Antigen-Wiederherstellung Protokolle

Protokoll gewöhnt ge$$$WESEN an für immunohistochemistry auf Paraffin-eingebetteten Kapiteln. Gegründet auf Gebrauch von Mikrowelle Energie, Antigenwiederherstellung zu bewirken. Die immunohistochemistry Prozedur, ist für Gebrauch des Installationssatzes HistoScan Biomedas, der auf einem streptavidin-peroxidase/biotinylated zweites Antikörper-Abfragung System mit 3-amino basiert, 9-ethylcarbazole (AEC) als Chromogen. Ohne Zweifel arbeiten andere Installationssätze oder selbstgemachte Reagenzien auch. - [gelesene Antigen-Wiederherstellung für Immunohistochemistry mit Paraffin-Eingebettetem Gewebe-Protokoll]

Protokoll für Antigenwiederherstellung. - [Gelesenes Antigen-Wiederherstellung Protokoll]

Einige Methoden sind "zurückholen" Antigene entwickelt worden, die durch Fixierung verdeckt worden sind. Die Grundregel hinter dem Verwenden der Mikrowellenherdmethode, die hier beschrieben wird, soll ausgedehnte Perioden der Hitze verwenden, um einige der subzellularen Strukturen zu brechen, die Antikörperzugriff blocken. Beachten Sie, daß irgendwelche der Antigenwiederherstellung Methoden wo möglich vermieden werden sollten, weil sie das artifactual falsch-positive Beflecken vorstellen können. - [gelesenes Unmasking verstecktes Epitopes mit dem Mikrowellenherd-Protokoll]

Die Grundregel hinter der Dampfkochtopfmethode, die hier beschrieben wird, soll ausgedehnte Perioden der Hitze verwenden, um einige der subzellularen Strukturen zu brechen, die Antikörperzugriff blocken. Diese Annäherung ist für das Handhaben der Probenmaterialien auf Objektträgern angebracht. Die Hauptvorteile der Dampfkochtopfmethode sind die Fähigkeit, viele Plättchen gleichzeitig zu handhaben, die Bequemlichkeit des Verwendens der Metallzahnstangen und die Vermeidung aller brenzligen Stellen, die in der Mikrowelle gefunden werden. - [gelesenes Unmasking verstecktes Epitopes mit dem Dampfkochtopf-Protokoll]

Fixierung kann epitopes verdecken. Jedoch ist es häufig Re-herausstellt sie eine leichte Ausbrütung mit Proteasen, die das Versperren der Strukturen löscht und Antikörperzugriff erlaubt, wie hier beschrieben verwendend möglich. Viele Proteasen können für diese Prozedur, einschließlich sehr grobe Vorbereitungen der Proteasen, wie Pronase benutzt werden. Jedoch erlaubt das Verwenden einer gut-gekennzeichneten Protease, wie Trypsin, eine kontrolliertere Reaktion und einen besseren Vergleich zwischen Experimenten. - [gelesenes Unmasking verstecktes Epitopes mit Protease-Protokoll]