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Übersetztes Xenopus-MOS-Kinase-Proben-in-vitroprotokoll

Übersetztes Xenopus-MOS-Kinase-Proben-in-vitroprotokoll. In Erwiderung auf Progesteron reifen unreife Xenopus Oocytes zu den Eiern, die befruchtet werden können. Die MOS-Proteinkinase ist für Oocyteentwicklung wesentlich, höchstwahrscheinlich wegen seiner Fähigkeit, die KARTEN-Kinasekaskade zu aktivieren. Diese KARTEN-Kinasekaskade führt schließlich zu die Aktivierung von Cdc2/cyclin B und Eintrag in m-Phase. In diesem Protokoll wird etikettierte MOS-Kinase in vitro übersetzt, immunopurified und benutzt in einer Kinaseprobe.

DNA-Verbindung-Protokoll

Das DNA-Verbindungprotokoll, das hier beschrieben wird, enthält die Jobstepps, die benötigt werden, um unter Verwendung der Ligaseenzym Plasmid DNA-und Einsatz DNA-Fragmente zusammen zu verbinden, zwecks ein neues Plasmid herzustellen. Dieses neue verbundene Plasmid kann nachher in kompetentes Bakterium umgewandelt werden, um DNA für Mini-, Midi zu produzieren oder Maxi-prep Lokalisierung.

' schnelle Verstärkung 3 von cDNA beendet RENNEN unter Verwendung des PCR-Protokolls

' schnelle Verstärkung 3 von cDNA beendet RENNEN unter Verwendung des PCR-Protokolls. Dieses Protokoll enthält die Jobstepps für ' schnelle Verstärkung des Endes 3 von mRNA durch PCR. Das Erststrang cDNA wird von der Gesamt- oder Poly RNS (A+) synthetisiert, indem man vom poly-Aendstück des mRNA unter Verwendung einer Oligo Zündkapsel des Adapters (Papierlösekorotron) vorbereitet. Das cDNA wird dann über PCR unter Verwendung einer Gen-spezifischen Zündkapsel und einer Adapterzündkapsel verstärkt.

Kinase-Aktivitäts-Probe des Histon-H1

Kinase-Aktivitäts-Proben-Protokoll des Histon-H1. Dieses Protokoll beschreibt, Kinaseaktivität einer mutmaßlichen Kinase unter Verwendung des Histons H1 zu prüfen als das Substrat. Histon H1 ist das kanonische Kinasesubstrat in diesem Typen der Probe. Phosphorylierung des Histons H1 wird durch die SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese festgesetzt, die von der Autoradiografie gefolgt wird.

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