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Bradford-Protein-Proben-Protokolle

Bradford-Protein-Proben-Protokolle. Die Bradford-Probe ist eine einfache dennoch schnelle Methode, die im Labor angewendet wird, um die Gesamtproteinkonzentration einer biologischen Probe festzustellen. 

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Bradford-Probe


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Die Bradford-Proteinprobe basiert auf den Sichtphänomenen, die auftritt, wenn das UVlicht-Absorptionsmaximum einer säurehaltigen Lösung Coomassie des leuchtenden Blaus G-250 von 465 Nanometer bis 595 Nanometer verschiebt, wenn es zum Protein gesprungen wird.

Hydrophobe und Ioneninteraktionen können die anionischen Formulare der Färbung Bradford-Coomassie stabilisieren, die eine wahrnehmbare sichtbare Farbe erbringt, ändern.

Forschung zeigt an, dass die freie Färbung in vier verschiedenen Ionenformen existieren kann. Von den drei belasteten Formularen der Färbung, haben die kationischeren roten und grünen Formulare Absorptionsmaxima bei 470 Nanometer und 650 Nanometer, beziehungsweise. Demgegenüber hat das anionischere blaue Formular der Färbung, die an Protein bindet, ein Absorptionsmaximum bei 590 Nanometer. Zu mehr Information sehen Sie Bradford-Probe

Auch wird die Farbenänderung in der linearen Strecke der Bradford-Probe von ungefähr 5-25 mcg/mL gesehen, und folglich, mehr Protein wird gesprungen, mehr bindet dem Coomassie.

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Bradford-Protein-Proben-Referenzen



  1. Bradford, M. Eine schnelle und empfindliche Methode für die quantitative Bestimmung der Mikrogrammquantitäten Proteins die Grundregel von verwendend Protein-färben Schwergängigkeit. Anal. Biochemie. (1976) 72, 248-254.

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