Westlicher Fleck

Membrane entfernendes und Re-prüfendes Protokoll - westliches Beflecken

Stipping und Re-prüfende Flecken

fügen Sie 280 μL 2-beta-mercaptoethanol pro 40 ml des entfernenden Buffers hinzu (zu einer abschließenden Konzentration von 100 Millimeter)

Waschen Sie Membrane in TBST (1 x 5 Minute)
Brüten Sie Membrane in entfernendem Buffer für 30 Minuten an 50-60°C aus (benutzen Sie einen Heizung Ofen für dieses - und halten Sie geschlossene des Ofens Tür wegen des Geruchs)
Waschen Sie in TBST (2 x 5 Minuten)
Blocken Sie Membrane für 1 h 5% in der blockenmilch
Folgen Sie normalem Protokoll für das Entwickeln der westlichen Flecken.
Membrane Entfernendes Buffer-Rezept:
Entfernender Buffer: 62.5 Millimeter Tris-HCl (pH 6.8), 2% SDS. (fügen Sie UL 280 von merceptoethanol 2-beta oder von abschließender Konzentration von 0.1 M 2-Mecaptoethanol hinzu).
Sehen Sie unser westliches befleckendes Protokoll

Andere Protein-Protokolle in unserer Protokoll-Datenbank