Zellkultur-Verschmutzungs-Verhinderung-und Abbau-Protokolle

Diese Maßeinheit beschreibt, wie man bakterielle, pilzartige oder Mykoplasmaverschmutzung entdeckt und erkennt und wie man das Vorhandensein des Mykoplasmas überprüft. Strategien werden für das Beschäftigen Kulturverschmutzung, wenn notwendig beschrieben. - [Gelesene festsetzende und steuernde Mikrobenverschmutzung im Zellkultur-Protokoll]

Protokoll beschreibt eine Methode für Mykoplasmaabfragung unter Verwendung Hoechst 33258, eine Leuchtstofffärbung diese Flecke DNA. Das Beflecken des Partikel-DNA-Stoffes um den Zellenkern (auf der Zellenoberfläche oder im Zytoplasma) ist von der Mykoplasmaverschmutzung hinweisend. - [Gelesene Abfragung des Mykoplasmas in den Säugetier- Zellkulturen unter Verwendung des Fluoreszenz-Mikroskopie-Protokolls]

Eins von den wichtigsten, aber häufig übersehen, Zellkulturprozeduren ist Prüfungskulturen für Mikrobenverschmutzung, besonders Mykoplasma. Es ist kritisch für jedes Zellkulturlabor, Zellformen nur zu verwenden, die sorgfältig für Mykoplasma gerastert worden sind. Glücklicherweise gibt es eine einfache Fluorochrom DNA, die Test befleckt, der Mykoplasma und praktisch alle mögliche anderen Prokaryoteverschmutzer entdecken kann. - [Gelesene Mykoplasma-Abfragung unter Verwendung DNA, die Protokoll befleckt]

Aus den biologischen und ökonomischen Gründen ist es wichtig, mycoplasmas von den Zellkulturen zu beseitigen, die für Grundlagenforschung, Diagnose und biotechnologische Produktion verwendet werden. Die allgemein verwendetste Methode für Beseitigung, Inaktivierung oder Ausgleich von mycoplasmas in den Zellkulturen ist Behandlung mit Antibiotika. Im Allgemeinen ergeben antibiotische Therapien nicht langlebige, erfolgreiche Beseitigung. Auch die cytotoxischen Eigenschaften der Antibiotika können nicht wünschenswerte Nebenwirkungen auf Zellen verursachen. - [Gelesenes Mykoplasma-Beseitigungs-Reagens-Protokoll]

Qualität ist in allen Aspekten der Gewebekultur wichtig, da die Qualität der Materialien verwendeten d.h. Media und anderer Reagenzien) die Qualität der Kulturen und der Produkte beeinflußt, die von ihnen berechnet werden. Die Hauptbereiche der Qualitätskontrolle, die von Belang für Gewebekultur sind, sind: Die Qualität der Reagenzien und der Materialien; Die Herkunft und die Vollständigkeit der Zellformen; Die Vermeidung der Mikrobenverschmutzung. - [Gelesene Qualitätskontrolle-Erwägungen für Zellkultur]

Diese Methode ist für das Sparen der gelegentlichen Kulturen vorteilhaft, dass geworden verschmutzt. Hefe verschmutzte Kulturen sehen bewölkt aus, wenn sie etwas und Lymphozyten gerüttelt werden, nicht zusammen soviel wie Normal bündeln. Wenn Kulturen vermutlich defekt sind, kann ein Tropfen der Kultur auf einer YPD Mediaplatte gestreift werden, um auf Wachstum der Hefekolonien zu überprüfen, oder eine 5 ml-Probe kann zur Barnes-Diagnosemitte für Kennzeichen der Hefebelastung genommen werden. - [Gelesener Abbau der Hefe-Verschmutzung von Lymphoblast züchtet Protokoll]

Kein Zellkulturproblem ist so allgemeinhin wie das des Kulturverlustes wegen der Verschmutzung. Alle Zellkulturlabors und Zellkulturarbeitskräfte haben es erfahren. Kulturverschmutzer können die gesehene oder ungesehene, zerstörende oder scheinbar gutartige Chemikalie sein biologisch oder, aber in allen Fällen beeinflussen sie nachteilig den Gebrauch von Ihren Zellkulturen und die Qualität Ihrer Forschung. Verschmutzungsprobleme können in drei Kategorien unterteilt werden: Geringe Störungen, ernste Probleme, Hauptkatastrophen. - [Gelesenes verstehenund handhabenzellkultur-Verschmutzungs-Protokoll]