Lowry Protein-Probe

Protein-Ermittlung durch die Lowry Probe

Das Lowry Protein-Probeverfahren für Proteinkonzentrationsermittlung ist eine der ehrwürdigsten und am meisten benutztesten Proteinproben. Die Lowry Methode wurde zuerst 1951 von Lowry et al. beschrieben (Lowry et al., 1951).

Hydrolyse ist vermutlich die genaueste Methode der Bestimmung der Proteinkonzentration, die von der Aminosäureanalyse gefolgt wird. Die meisten anderen Methoden sind für empfindlich
Aminosäurestruktur des Proteins und absolute Konzentrationen können nicht erreicht werden. Die Lowry Prozedur ist empfindlich, und ist von Protein zu Protein gemäßigt konstant. Die Lowry Proteinschätzung ist so am meisten benutzt gewesen, dass es eine vollständig annehmbare Alternative zu einer rigorosen absoluten Ermittlung unter fast allen Umständen ist, unter denen Proteinmischungen oder grobe Auszüge beteiligt sind.

Die Methode basiert auf beiden die Biuretreaktion, in der die Peptidbindungen der Proteine mit Kupfer unter alkalischen Bedingungen reagieren, um Cu+ zu produzieren, dem mit reagiert
das Folinreagens und die Folin-Ciocalteau Reaktion, die kaum erforscht ist, aber im Wesentlichen phosphomolybdotungstate wird auf heteropolymolybdenum Blau durch die Kupfer-katalysierte Oxidation der aromatischen Aminosäuren verringert. Die Reaktionen ergeben eine starke blaue Farbe, die teils vom Tyrosin- und Tryptophangehalt abhängt. Die Methode ist empfindlicher Abstieg zu ungefähr 0.01 mg protein/mL und wird gut auf Lösungen mit Konzentrationen in der Strecke 0.01-1.0 mg/ml Protein verwendet.

Chemikalien und Substanzen, die die Lowry Probe behindern

Die Lowry Methode für Proteinkonzentrationsermittlung ist am meisten benutzt, gleichwohl abhängig von Störung durch viele Substanzen und Chemikalien sein kann.

Chemikalien, die zum interefere mit der Lowry Probe bekannt: