelegen sind und ermöglicht die Prüfung der Knorpelanordnung. - [gelesenes Knorpel-Beflecken Xenopus des tropicalis Protokolls]

Kategorie: Immunitätsforschung: Immunopräzipitation-Protokolle: Chromatin Immunopräzipitation-Protokolle

Protokoll beschreibt den Gebrauch von chromatin Immunopräzipitationtechnologie (Chip) Interaktionen der Proteine oder der Proteinkomplexe mit in vivo DNA zu analysieren. In dieser Annäherung wird das Material mit Formaldehyd geregelt, um DNA-Protein und Protein-Protein Verbindungen zu konservieren, werden die Zellen aufgelöst, und das chromatin wird geschnitten und solubilisiert. Die chromatin Aufhebung ist immunoprecipitated mit einem Antikörper gegen das protein(s) des Interesses, und coimmunoprecipitated DNA Fragmente werden analysiert. - [gelesene Chromatin Immunopräzipitation (Chip) des Protein-Komplex-Protokolls]

Kategorie: Genetik und Genomics: Krebs-Genetik-Protokolle

Forscher können X Chromosominaktivierung (Methylierung) verwenden um den clonality Status eines Tumors oder der premalignant Verletzung in den Frauen festzustellen. Die Technik basiert auf einem Methylierung-empfindlichen Beschränkung Enzym und einer Analyse eines polymorphen Ortes auf dem X Chromosom. Klonische Zelle Bevölkerungen zeigen "Verlust" des nicht-methylierten Allels nachdem Beschränkung Auswahl. Die Probe kann an DNA durchgeführt werden, die von erholt wird, microdissected Proben. können gefrorenes Gewebe und örtlich festgelegt-eingebettetes Gewebe benutzt werden. - [Gelesenes Clonality - X Chromosom-Inaktivierung-Probe Protokoll]

Kategorie: Molekulare Belichtung: Immunofluoreszenz-Mikroskopie

Die doppelte Immunofluoreszenz, die für BCL-6. die gelösten oder Azeton-örtlich festgelegten Probenmaterialien befleckt, dewaxed, Antigen zurückgeholte Plättchen - [die gelesene doppelte Immunofluoreszenz, die für BCL-6 befleckt]

Kategorie: Immunitätsforschung: Immunofluoreszenz-Protokolle: Immunofluoreszenz-Befleckende Protokolle

Protokoll für die doppelte Immunofluoreszenz, die für BCL-6 befleckt. Irgendein Typ Gewebe ist für diese Technik, so lang verwendbar, wie die Antigenizität für Ihr antigen(s) konserviert wird. Schließt ein: gelöste oder Azeton-örtlich festgelegte Probenmaterialien; dewaxed, Antigen zurückgeholte Plättchen. - [gelesene doppelte Immunofluoreszenz, die für Protokoll BCL-6 befleckt]

Kategorie: Protein-Protokolle: Protein-Extraktion Vom Gewebe

Extraktion und Analyse der Diagnose- nützlichen Proteine von Formalin-örtlich festgelegten, Paraffin-eingebetteten Gewebekapiteln. Ikedaa et al., 1998 JHC. - [gelesene Extraktion und Analyse der Diagnose- nützlichen Proteine von Formalin-örtlich festgelegten, Paraffin-eingebetteten tis]

Kategorie: Zellkultur-Protokolle: Zelle Regelnprotokolle

Das Behandeln der Zellen mit Paraformaldehyd führt zu die Einrichtung der chemischen Querverbindungen zwischen freien Aminogruppen. Wenn die Querverbindungen unterschiedliche Moleküle verbinden, tritt ein latticework von Interaktionen auf, das die gesamte Architektur der Zelle zusammenhält. Kommerzielle Formaldehydlösungen werden nicht empfohlen, weil sie die Vorteile des Verwendens eines mit variabler Längepolymer-Plastiks ermangeln, und die Zellen werden gleichzeitig mit dem Spiritus geregelt (normalerweise Methanol). - [gelesene regelnangebrachte Zellen im Paraformaldehyd-Protokoll]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle: Fluß Cytometry Immunofluoreszenz-Befleckende Protokolle

Protokoll stellt eine Methode für Analyse der Zelle Oberfläche Antigene mit direkter Immunofluoreszenz d.h. zur Verfügung wenn der Antikörper, der verwendet wird, direkt zu einer Leuchtstofffärbung beschriftet wird. Nachdem man befleckt hat können die Zellen durch den cytometry oder örtlich festgelegten Fluß sofort analysiert werden und für neuere Analyse gespeichert werden. - [gelesenes Leuchtstoffbeflecken der Zelle Oberfläche Antigene auf entwicklungsfähigen Zellen mit direkter Immunofluoreszenz]

Kategorie: Mikroskopie-Protokolle

FM 4-64 ist eine lipophile styryl Färbung und ein lebenswichtiger Fleck: es fluoresziert nur in lebenden Zellen, also können Zellen nicht dann repariert werden befleckten noch befleckten dann geregelt. Sie müssen lebende Zellen beflecken und beobachten. FM 4-64 durchdringt nicht Zelle Membranen aber, schiebt stattdessen in die Plasmamembrane wird genommen dann in die Zellen durch endocytosis ein. - [gelesenes FM 4-64 Beschriften des Hefe-Vakuole-Membranen Protokolls]

Kategorie: Mikroskopie-Protokolle: Elektronenmikroskopie-Protokolle

In den letzten Jahren haben die erhöhte Empfindlichkeit der Elektrondetektoren und die Verwendbarkeit der Niedrigvakuum- oder Variabeldruck Systeme Belichtung der frischen Gewebeproben ohne die Notwendigkeit an der Fixierung, am Trockner und an der Schicht erlaubt. Dieses sichert offensichtlich viel Zeit, obgleich die Bildqualität möglicherweise nicht wie die so gut sein kann, die von örtlich festgelegten Proben erreicht wird. Jedoch für die meisten Anwendungen, die neigen, an einer verhältnismäßig niedrigen Vergrößerung zu sein, kann die Qualität wie die so gut sein, die von örtlich festgelegten Proben erreicht wird. - [gelesene Belichtung der frischen Arabidopsis Gewebe im Rasterelektronenmikroskop]

Kategorie: Betriebsbiologie-Protokolle

In den letzten Jahren haben die erhöhte Empfindlichkeit der Elektrondetektoren und die Verwendbarkeit der Niedrigvakuum- oder Variabeldruck Systeme Belichtung der frischen Gewebeproben ohne die Notwendigkeit an der Fixierung, am Trockner und an der Schicht erlaubt. Dieses sichert offensichtlich viel Zeit, obgleich die Bildqualität möglicherweise nicht wie die so gut sein kann, die von örtlich festgelegten Proben erreicht wird. Jedoch für die meisten Anwendungen, die neigen, an einer verhältnismäßig niedrigen Vergrößerung zu sein, kann die Qualität wie die so gut sein, die von örtlich festgelegten Proben erreicht wird. - [gelesene Belichtung der frischen Arabidopsis Gewebe im Rasterelektronenmikroskop-Protokoll]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle

Protokoll für immunohistochemistry auf den örtlich festgelegten, Paraffin-eingebetteten Kapiteln. Diese Methode wird allgemein verwendet und zutrifft auf die Abfragung der überwältigenden Mehrheit einen Antigenen, mit wenigen Ausnahmen, für die enzymatische Wiederherstellung benoetigt wird. Die Methode verwendet ein starkes Cheliermittel, EDTA. Schließt ein: Doppeltes indirektes AP; AP sich entwickelnde Lösung; Indirektes immunohistochemistry mit Avidin-Biotin und HRP; HRP sich entwickelnde Lösung. - [gelesenes Immunohistochemistry auf örtlich festgelegtem, Paraffin-Eingebettetem Kapitel-Protokoll]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle

Protokoll beschreibt die Anwendung der Paronyme der Peroxydase oder der alkalischen Phosphatase im immunohistochemical Beschriften der Formalin-örtlich festgelegten, Paraffin-eingebetteten Gewebekapitel. Schließt ein: Abbau des Paraffins und der Rehydrierung; Antigen-Wiederherstellung - Unmasking des Antigens; Enzymwiederherstellung; Mikrowelle Wiederherstellung; Inaktivierung der endogenen Peroxydase; etc.. - [Gelesenes Immunohistochemistry Protokoll]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle

Immunohistochemistry Protokoll für?H2AX Abfragung (Formalin-örtlich festgelegte Paraffin-eingebettete Kapitel). - [gelesenes Immunohistochemistry Protokoll für?H2AX Abfragung]

Kategorie: DNA Protokolle: Chromatin Immunopräzipitation-Protokolle

Chromatin-IP (oder Chip) ist eine nützliche Methode für die Lokalisation der Proteine zu den spezifischen Regionen von DNA gewesen. Chip wendete microarrays (Chip auf Chip) an den braunen Labor an - [gelesene Immunopräzipitation von Chromatin von örtlich festgelegtem Hefe-Protokoll pdf]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle

Protokoll für örtlich festgelegtes Gewebe der indirekten Peroxydasetechnik. - [gelesenes örtlich festgelegtes Protokoll Gewebe der indirekten Peroxydase-Technik]

Kategorie: Gewebelehre-Protokolle: Laser Sicherung und Microdissection

Vorbereitung des gefrorenen Gewebes für LCM, Kapitel vom gefrorenen Gewebe für Laser Microdissection vorbereitend und bereiten Kapitel von örtlich festgelegtem, Paraffin-eingebettetem Gewebe für Laser Microdissection Protokolle und von den Methoden vor. Laser Microdissection Labor. UAB. - [Gelesene Laser Sicherung Microdissection Protokolle]

Kategorie: Bakterielle Protokolle

Alkali wird benutzt, um DNA von den bakteriellen Kolonien auf Nitrozellulose- oder Nylonfiltern zu befreien. Die DNA wird dann am Filter befestigt, indem man unter Vakuum UV--Kreuz-bindet oder backt. - [gelesen, Kolonien und Schwergängigkeit von DNA zum Filter-Protokoll auflösend]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Fluß Cytometry Protokolle: DNA befleckende Protokolle für Fluß Cytometry

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode für quantitatives Messen von DNA mit propidium Jodid (PU) das Beflecken und Fluß cytometry. PU befleckt alle double-stranded Regionen von DNA und von RNS, indem er zwischen den gestapelten Unterseiten der doppelten Schnecke einschiebt. PU kann nicht eine intakte Zelle Membrane eindringen; folglich sind Zellen vor dem Beflecken örtlich festgelegt. Die Äthanol-örtlich festgelegten Zellen können gespeichert werden ungefärbt an 4°C für Tage oder sogar Wochen, und dann befleckt werden und analysiert werden. - [gelesenes Messen des DNA Inhalts mit dem Beflecken des Propidium Jodid-(PU) des örtlich festgelegten vollständigen Zellen Protokolls]