zerspaltete Protokolle

Kategorie: Virenhandhabung Protokolle: Bakteriophagenhandhabung M13 Protokolle

Protokoll beschreibt drei Standardmethoden, um Bakteriophage M13 recombinants zu konstruieren: (1) Verbinden von von Einsatz DNA zu einem linearisierten Vektor, vorbereitet durch Spaltung von HF M13 mit einem einzelnen Beschränkung Enzym; (2) alkalische Phosphatase verwendend, um Selbst-Verbindung des linearisierten Vektors zu unterdrücken und (3) mit HF M13 zerspaltet mit zwei Beschränkung Enzymen für Richtungsklonen. - [gelesenes Klonen in Bakteriophage M13 Vectors Protokoll]

Kategorie: Klonen-Protokolle: Vektorprotokolle

Richtungsklonen benötigt, daß der Plasmidvektor mit zwei Beschränkung Enzymen zerspaltet wird, die inkompatible Termini festlegen und denen das Fragment von geklont zu werden DNA Termini trägt, die mit denen des doppelt zerspalteten Vektors kompatibel sind. - [gelesenes Richtungsklonen in Plasmid Vectors Protokoll]

Kategorie: Zelle Biologie und Zellkultur: Apoptosis Protokolle

Verbesserte Abfragung der Apoptotic Zellen in den archivalischen Paraffin-Kapiteln: Immunohistochemistry, Antikörper zu zerspaltetem Caspase 3 verwendend. Gown et al., 2002 - [gelesene verbesserte Abfragung der Apoptotic Zellen in den archivalischen Paraffin-Kapiteln: Immunohistochemistry Anti- Verwendend]

Kategorie: Virenhandhabung Protokolle: Bakteriophagenlamda Handhabung Protokolle

Vektoren des Bakteriophages {Lambda}, die genetische Auswahl der recombinant Bakteriophagen erlauben (z.B., die EMBL Serie, {lambda}2001, {lambda}DASH, {lambda}ZAP und {lambda}gt10) kann für das Klonen durch einfache Verdauung durch ein oder mehr Beschränkung Enzyme vorbereitet werden. - [gelesene Vorbereitung von Bakteriophagelambda DNA zerspaltet mit einem einzelnen Beschränkung Enzym-Protokoll]

Kategorie: Virenhandhabung Protokolle: Bakteriophagenlamda Handhabung Protokolle

Viele Wiedereinbauvektoren (z.B., die EMBL Serie, {lambda}2001 und {lambda}DASH) enthalten eine Reihe Beschränkung Sites, geordnet in den gegenüberliegenden Lagebestimmungen, an jedem Ende des zentralen stuffer Fragments. Verdauung dieser Vektoren mit zwei unterschiedlichen Beschränkung Enzymgewinnen link und rechte Arme, ein stuffer Fragment und kurze Segmente der polycloning Sites. Diese können von den Armen durch differentialen Niederschlag mit Isopropanol- oder Spinnenspaltechromatographie leicht gelöscht werden. - [gelesene Vorbereitung von Bakteriophagelambda DNA zerspaltet worden mit zwei dem Beschränkung Enzym-Protokoll]

Kategorie: Hefe-Protokolle: Hefe-Nukleinsäure-Protokolle: Hefe DNA Lokalisierung Protokolle

Diese Methode erbringt reproducibly einige Mikrogramme Hefe DNA, die durch Beschränkung Enzyme leistungsfähig zerspaltet werden und als Schablone in PCR verwendet werden können. - [gelesene kleinräumige Vorbereitungen des Hefe DNA Protokolls]

Kategorie: Reporter-Gen-Proben: Luciferase Probe Protokolle

Protokoll beschreibt eine aufgeteilte luciferase Komplementierungprobe, die verwendet wird, um die Interaktion der Proteine in den Zellen zu studieren. In der aufgeteilten Proteinstrategie wird ein einzelner Reporter protein/enzyme (Leuchtkäfer luciferase [ Fluc ]) in Amino-Terminal und Carboxyterminal Hälften zerspaltet; jede Hälfte wird bis eins von zwei zusammenwirkenden Proteinen, X fixiert u. Y. Physical stellen Interaktionen zwischen den zwei Proteinen das Funktionsreporterprotein wieder her und führen zu enzymatische Aktivitäten, die gemessene vorbei in-vitro- oder in vivo Probe sein können - [gelesene aufgeteilte Luciferase Komplementierung-Probe für das Studieren von von Interaktion der Proteine X und Y in den Zellen]