verstärkte Protokolle

Kategorie: Pcr-Protokolle: AFLP PCR

Ulrich G. Mueller und L. LaReesa Wolfenbarger. Verstärkte Fragmentlängenpolymorphien (AFLPs) sind Polymerasekettenreaktion (PCR) - gegründete Markierungen für die schnelle Siebung der genetischen Verschiedenartigkeit. AFLP. BAUM Oktober 1999 - [gelesenes AFLP genotyping und Fingerabdrücke nehmendes Zusammenfassung pdf]

Kategorie: Pcr-Protokolle: cDNA Synthese-Protokolle

Eine oligodeoxynucleotide Zündkapsel, die zu mRNA hybridisiert wird, wird durch eine RNS-abhängige DNA-Polymerase ausgedehnt, um ein cDNA Exemplar zu erstellen, das durch PCR verstärkt werden kann.  Abhängig von dem Zweck dem Experiment, kann die Zündkapsel für Erststrang cDNA Synthese spezifisch konzipiert werden, um zu einem bestimmten Zielgen zu hybridisieren, oder eine allgemeine Zündkapsel wie Oligo (Papierlösekorotron) kann benutzt werden, um cDNA Synthese von allen Säugetier- mRNAs im Wesentlichen vorzubereiten - [die gelesene Verstärkung von cDNA festgelegt durch Rückübertragung des mRNA-Protokolls]

Kategorie: BACs bakterielle künstliche Chromosom-Protokolle

Protokoll stellt die Verstärkung der Einsatzendenreihenfolgen von den bakteriellen künstlichen Chromosomklonen unter Verwendung TAIL-PCR dar. Die verstärkten Produkte sind verwendbar als Prüfspitzen für das Chromosomgehen und -genom abbildend und als Schablonen für das direkte Sequenziell ordnen. Das Protokoll ist in den Reisgenomstudien verwendet worden. - [Gelesene Verstärkung der Einsatz-Enden-Reihenfolgen von den BACs Klonen durch thermischen asymetrischen verschachtelten PCR]

Kategorie: Pcr-Protokolle: AFLP PCR

Verstärkte Fragment-Länge Polymorphien und Microsatellites: Eine phylogenetische Perspektive. Julianisches P. Robinson, Stephen A. Harris. Was sind AFLPs und wie werden sie produziert? Wie sind AFLPs verwendet worden? Probleme? Beschränkungs-Enzyme und Zündkapseln. AFLP Reproducib - [gelesene verstärkte Fragment-Länge Polymorphien und Microsatellites]

Kategorie: Pcr-Protokolle: AFLP PCR

Eine Einleitung in AFLP und ein fAFLP. Markieren Sie E. Berres, Universität von Wisconsin. Verstärkte Fragmentlänge Polymorphie (AFLP) oder seine Leuchtstoffversion (fAFLP) ist eine PCR-gegründete Fingerabdrücke nehmende Technologie. AFLP bezieht im Allgemeinen die Beschränkung von genomic DNA mit ein - [gelesen einer Einleitung zu AFLP und zum fAFLP]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Protokoll ist für bidirektionales, Stumpfendeklonen der DNA-Fragmente.  Die Ziel DNA ist verstärkter PCR und 3 ' - Extensionen werden mit Pfu DNA-Polymerase poliert.  Das amplicon wird zu einer stumpf-beendeten Plasmid DNA verbunden, und die Produkte der Verbindungreaktion werden benutzt, um kompetente Escherichia Coli umzuwandeln.  Ein Beschränkungsenzym wird der Verbindungreaktion hinzugefügt, um jede mögliche Selbst-religating Vektor-DNA relinearize. - [Gelesenes bidirektionales Klonen des PCR-Produkt-Protokolls]

Kategorie: RNAi Technologie-Protokolle: RNAi Säugetier- Zellen-Protokolle

Protokoll für Klonen der verstärkten miRNA Zielsites in 3 ' - UTR des luciferase Reportervektors. - [Gelesenes Klonen der verstärkten miRNA Ziel-Sites in 3 ' - UTR des Luciferase Reporter-vektorprotokolls]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Paare Oligonucleotidezündkapseln, die in PCR benutzt werden, sind häufig mit Beschränkungssites in ihren 5 ' Regionen konzipiert.  In vielen Fällen sind die Sites in den zwei Zündkapseln unterschiedlich.  In diesem Fall legt Verstärkung ein Zielfragment fest, dessen Termini jetzt neue Beschränkungssites tragen, die für Richtungsklonen in Plasmidvektoren benutzt werden können.  Das gereinigte Fragment und der Vektor werden mit den passenden Beschränkungsenzymen verdaut, verbunden zusammen und umgewandelt in Escherichia Coli. - [Gelesene klonende PCR-Produkte durch Addition der Beschränkungs-Sites zu den Termini des verstärkten DNA-Protokolls]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Diese Methode des direkten Klonens nutzt den ungepaarten adenosyl Rückstand, der ' Terminus den 3 von verstärktem DNAs durch Taq und andere hitzebeständige Polymerasen hinzugefügt wird. - [Gelesene klonende PCR-Produkte in T Vectors Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle: RückTranscriptase RT-PCR Protokolle

Der erste Jobstepp in konkurrierendem RT-PCR ist die Synthese und die Reinigung des synthetischen Konkurrenten.  Dieses ist ein RNS-Molekül, das konzipiert ist, mit der gleichen Leistungsfähigkeit wie die endogene Abschrift des Interesses Rück-übertragen zu werden und PCR-verstärkt zu werden.  Sobald das Konkurrentenmolekül vorbereitet worden ist, wie in diesem Protokoll beschrieben, kann konkurrierender PCR durchgeführt werden. - [Gelesenes konkurrierendes RT-PCR: Vorbereitung des Konkurrent RNS Protokolls]

Kategorie: DNA-Protokolle: DNA, die Protokolle sequenziell ordnet

Verweisen Sie das Sequenziell ordnen von verstärktem bakteriellem und großem Einsatz geklonte Mensch oder Mausgenomic DNA über eine verbesserte PCR-gegründete Multiplexmethode. Schließt ein: Vorbereiten der Zündkapseln für MP-PCR; Verstärkung; Pcr-Produkt-Reinigung; Sequenziell ordnen. - [Gelesenes direktes Sequenziell ordnen unter Verwendung der PCR-Gegründeten Multiplexmethode]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Protokoll ist für Richtungsc$stumpfendeklonen der DNA-Fragmente.  Die Ziel DNA wird, 3 ' PCR-verstärkt - Extensionen werden mit Pfu DNA-Polymerase poliert, und das amplicon wird zu einer stumpf-beendeten Plasmid DNA verbunden.  Die Produkte der Verbindungreaktion werden benutzt, um kompetente Escherichia Coli umzuwandeln.  Ein Beschränkungsenzym wird der Verbindungreaktion hinzugefügt, um jede mögliche Selbst-religating Vektor-DNA relinearize. - [Gelesenes Richtungsklonen des PCR-Produkt-Protokolls]

Kategorie: DNAmicroarray-Protokolle

Dieses Protokoll beschreibt die Hybridation einer CY beschrifteten cDNA Prüfspitze (Mischung von Cy3 und von Cy5) auf das überzogene Plättchen, das mit PCR verstärktem cDNA beschmutzt wird. TIGR Microarray-Protokolle. - [Gelesene beschriftete Prüfspitzen-Hybridation-Prozedur]

Kategorie: Virenkultur-und Lokalisierungs-Protokolle: Virenkultur-Protokolle

5 ml die flüssigen lysates werden vorbereitet, wenn eine kleine Menge DNA von vielen Lambda-Klonen erforderlich ist. Die lysates können unter Verwendung ULs 10 - 20 eines auf lagerlysate oder des 100fach verstärkten Bakteriophagen„macroplaque“ als der Impfstoff gebildet werden. - [Gelesenes flüssiges BakteriophagenLysates Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Die Leistungsfähigkeit des direkten Klonens der PCR-Produkte kann durch das Generierung der verwendbaren Enden auf den verstärkten Fragmenten verbessert werden.  Dieses Protokoll beschreibt die Strategien für das Generierung und die Manipulierung der verwendbaren Enden auf den PCR-Fragmenten. - [Gelesenes molekulares Klonen des PCR-Produkt-Protokolls]

Kategorie: DNA-Protokolle: DNA, die Protokolle sequenziell ordnet: Große Färbungs-Protokolle

Protokoll beschreibt die Reinigung, die Quantifikation und das folgende Sequenziell ordnen der verstärkten DNA-Fragmente unter Verwendung PCR. Überschüssige Nukleotide werden von den Anfangs-PCR-Produkten unter Verwendung der gesponnenen Spalten gelöscht, und die Produkte werden unter Verwendung der Fluorometrie mengenmäßig bestimmt. - [Gelesenes inaktives Schleife-Sequenziell ordnen des PCR-Verstärkten DNA-Protokolls]

Kategorie: Betriebsbiologie-Protokolle: Anlagen-DNA-RNS Lokalisierungs-Protokolle

Eine Jobsteppextraktion für Lokalisierung von Anlagen-DNA. DNA, die für Verstärkung durch PCR verwendbar ist, kann aus Blatt materielles kleiner als 0.3 mm2 in weniger als 20 minimal u. keine Gefäßänderungen produziert werden. Methode wurde auf einigen Betriebssorten geprüft. Methode wurde gefunden, um DNA zu extrahieren, die ohne irgendeine weitere Reinigung oder Behandlung verstärkt werden könnte. Die lokalisierte DNA wurde unter Verwendung eines Universalchloroplastzündkapselsets verstärkt. Die Methode wurde validiert, indem man Größe der PCR-Produkte verglich, die unter Verwendung der Standard-DNA-Lokalisierung festgelegt werden. - [Gelesene Einlokalisierung von Anlagen-DNA verwendbar für PCR-Verstärkung]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Optimierung

Prozedur führt die Einrichtung einer Verstärkungsprozedur für Gaschromatographie-reiche Reihenfolgen einzeln auf.  Die DNA-Fragmente des Interesses werden in Anwesenheit jedes 5% DMSO, des 1 m-Betains, des 2 m-Betains, des 1 m-Betains und 5% DMSO verstärkt; 2 m-Betain und 5% DMSO; 0.4 M-Tetramethylensulfon; oder ohne irgendwelche der Vergrößerer. - [Gelesene PCR-Verstärkung des in hohem Grade Gaschromatographie-Reichen Region-Protokolls]

Kategorie: Genetik und Genomics: Genotyping Protokolle: PCR Genotyping

Unter Verwendung der molekularen Markierungstechnologie in den Untersuchungen über Betriebsgenetische Vielfalt. DNA-gegründete Technologien: PCR-gegründete Technologien verstärkte Fragmentlängenpolymorphien (AFLPs. Schließt ein: AFLP Technologie, Schritt für Schritt; DNA-Verdauung und Verbindung; PCRs und Abfragung; Zusammenstellung der Technologie. - [Gelesene PCR-Gegründete Technologien verstärkte Fragment-Längen-Polymorphien (AFLPs)]

Kategorie: Klonen-Protokolle

Protokoll beschreibt, wie man Proteinase K, um hitzebeständige Enzyme zu zerstören benutzt und verstärkte DNA in der Vorbereitung für Klonen zu reinigen. - [Gelesene Reinigung der PCR-Produkte in der Vorbereitung für Klonen-Protokoll]

Kategorie: Nukleinsäure-Reinigung-Protokolle: DNA-Lokalisierungs-Protokolle

Dieses Protokoll beschreibt, wie man Proteinase K, um hitzebeständige Enzyme zu zerstören benutzt und verstärkte DNA in der Vorbereitung für Klonen zu reinigen. - [Gelesene Reinigung der PCR-Produkte in der Vorbereitung für Klonen-Protokoll]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

In diesem Protokoll ordnet geklont im Standardbakteriophage sequenziell, oder Plasmidvektoren werden in PCRs verstärkt, welches die Zündkapseln enthält, die zu angrenzenden vektorreihenfolgen gezielt werden.  Die verstärkten Fragmente können durch Gelelektrophorese, sequenziell ordnende und/oder Beschränkungsabbilden DNA analysiert werden.  Viele Kolonien oder Plaketten können gleichzeitig geprüft werden. - [Gelesene schnelle Kennzeichnung von DNAs geklont worden im Prokaryotic vektorprotokoll]

Kategorie: Nukleinsäure-Reinigung-Protokolle

In diesem Protokoll wird Ultrafiltration durch Centricon oder Microcon Konzentratoren verwendet, um unbenutzte Zündkapseln, Zündkapseldimer und NTPs von den Vorbereitungen verstärkter DNA zu löschen. - [Gelesener Abbau von Oligonucleotides und Überfluss dNTPs von verstärkter DNA durch Ultrafiltration Protocol]

Kategorie: DNA-Protokolle: Genomic DNA-Bibliotheks-Protokolle

Das verstärkte cDNAs Enthalten funktionell 3 ' und 5 ' Spleißsites werden durch Verdauung mit BstXI ausgewählt und geklont in einen Bluescript Vektor. - [Gelesener Rück-Transcriptase-PCR für Exon-Abfangen und Verstärkung]

Kategorie: Pcr-Protokolle: Pcr-Klonen-Protokolle

Protokoll nutzt die Entdeckung aus, die RNase A am einzelnen rC oder an rU-Unterseiten leistungsfähig zerspalten kann, die in double-stranded DNA eingebettet werden.  Gesamte Plasmidvektoren werden unter Verwendung lang, high-fidelity PCR mit riboprimers verstärkt, die einen einzelnen rC Rückstand an ' Ende ihren 3 tragen.  Ziel DNA wird unter Verwendung der ähnlichen Zündkapseln verstärkt, die auch in einem rC Rückstand beenden. - [Gelesenes Ribocloning: DNA-Klonen und Gen-Aufbau unter Verwendung der PCR-Zündkapseln brachen mit einem Ribonucleotid] ab