brechen Sie Protokolle

Kategorie: Zellkultur-Protokolle: Zelle Lysis-Protokolle

Für die Zellen, die in der Gewebekultur gewachsen werden, behandelt die nützlichste Methode von Lysis mit Reinigungsmitteln, wie in diesem Protokoll beschrieben. Nichtionogene Reinigungsmittel, wie NP-40, solubilisieren das Plasma und die intrazellulären Membranen, brechen viele schwache intermolekulare Bindungen und solubilisieren die meisten geläufig studierten Proteinantigenen. RIPA Lysisbuffer kann als rigoroserer Extraktionbuffer benutzt werden, um alle aber die unlöslichen Proteine der Zelle freizugeben und die meisten schwachen noncovalent Interaktionen zu brechen. - [gelesen, Gewebe-Kultur Zellen für Immunopräzipitation-Protokoll auflösend]

Kategorie: Nukleinsäure-Elektrophorese-Protokolle: Pulsiert Fangen Sie Gel-Elektrophorese-Protokolle auf

Führen Sie für Vorbereitung von DNA für pulsed-fangene Gelelektrophorese Protokoll: Lokalisierung intakter DNA von der Hefe. Hefezellen werden zuerst enzymatisch behandelt, um hinunter die Zellwände zu brechen und erneut ausgesetzt dann in den Niedrig-schmelzentemperatur Agarosesteckern.  Die DNA wird befreit, indem man die Stecker mit Lysisbuffer und -proteasen hineingießt.  Diese Methode wird verwendet, um die herkömmlichen und künstlichen Hefechromosomen vorzubereiten. - [gelesene Vorbereitung von DNA für Pulsed-fangene Gel-Elektrophorese: Lokalisierung Intakter DNA von der Hefe]

Kategorie: Mäuseprotokolle: MäusecZellkultur-Protokolle

Die Leber einer Ratte ist cannulated und perfused in situ mit dem Buffer und folgt, den sie in einem geschlossenen System mit einer Kollagenbildunglösung besteuert und perfused wird. Nach einem Zeitabschnitt fängt die Leber an, oben zu brechen, an deren Punkt sie auf einen Meßzylinder übertragen wird und Kulturmedium hinzugefügt wird. Sie wird dann leicht aufgeregt, um die Freisetzung von Zellen zu verursachen, die nachher strecken gefiltert und lassen werden. Die parenchymal und non-parenchymal Zellen bilden zwei eindeutige Schichten, die separat sein können - [gelesen der Lokalisierung und der Kultur Ratte-des hepatischen Zellen Protokolls]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle: Antigen-Wiederherstellung Protokolle

Einige Methoden sind "zurückholen" Antigene entwickelt worden, die durch Fixierung verdeckt worden sind. Die Grundregel hinter dem Verwenden der Mikrowellenherdmethode, die hier beschrieben wird, soll ausgedehnte Perioden der Hitze verwenden, um einige der subzellularen Strukturen zu brechen, die Antikörperzugriff blocken. Beachten Sie, daß irgendwelche der Antigenwiederherstellung Methoden wo möglich vermieden werden sollten, weil sie das artifactual falsch-positive Beflecken vorstellen können. - [gelesenes Unmasking verstecktes Epitopes mit dem Mikrowellenherd-Protokoll]

Kategorie: Immunohistochemistry Protokolle: Antigen-Wiederherstellung Protokolle

Die Grundregel hinter der Dampfkochtopfmethode, die hier beschrieben wird, soll ausgedehnte Perioden der Hitze verwenden, um einige der subzellularen Strukturen zu brechen, die Antikörperzugriff blocken. Diese Annäherung ist für das Handhaben der Probenmaterialien auf Objektträgern angebracht. Die Hauptvorteile der Dampfkochtopfmethode sind die Fähigkeit, viele Plättchen gleichzeitig zu handhaben, die Bequemlichkeit des Verwendens der Metallzahnstangen und die Vermeidung aller brenzligen Stellen, die in der Mikrowelle gefunden werden. - [gelesenes Unmasking verstecktes Epitopes mit dem Dampfkochtopf-Protokoll]