kovalente Protokolle

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle: Antikörper-Befleckende Protokolle

Es gibt einige Strategien, zum des Antikörpers sichtbar zu machen. Für übertragene Lichtmikroskopie werden Farbe Entwicklung Substrate für Enzyme häufig benutzt. Der Antikörper kann mit dem Enzym direkt beschriftet werden. Jedoch konnte solch ein kovalentes Link zwischen einem Antikörper und einem Enzym einen Verlust des Enzyms und der Antikörperaktivität ergeben. Aus diesen Gründen sind einige befleckende Mehrstufenprozeduren entwickelt worden, wo Zwischenlinkantikörper benutzt werden. In diesem Protokollgebrauch der Vectastain ABC-Installationssatz. - [gelesenes Immunocytochemistry in Frei-Sich hin- und herbewegendem Kapitel-Protokoll]

Kategorie: Antikörper-Protokolle: Antikörper-Beschriftende Protokolle

Dieses Protokoll beschreibt die kovalente Koppelung der Antikörper zum Biotin. Biotingruppen binden mit extrem hoher Affinität an streptavidin und Avidin, von denen beide kommerziell verbunden mit Enzymen, Leuchtstofffärbungen oder Jod vorhandenes sind. A biotinylated Primärantikörper, kann mit irgendwelchen einer breiten Vielzahl der unterschiedlichen Kennsätze folglich entdeckt werden. Die biotinylation Reaktion ist einfach und mild und inaktiviert selten den Antikörper. - [gelesene beschriftende Antikörper mit Biotin-Protokoll]

Kategorie: DNA Protein-Interaktionen Protokolle

Der Komplex MultiproteincDna des Interesses wird mit dem Site-spezifisch derivatisierten DNA Fragment gebildet.  Der Komplex wird dann UV-BESTRAHLT und initialisiert kovalente Vernetzung mit Proteinen in der direkten körperlichen Nähe zum Vernetzung Mittel.  Umfangreiche Nukleaseverdauung wird durchgeführt, um unvernetzte DNA und Bekehrter querverbundene DNA zu einem querverbundenen, radioaktiven Nukleotid "Marke zu beseitigen." - [Gelesene Site-Spezifische Foto-Kreuz-Bindung Protein-DNA: Analyse der strukturellen Organisation von Protein-DNA]