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Inaktive Indikatoren & Abfragung Methoden

Inaktive Methoden der Abfragung

Der enorme Vorteil der Radioindikatoren ist ihre Empfindlichkeit, aber jetzt rivalisieren inaktive Indikatoren mit der Empfindlichkeit von ihrem radioaktiven abläßt. Dieser kann ein bedeutender Vorteil sein, weil radioaktive Substanzen ein mögliches Gesundheitsrisiko aufwerfen und muß sehr sorgfältig gehandhabt werden.  Ausserdem erstellen Radioindikatoren radioaktiven Abfall, und Beseitigung von solchem Abfall ist in zunehmendem Maße schwierig und kostspielig.  Wie kann ein inaktiver Indikator mit der Empfindlichkeit von einem radioaktiven konkurrieren?  Die Antwort ist, indem sie den Multiplikatoreffekt eines Enzyms verwendet.  Das heißt, wenn wir ein Enzym zu einer Prüfspitze verbinden können, die das Molekül entdeckt, das, wir innen interessiert sind, produziert das Enzym viele Moleküle des Produktes und so verstärkt das Signal.  Dieses bearbeitet besonders wohles, wenn das Produkt des Enzyms ist chemiluminescent (helles Ausstrahlen), weil jedes Molekül viele Photonen ausstrahlt und wieder das Signal verstärkt.  Das Licht kann durch Autoradiographie mit Röntgenstrahlfilm oder durch ein phosphorimager entdeckt werden.
Wenn wir die Unkosten eines phosphorimager oder Röntgenstrahlfilmes vermeiden möchten, können wir Enzymsubstrate benutzen, die Farbe ändern, anstatt, chemiluminescent zu werden.  Diese chromogenen Substrate produzieren die farbigen Bänder, die dem Standort des Enzyms und folglich dem Standort des Moleküls entsprechen, das wir versuchen zu entdecken.  Die Intensität der Farbe hängt direkt mit der Menge unseres Moleküls des Interesses zusammen, also ist dieses eine quantitative Methode.