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PCR Beispiel- und Schablone DNA

Schablone DNA und Proben für PCR

Korrekturlinien für Schablone DNA und Proben für PCR:

PCR Proben:  Typen, Menge und Reinheit

Typen der Proben für PCR

Einzelne oder double-stranded DNA jedes möglichen Ursprung kann eine PCR Probe sein. Schablonen, die für Verstärkung benutzt werden können, enthalten Tier-, bakterielles, Betrieb oder Viren. Konvertierung der RNS-Moleküle, einschließlich Gesamt-RNS, der Poly RNS (A+), der Viren-RNS, des tRNA oder des rRNA muß vor Verstärkung auftreten, wenn sie diese wie Schablonen zu sogenannter ergänzender DNA (DNA) durch das Enzymrückseite transcriptase verwendet (entweder MuLV oder recombinant, rTth DNA Polymerase).

Menge Material für PCR

Die Ausgangsmaterialmenge, benötigt für PCR kann so wenig wie ein einzelnes Molekül sein.  Als Grundlage bis zu den nanogram Mengen DNA klonte Schablone, bis zu den Mikrogrammmengen genomic DNA, oder bis 105 DNA Zielmoleküle sind für die Ausgangs-PCR Prüfung am besten.

Reinheit der Schablone und der Probe für PCR

Reinheit der DNA Probe, die für PCR Verstärkung benutzt wird, nicht braucht, nicht hoch zu sein. Eine Einzelzelle, ein grobes Zelle lysate oder sogar eine kleine Probe der verminderten DNA Schablone ist normalerweise für erfolgreiche Verstärkung ausreichend. Die Anforderungen der Beispielreinheit müssen sein, daß das Ziel mindestens eine intakte DNA Faser enthält, welche die verstärkte Region umgibt und daß die Verunreinigungen, die mit dem Ziel verbunden sind, verdünnt sind, um Enzymaktivität nicht zu hemmen. Seien Sie das, wie es, für einige Verstärkungen, wie langes PCR kann, es kann notwendig sein, um die Qualität und die Quantität der DNA Probe zu betrachten. Z.B.: 1. Wenn mehr Schablone Moleküle vorhanden sind, gibt es weniger Auftreten der falschen Positive, die entweder durch Querkontamination zwischen Proben oder Übertrag- “Verschmutzung” von den vorhergehenden PCR Verstärkungen verursacht werden.

2. Wenn die PCR Verstärkungen Besonderheit oder Leistungsfähigkeit ermangelt oder wenn die Zielreihenfolgen begrenzt sind, gibt es eine grössere Wahrscheinlichkeit des unzulänglichen Produktergebnisses.

3. Wenn der Bruch des Beginnens von von DNA vorhanden für PCR unsicher ist, ist es in zunehmendem Maße schwierig, den Ziel DNA Inhalt festzustellen.