Ausdruck Protokolle

Kategorie: Primärzellen-Lokalisierungs-und Kultur-Protokolle: Laser-Sicherung Microdissection Protokolle: Gewebe-Vorbereitung für LCM Protokolle

Spezifische Zellen oder Gewebe der LCM Isolate von den Proben hingen an den Mikroskopplättchen ein. Die Proben werden durch einen thermoplastischen Film angesehen, der zu einer microcentrifuge Gefäßkappe angebracht wird. Die beschränkte Hitze, verursacht durch die Anwendung eines Laser-Impulses, fixiert die Membrane zu den Zellen des Interesses, die für weitere Analyse dann geerntet werden können. RNS und Proteine können von den lokalisierten Zellen gereinigt werden und ausführliche Analyse des Genausdrucks erlauben. Dieses Protokoll wird in drei Stadien unterteilt. - [Gelesen (LCM): Vorbereitung und Einteilung der gefrorenen Gewebe-Blöcke und Reinigung von RNS von lokalisiertem Cel]

Kategorie: Betriebsbiologie-Protokolle: Betriebsproteine, -peptide und -antigene

Der pH ist ein wichtiger Parameter, der viele metabolischen und signalisierenden Bahnen in lebenden Zellen steuert. Recombinant Leuchtstoffph-Anzeigen (pHluorins) haben Mode für Überwachung zellulare Ph. geerbt. Sie werden vom populärsten Aequorea Victoria GFP (Handels-GFP) berechnet. Hier wir darstellen einen neuen Leuchtstoffph-Reporter, den Protein von der Orange Ptilosarcus gurneyi (Pint-GFP) und vergleichen seine Eigenschaften mit pHluorins für Ausdruck und Gebrauch in den Anlagen seapen. - [Gelesen einer neuen Leuchtstoffph-Prüfspitze für Ausdruck in den Anlagen]

Kategorie: Betriebsbiologie-Protokolle: Arabidopsis Gewebe-Kultur

Experimente eingeschlossen für Analyse der Betriebsepidermis: Steroidinduktion des Genausdrucks in Arabidopsis; Replik-Formen und Formen der Betriebsepidermis. - [Gelesene Analyse der Betriebsepidermis-Experimente]

Kategorie: Genetik und Genomics: Krebs-Genetik-Protokolle

Anatomie einer vergleichbaren Genausdruckstudie. Schließt ein: Wählen der Zellen-Bevölkerungen; mRNA-Extraktion und Rückübertragung; Leuchtstoffkennzeichnung von cDNAs; Hybridation zu einem DNAMicroarray; Scannen der hybridisierten Reihe; Deutung des gescannten Bildes. - [Gelesene Anatomie einer vergleichbaren Gen-Ausdruck-Studie]

Kategorie: Microarray-Protokolle: Microarray-Analysen-Protokolle

Informationen über Anatomie einer vergleichbaren Genausdruckstudie.  Schließt ein: Wählen der Zellenbevölkerungen; mRNA-Extraktion und Rückübertragung; Leuchtstoffkennzeichnung von cDNAs; Hybridation von DNAmicroarray; Scannen der hybridisierten Reihe; Deutung des gescannten Bildes. - [Gelesene Anatomie einer vergleichbaren Gen-Ausdruck-Studie]

Kategorie: Transfection-Protokolle: Beständige Transfection-Protokolle

Das AFCS verwendet antisense Technologie, um Signalisierenproteinausdruck in den ROHEN 264.7 Makrophage-wie Zellform zu manipulieren. Dieses kann durch den Transfection der Gen-spezifischen antisense Oligonucleotides (ASOs) erzielt werden. Die folgende Prozedur bezieht den Transfection von ASOs in ROHE 264.7 Zellen unter Verwendung FuGENE 6 des Transfectionreagens mit ein. Nachher können die lokalisierte Gesamt-RNS oder das Protein von diesen transfected Zellen benutzt werden, um das Niveau von mRNAoder Protein Knockdown festzusetzen, beziehungsweise. - [Gelesener Antisense OligonucleotideTransfection der ROHEN 264.7 Zellen mit FuGENE 6 in einem Teller 24-Well]

Kategorie: Klonen-Protokolle: Baculovirus Protein-Ausdruck-Protokolle

Protokoll für Baculovirus Analyse des nonsecreted Proteinausdrucks. - [Gelesene Baculovirus Analyse des Nonsecreted Protein-Ausdruck-Protokolls]

Kategorie: Zellkultur-Protokolle: Insekt-Zellkultur-Protokolle

Baculovirus Protein-Ausdruckprotokolle. Schließt Protokolle ein: Cotransfection Protokoll; Analyse des nonsecreted Proteinausdrucks; Wachsende und einfrierende Insekt-Zellen. - [Gelesene Baculovirus Protein-Ausdruck-Protokolle]

Kategorie: Klonen-Protokolle: Baculovirus Protein-Ausdruck-Protokolle

Protokolle für Baculovirus Proteinausdruck. - [Gelesene Baculovirus Protein-Ausdruck-Protokolle]

Kategorie: Zellen-Biologie und Zellkultur: Fluss Cytometry Protokolle

Protokoll benutzt die spezifischen Antikörper, die bis eins von vier Fluorochrom verbunden werden: Fluoreszinisothiozyanat (FITC), R-Phykoerythrin (PET), peridinin Chlorophyll-ein (PcP) und allophycocyanin (APC). Diese Fluorochrom können gleichzeitig benutzt werden, um die Ausdruckmuster von vier verschiedenen Proteinen in der gleichen Probe zu beflecken und zu analysieren. Die Fluorochrom befleckten Zellenbevölkerungen werden unter Verwendung eines FACSCalibur Doppel-laser Fluss cytometer analysiert. - [Gelesene Kennzeichnung der Zellen durch Fluss Cytometry Protokoll]

Kategorie: Immunitätsforschung: B-Zellen-Protokolle

Fluorochrom können gleichzeitig benutzt werden, um die Ausdruckmuster von vier verschiedenen Proteinen in der gleichen Probe zu beflecken und zu analysieren. Die Fluorochrom befleckten Zellenbevölkerungen werden unter Verwendung eines FACSCalibur Doppel-laser Fluss cytometer analysiert. - [Gelesene Kennzeichnung der Zellen durch Fluss Cytometry Protokoll]

Kategorie: Signalisieren von Signaltransduction-Protokollen: Chemokine Protokolle

Chemokine Empfänger-Ausdruck-Probe durch Fluss Cytometry. Mullins Labor. Reagenzien, Protokoll und ausführliche Prozedur. - [Gelesene Chemokine Empfänger-Ausdruck-Probe durch Fluss Cytometry]

Kategorie: Neurologie-Protokolle: Änderung- am Objektprogrammfestklemmende Protokolle

Kombinierte Änderung am Objektprogrammklemmplattenaufnahme und mRNA-Ausdruck, der in den einzelnen Neuronen ein Profil erstellt. - [Gelesene kombinierte Änderung- am Objektprogrammklemmplatten-Aufnahme und mRNA-Ausdruck, der in den einzelnen Neuronen ein Profil erstellt]

Kategorie: DNA-Protokolle: Genomic DNA-Bibliotheks-Protokolle

Dieses Stadium fasst zusammen, wie man eine cDNA Bibliothek in einem Säugetier- Vektor, unter Verwendung der Handelsinstallationssätze konstruiert. Diese Installationssätze sind von einigen Herstellern vorhanden und enthalten im Allgemeinen alle erforderlichen Reagenzien. - [Gelesener Aufbau der cDNA Bibliotheken in den Eukaryotic Ausdruck-Vektoren für Aufbau und Siebung]

Kategorie: Primärzellen-Lokalisierungs-und Kultur-Protokolle: Laser-Sicherung Microdissection Protokolle

Drei Ambion Installationssätze wurden, um spezifische miRNAs quantitativ zu bestimmen benutzt und differenzialen miRNA Ausdruck in den verschiedenen Mäusegehirnregionen und in den Zellentypen zu entdecken, die durch Laser-Sicherung microdissection (LCM) lokalisiert wurden. Diese Techniken können am Studieren von miRNA in anderer Sorte, in Geweben und in Zellentypen angewendet werden. Schließt ein: Erhalten Sie Laser-Sicherung Microdissected Proben; Lokalisieren Sie miRNA von den LCM Proben; Bestimmen Sie miRNA durch qRT-PCR quantitativ. - [Gelesen entdecken Sie und bestimmen Sie MicroRNA in den Laser-Sicherung Microdissection Proben] quantitativ

Kategorie: RNAi Technologie-Protokolle

Informationen über, wie MicroRNA in den Laser-Sicherung microdissection Proben entdecken Sie und quantitativ bestimmen Sie. Schließt ein: Erhalten Sie Laser-Sicherung Microdissected Proben; Lokalisieren Sie miRNA von den LCM Proben; Bestimmen Sie miRNA durch qRT-PCR quantitativ; Abfragung von miRNA im Microdissected Gewebe vom Mäusegehirn durch qRT-PCR; Differenzialer Ausdruck von MicroRNA im vollständigen Gehirn-Gewebe verglich mit einer homogeneren Bevölkerung der Zellen. - [Gelesen entdecken Sie und bestimmen Sie MicroRNA in den Laser-Sicherung Microdissection Proben] quantitativ

Kategorie: Cytogenetik-Protokolle: In-situhybridation-Gewebe unterteilt Protokolle

Protokoll für Abfragung von mRNAs auf cryosections des kardiovaskulären Systems unter Verwendung der Graben-beschrifteten RNS prüft. Protokoll wurde von einem Protokoll unter Verwendung der Prüfspitzen der RNS 35S-labeled optimiert. Es darf den Ausdruck der niedrigen reichlich vorhandenen mRNAs im kardiovaskulären System, z.B. des proinflammatory cytokine GM-CSF in den normalen menschlichen Koronararterien und des IL6 und des gp130 in den menschlichen ausfallen Inneren entdecken. Das Protokoll kann mit immunohistochemistry kombiniert werden. - [Gelesene Abfragung von mRNAs auf Cryosections des kardiovaskulären Systems unter Verwendung der Graben-Beschrifteten RNS Prüfspitzen]

Kategorie: Immunitätsforschung: B-Zellen-Protokolle

B-Zellenaktivierung kann durch prüfenantikörperproduktion oder direkt indem man zellulare Änderungen indirekt quantitativ bestimmt werden misst, die sofort nach Aussetzung zu einem Aktivierungssignal eintreten. Stellt Methoden für die letzte (direkte) Annäherung zur Verfügung--nämlich Methoden für das Mengenmäßig bestimmen der frühen Parameter der b-Zellenaktivierung wie Zunahmen der intrazellulären ionisierten Kalziumkonzentration [Ca2+] I, des Zellengröße und DER MHC Kategorie II-Antigen Ausdruck. - [Gelesene frühe Ereignisse im b-Lymphozyte-Aktivierungs-Protokoll]

Kategorie: Reporter-Gen-Proben

Protokoll, das ecdysone als Regler des durch Induktion erhältlichen Genausdrucks in den Säugetier- Zellen beschreibt. - [Gelesenes Ecdysone als Regler des durch Induktion erhältlichen Gen-Ausdrucks in den Säugetier- Zellen]

Kategorie: Zellen-Biologie und Zellkultur: Fluss Cytometry Protokolle

Protokoll für die Schätzung der Zahl Molekülen CD38 auf den CD8+ T Lymphozyten der HIV-angesteckten Einzelpersonen. Schließt ein: EMPFEHLUNG DES VERKÄUFERS FÜR PE-CD38 UND PE-CD4; GÜLTIGKEITSERKLÄRUNG DER LOGARITHMISCHEN VERSTÄRKER-LINEARITÄTEN UND DER EMPFINDLICHKEIT; ERHALTUNG DES NIVEAUS DES AUSDRUCKS DES ANTIGEN-CD4 AUF CD4+ LYMPHOZYTEN UND SEINES GEBRAUCHES ALS BIOLOGISCHER STANDARD FÜR INSTRUMENT-KENNZEICHNUNG DES FLUSS-CYTOMETER; ERMITTLUNG DER ZAHL MOLEKÜLEN CD38 PRO CD8+ ZELLE; ETC… - [gelesen, die Zahl Molekülen CD38 schätzend auf den CD8+ T Lymphozyten der HIV-Angesteckten Einzelpersonen]

Kategorie: Protokolle e-Coli: Protein-Protokolle e-Coli

Protokoll für den Ausdruck und die Reinigung seiner etikettierten Proteine in Escherichia Coli. - [Gelesener Ausdruck und Reinigung seiner etikettierten Proteine im Escherichia- Coliprotokoll]

Kategorie: Recombinant Protein-Protokolle

Ausdruck eines prokaryotic P-Typen Atpase in den Escherichia- Coliplasma-Membranen und der Reinigung durch Ni2+-affinity Chromatographie. Biologische Prozeduren online - [gelesener Ausdruck eines prokaryotic P-Typen Atpase in den Escherichia- Coliplasma-Membranen und der Reinigung durch Ni2+-affin]

Kategorie: Protokolle e-Coli: Protein-Protokolle e-Coli

Protokoll für den Ausdruck der geklonten Gene in Escherichia Coli unter Verwendung der IPTG-durch Induktion erhältlichen Förderer. Protokoll beschreibt, wie man (1) klonte die Reihenfolgen klont, die geöffnete Lesefelder in den Plasmiden kodieren, die IPTG-durch Induktion erhältliche Förderer tragen, (2), um Ausdruck der Zielproteine in den transformants zu optimieren, die diese recombinants tragen, und (3) stufenSie Produktion der fremden Proteine ein. - [Gelesener Ausdruck der geklonten Gene in Escherichia Coli unter Verwendung des IPTG-durch Induktion erhältlichen Förderer-Protokolls]

Kategorie: Virenhandhabungs-Protokolle: BakteriophagenLamda Handhabungs-Protokolle

Protokoll beschreibt, wie man (1) klonte die Reihenfolgen klont, die geöffnete Lesefelder in den Plasmiden kodieren, die Bakteriophage {Lambda} tragen pL-Förderer, (2), um Ausdruck der Zielproteine in den transformants zu optimieren, die diese recombinants tragen, und (3) stufenSie Produktion der fremden Proteine ein. - [Gelesener Ausdruck der geklonten Gene in Escherichia Coli unter Verwendung des Förderer-Protokolls Bakteriophagelambda-pL]

Kategorie: Protokolle e-Coli: Protein-Protokolle e-Coli

Protokoll für Ausdruck der geklonten Gene in Escherichia Coli unter Verwendung des Förderers Bakteriophagelambda-pL. Protokoll beschreibt, wie man (1) klonte die Reihenfolgen klont, die geöffnete Lesefelder in den Plasmiden kodieren, die Förderer Bakteriophagelambda-pL tragen, (2), um Ausdruck der Zielproteine in den transformants zu optimieren, die diese recombinants tragen, und (3) stufenSie Produktion der fremden Proteine ein. - [Gelesener Ausdruck der geklonten Gene in Escherichia Coli unter Verwendung des Förderer-Protokolls Bakteriophagelambda-pL]