DNA befleckende Protokolle für Fluß Cytometry

Die Gesellschaftsgründung von 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) wenn man DNA der Stark vermehren Zellen wiederholt, kann verwendet werden, um ihre starke Verbreitung zu messen. Dieses Protokoll erlaubt das Kennzeichen der Zellen, die BrdU durch den cytometry Fluß enthalten haben. - [gelesenes 5-Bromo-2-Deoxyuridine (BrdU) und 7-Amino-Aktinomycin (7-AAD) befleckend für Zelle starke Verbreitung Probe]

Einfache und allgemeinhin anwendbare Methoden für das Beflecken der örtlich festgelegten Zellen werden dargestellt, wie Methoden, die Reinigungsmittel und proteolytische Behandlung verwenden, permeabilize Zellen sind. Zusätzlich wird die supravital Zelle, die mit Hoechst 33342 befleckt, das hauptsächlich für das Sortieren der Phasenzellen für das folgende Züchten basiert auf DNA-Inhalt Unterschieden verwendet wird, auch beschrieben. Auch gestellt Methoden für das Beflecken der Zelle Kerne dar, die von Paraffin-eingebetteten Geweben lokalisiert werden, und Entwindung der DNA-Inhalt-Frequenz... - [gelesene Analyse des zellularen DNA Inhalts durch Fluß Cytometry Protokoll]

Dieses Protokoll stellt eine Methode für Analyse der DNA Zerteilung mit dem Fluß zur Verfügung, der nachdem es cytometry ist, des propidium Jodids (PU) der apoptotic Kerne beschriftet hat. Apoptotic Kerne beflecken kleiner als ihre normalen Gegenstücke wegen der Diffusion (Zerstäubung) der mit niedrigem Molekulargewicht Fragmente aus den Zellen und/oder der chromatin Kondensation heraus. - [gelesene Analyse der DNA Zerteilung mit Fluoreszenz des Propidium Jodid-(PU) des einzelnen Kern-Protokolls]

Dieses Protokoll stellt eine Methode für Analyse der DNA Zerteilung mit dem Fluß zur Verfügung, der nachdem es cytometry ist, des propidium Jodids (PU) der örtlich festgelegten apoptotic Zellen beschriftet hat. Der cytometry Fluß deckt apoptotic Kerne in der subdiploid Region des Zelle Schleifehistogramms... auf - [gelesene Analyse der DNA Zerteilung mit dem Propidium Jodid (PU) befleckend nach Äthanol-Fixierung-Protokoll]

Protokoll für DNA Inhalt mit Hoechst 33342 in gelösten Zellen. - [gelesener DNA Inhalt mit Hoechst 33342 in gelöstem Zellen Protokoll]

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode für quantitatives Messen von DNA mit propidium Jodid (PU) das Beflecken und Fluß cytometry. PU befleckt alle double-stranded Regionen von DNA und von RNS, indem er zwischen den gestapelten Unterseiten der doppelten Schnecke einschiebt. PU kann nicht eine intakte Zelle Membrane eindringen; folglich sind Zellen vor dem Beflecken örtlich festgelegt. Die Äthanol-örtlich festgelegten Zellen können gespeichert werden ungefärbt an 4°C für Tage oder sogar Wochen, und dann befleckt werden und analysiert werden. - [gelesenes Messen des DNA Inhalts mit dem Beflecken des Propidium Jodid-(PU) des örtlich festgelegten vollständigen Zellen Protokolls]

Protokoll für Fleck des NTS Buffer-DAPI - [gelesenes Fleck-Protokoll des NTS Buffer-DAPI]

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode für quantitatives Messen von DNA in den festen Gewebeproben entweder mit propidium Jodid (PU) oder DAPI befleckend gefolgt vom Fluß cytometry. PU kann bei 488 nm durch den Argon-Ionlaser, der am geläufigsten benutzte Laser aufgeregt werden im cytometry Fluß. Wechselweise wird DAPI gut durch einen starken UVLASER aufgeregt, der weniger geläufig vorhanden ist. - [gelesenes Propidium Jodid (PU) oder DAPI Beflecken der gelösten festen Gewebe für Fluß Cytometry Protokoll]

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode für quantitatives Messen von DNA in den Gewebekulturzellen entweder mit propidium Jodid (PU) oder DAPI befleckend gefolgt vom Fluß cytometry. PU kann bei 488 nm durch den Argon-Ionlaser, der am geläufigsten benutzte Laser aufgeregt werden im cytometry Fluß. Wechselweise wird DAPI gut durch einen starken UVLASER aufgeregt, der weniger geläufig vorhanden ist. - [gelesenes Propidium Jodid (PU) oder DAPI Beflecken der gelösten Gewebe-Kultur-Zellen für Fluß Cytometry Protokoll]

Um DNA Inhalt mit simultaner Bewahrung der Zelle Oberfläche Markierungen genau zu messen, haben wir leichte Äthanolbehandlungtechniken verwendet, die Zellen mit minimalem Verlust des Oberflächenantigenausdruckes und der Antikörper-Antigen Verbindung permeablize. Für etwas Zelle Typen kann das Vorhandensein der apoptotic Zellen, die auf verringertem DNA Inhalt basieren, auch entdeckt werden. Eine solche Technik setzt die Hinzufügung des Äthanols zu den Zellen ein, die vorher in den hohen Konzentrationen des fötalen Tierserums... erneut ausgesetzt werden - [gelesene simultane Analyse des DNA Inhalt und Oberfläche Immunophenotype Protokolls]