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Nährboden-Platten Bakterielle Kultur

Informationen über das Wachstum der bakteriellen Kulturen mit Nährboden-Kultur-Platten

Inhaltsverzeichnis:

Nährboden-Platte und Fehler suchende Nährboden-Media und Forum-Themen

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Was ist Nährboden - Definition?

Nährboden oder Agar-Agar (von einer malaysischen Wortbedeutung "Gemüse"), die Substanz, die benutzt wird, wenn man eine Art fester Kulturmedium für bakteriologische Arbeit vorbereitet, ist ein Proluftschacht, der aus den verschiedenen Meerespflanzen vorbereitet wird, die nahe dem indischen Ozean und im chinesischen und japanischen Wasser gefunden werden. Dieser Typ der Meerespflanze hat einige geläufige Namen, als Ceylon oder Jaffna Moos, Bengal Fischleim, usw.. Verschiedene Sorten werden für Nahrung verwendet und der Handel ist beträchtlich.

Hintergrund und Geschichte auf Mikrobiologie mit Nährboden-Nährsuppe und Platten

Payen, ein französisches Chemiker -(about 1859), erhielt das Nährbodengelee von der Meerespflanze, Gelidium corneum, in der folgenden Weise: Die Meerespflanze wurde während einiger Zeit in einer kalten verdünnten Lösung der Salzsäure stehen lassen; die Säure wurde durch das Ausspülen von von mehrmals mit Wasser gelöscht, dann wurde die Meerespflanze in eine kalte verdünnte Lösung des Ammoniaks gelegt; zunächst wurde das Ammoniak durch das wiederholte Ausspülen mit kaltem Wasser gelöscht. Während dieses Prozesses verlor die Meerespflanze 53% seines Gewichts in den Mineralsalzen, in färbenstoff und in den organischen Bestandteilen. Der restliche Teil wurde im Wasser gekocht, während dessen Prozesses das Gemüsegelee extrahiert wurde. Die Lösung also erreicht wurde weg gegossen und nach verließ das unbrauchbare Sediment. Dieses Gelee ist dasselbe im Aufbau wie, der, existierend in den Gemüsegeweben; es ist nicht chemisch geändert worden, wie Kollagen in der Vorbereitung von Gelatin ist. Der kommerzielle Nährboden wird vermutlich vorbereitet, indem man trocken diese Lösung mit unterschiedlichen Mitteln verdunstet.

Nährboden kommt normalerweise in die Hände des bacteriologist als lang, schlanke, graulich-weiße Streifen oder als Blöcke oder besonders in den letzten Jahren, in Form eines grau-weißen Kriegsgefangen der der europäischen Herstellung.

Nährboden, im Gegensatz zu Gelatin, ist ein Kohlenhydrat, d.h. besteht er aus einer Kombination nur des Carbons, des Wasserstoffs und des Sauerstoffes. Spuren des Stickstoffes sind als Verunreinigungen anwesend. Die oben genannten qualitativen Ermittlungen seiner grundlegenden constit uents wurden von Payen, von Parumbaru und von Hueppe gebildet, der ihre Ermittlungen auf Nährboden von den unterschiedlichen Quellen bildete. Insoweit ermittelt werden kann, ist seine empirische Formel nicht noch in irgendeinem Umfang nachgeforscht worden.

Wie Gelatin jedoch ist Nährboden ein umschaltbares Kolloid. Er tränkt oben im kalten Wasser, nach einem langen Kochen löst sich im Heißwasser, zu einer geschmacklosen und geruchlosen freien Lösung und in den festen ifies nach mehr abkühlen zu oder zu weniger undurchlässigem Gelee auf. Seine wäßrige Lösung ist Null- oder fast Neutrales zum Phenolphthalein; noch ist- ein Tropfen oder zwei des zwanzigsten normalen Natriumhydrats genügend, die rosafarbene Farbe wahrnehmbar zu bilden.

Die kolloidalen Eigenschaften des Nährbodens werden nicht durch eine lang-fortgesetzte Heizung an einer Hochtemperatur noch durch die Tätigkeit der gewöhnlichen Mikroorganismen zerstört, wie die von Gelatin sind. Die oben genannten Eigenschaften jedoch werden beeinflußt und können durch die Reaktion der Flüssigkeit insgesamt gehindert werden, in der der Nährboden aufgelöst wird.

Die Reaktion der Flüssigkeit d.h. ob sie sauer oder alkalisch ist, beeinflußt den Nährboden hinsichtlich seiner Löslichkeit, Dichte, Farbe, Transparentes, Filtrierbarkeit und Menge condensa tion Wassers. Wenn Nährboden in einer Flüssigkeit einer Säure aufgelöst wird, die mit 0.1% HC1 gleichwertig ist, löst sich der Nährboden sehr betriebsbereit, filtert schnell, das resultierende Filtrat auf, das eine hellgelbe, transparente, glatte, wäßrige Lösung ist, die sich nicht nach dem Abkühlen verfestigt. Wenn ein kleinerer Prozentsatz der chloric hydrosäure verwendet wird, tritt Verfestigung auf (unter 40 C.) aber das Gelee nicht "steht oben" und ist folglich für Nährbodenschräge- oder -plattenkulturen unbrauchbar. Eine große Menge betrügerisches densation Wasser ist auch anwesend.

Wenn Nährboden in einer schwachen alkalischen oder Nullsuppe aufgelöst wird, ist eine starke, rötlichbraune, zähflüssige Flüssigkeit erreichtes, das langsam filtert und sich schnell bei 40 C., zu einem sehr festen, undurchlässigen, trockenen Gelee verfestigt, Haben aber wenig Kondensationwasser; sie behält seine Form gut in den Schrägen und in den Platten bei. So wird der Wert des Nährbodens als fester Kulturmedium entsprechend dem cjegree der Alkalinität oder der Säure angehoben oder gesenkt.

Es muß zusätzlich beachtet werden jedoch daß, wenn einmal die verfestigende Eigenschaft des Nährbodens durch das Vorhandensein eines Überflußes der Säure in seiner Lösung zerstört wird, diese Eigenschaft nie durch Neutralisation mit Alkali wiedergewonnen werden kann; die Säure pro manently zerstört die Umkehrbarkeit des Kolloids.

Der Schmelzpunkt des Nährbodens (von 1.5% in der Nulllösung) ist 97 C. und obgleich sein verfestigender Punkt bei 40 C. ist, wenn, sobald er sich es verfestigt hat, oben im Thermostat bei einer Temperatur von 50 C steht. Für bakteriologische Zwecke nur dieses Formular des Nährbodens kann benutzt werden, der an von 38 bis 40 C. Agar flüssig bleibt, der nur bei einer Temperatur über diesem Punkt würde sein zu heiß wenn in einem flüssigen Zustand für Gebrauch flüssig bleibt; die Vitalität der eingeführten organismen würde durch die Hochtemperatur gehindert oder zerstört.

Vorteile und Nachteile als Nährboden als Nährmedia

Schwierigkeiten werden in der Vorbereitung eines festen Kulturmediums vom Nährboden angetroffen, wegen seiner langsamen Löslichkeit, Viskosität und konsequenten langsamen Filtrierbarkeit. Seine Lösung (Verdauung) wird bewirkt, wie über, durch eine lange Heizung in einem Wasserbad, in einem Dampfsterilisator, in einem autoclav oder in einem Überschuß erwähnt eine freie Flamme. Die Zeitspanne benötigt für komplette Verdauung hängt nach drei Sachen ab: Die Reaktion der Flüssigkeit, in der der Nährboden aufgelöst wird, der Prozentinhalt des Nährbodens und die Methode des Auflösens. Der Einfluß der Reaktion der Nährbodenlösungen ist oben behandelt worden. Für allgemeinen Kulturgebrauch jedoch wird gewöhnlicher Nährboden natürlichere Größe +15 gebildet (Nährboden verfestigt sich mit Schwierigkeit über natürlicherer Größe +30).

Der ein-Prozent-Nährboden ist viel leicht Lösliches unter gleichen Bedingungen als ein höheres Prozent. Ein und ein halbes Prozent ist die Menge, die in den gewöhnlichen Nährbodenmedia verwendet wird und gibt ein ein wenig steiferes und folglich wünschenswerteres Gelee.

Nährboden wird schnell über einer freien Flamme verdaut. Wenn es genug, nicht nach der Filtration und der Sterilisation des Nährbodens durch die zeitweilige Methode erhitzt wird, erscheint ein flockiges precip itate häufig im vorher freien Medium. Dieses kann gebildet werden, um in den meisten Fällen zu verschwinden, indem man der Temperatur des autoclav unterwirft (120 C. 15 Ibs.).

Nährboden für Kulturmedia sollte völlig frei sein wenn Flüssigkeit, und homogen undurchlässig-lichtdurchlässig wenn Körper; er sollte ein translucence haben, das genügend ist, tiefe Kolonien auf den betriebsbereit beobachtet zu werden Platten oder Stabkulturen zu erlauben,; er sollte nicht flockiges Material, Sediment oder Stücke Baumwolle oder Filterpapier enthalten, wie diese typische Kolonieentwicklung der Mikroorganismen und, zum unerfahrenen hindern, einige Male für Kolonien verwechselt werden können.

In den ersten Methoden, die überhaupt für das Bilden von von Nährbodenkulturmedia, anstatt den, heißen Nährboden durch Filterpapier, saugfähige Baumwolle oder Asbest zu filtern verwendet wurden, wurde er abkühlen gelassen, während dessen Prozesses das Sediment vereinbart zur Unterseite; als Körper das Sediment abgeschnitten wurde. Diese Methode war nicht wünschenswert, da die Klarheit des resultierenden Nährbodens nach der Kinetik des Abkühlens abhängen würde; das langsamer das Abkühlen, vollständig würden Sedimentbildung stattfinden.

 

Nährboden ist nicht eine Nahrung für Mikroorganismen im allgemeinen, d.h. wird er nicht durch die verdauungsfördernden Enzyme des meisten Bakteriums beeinflußt, wie Gelatin ist. Jedoch bekannt einig Bakterium, die die Energie des verflüssigenden Nährbodens haben, unter der B. gelaticus n. SP. (gran) und Bad. Nenckii sind, von denen beide gefunden werden, wie würde erwartet, im Meereswasser. Diese compara tive Untätigkeit des Nährbodens macht es wertvoll für die Vorbereitung, der festen synthetischen Media, dessen Wert en sein kann hanced, indem er den kommerziellen Nährboden natürlicher Gärung unterwirft während, welches Prozesses alle mögliche Spuren der fähigen substanzen des Nutzens Nahrungsmitteloben durch die vorhandenen Mikroorganismen verwendet werden. (Beijerinck.)

Nährboden ist vom speziellen Gebrauch in der bakteriologischen Arbeit, in der die Bearbeitung der Mikroorganismen bei einer Temperatur über dem Schmelzpunkt von Gelatin geleitet werden muß. Dieses Merkmal hat die großen Fortschr1tte, die in der medizinischen Bakteriologie genommen worden sind, bis zu pathogenes Bakterium kann nur mit Schwierigkeit an den tempera tures unter dem des Körpers lokalisiert werden und gewachsen werden ermöglicht.

 

 

ÜBUNG 9. VORBEREITUNG DES NÄHRNÄHRBODENS

Apparat. 3.5 Liter Achat-Waren Eimer; 15 gms. Nährboden; 10 gms. Pepton; 5 gms. Salz; 10 gms. Eialbumen (oder ein Ei); 500 c.c. sterile Fleischinfusion; 500 c.c. Hahnwasser; Titrierungapparat; NacOh N/20; N/l NacOh; Phenolphthalein (Anzeige); destilliertes Wasser; großer Trichter; geflochtenes Filterpapier; füllender Trichter; sterile Reagenzgläser; sterile Literflasche; grobe Balancen; großer Gasbrenner; 1-Liter-messendes Cup; Apparat für Dampfsterilisation.

Methode. 1. Ein 3-Liter-Achatwareeimer-Platz 15 in den gms. Vom Nährboden in 500 c.c. vom Hahnwasser.

2. Waschen Sie den Nährboden gut und die Fetzen und das squeez ing es durch die Hände trennen.

3. Füllen Sie das schmutzige Wasser ab und die gegossene Menge messen

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ALLGEMEINE MIKROBIOLOGIE

weg von; ersetzen Sie mit der gleichen Menge des sauberen Hahnwassers.

Wiederholen Sie.

4. Lösen Sie sich über einer freien Flamme und einem Blutgeschwür für fünf Minuten auf und ständig rühren. Das solu tion muß von den Klumpen des Nährbodens völlig frei sein.

5. Fügen Sie 1% Wittes das Pepton und 0.5% Salz dem kochenden Nährboden hinzu.

6. Zu 500 c.c. vom Fleisch im Schmelzverfahren fügen Sie 10 gms hinzu. Vom Eial bumen, das gut mit 100 c.c gemischt worden ist. vom Hahnwasser. (gesetzt dem Eialbumen in eine Trommel und fügen Sie genügend Wasser hinzu, um eine Paste zu bilden. Rühren Sie sich bis glattes und fügen Sie dann das bleiben ing Wasser hinzu. Ein Ei; Vertiefung geschlagen,

Fig. 9. Heißwasser-Trichter für kann ersetzt werden.) Mischen Sie allen filternnährboden oder Gelatin. Gänzlich

7. Gießen Sie die geschmolzene Nährbodenmischung langsam in die Fleischinfusion und ständig rühren. Hitze im autoclav bei 120 C. für forty-five Minuten oder eine Stunde lang in flüssigem Dampf.

Anmerkung. Die Zeit für diese Heizung kann zum Vorteil verlängert werden, aber nie verkürzt werden. Wenn Nährboden nicht genug vor Filtration erhitzt worden ist, bildet sich ein flockiger Niederschlag in den Gefäßen nach der Heizung in flüssigem Dampf. In den meisten Fällen kann dieses veranlassen werden, um zu verschwinden, indem man für kurze Zeit im autoclav bei 15 Ibs erhitzt.

8. Titrieren Sie mit NacOh N/20.

9. Justieren Sie die Reaktion des Mediums bis +15 mit normalem NacOh oder normalem HC1. Retitrate und regulieren die Reaktion wenn notwendig nach.

10. Counterpoise und beachten das Gewicht.

11. Kochen Sie fünfzehn Minuten über einer freien Flamme und gegen stantly rühren,

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12. Counterpoise und bilden Sie jeden möglichen Verlust im Gewicht mit kochendem destilliertem Wasser.

13. Filtern Sie das kochende heiße durchgehende geflochtene Filterpapier gerade vorher gewaschen mit kochendem Wasser. Führen Sie das Filtrat durch das gleiche Papier, bis frei.

14. Reagenzgläser der Fülle 60 bis 70 sterile mit ungefähr 8 c.c. vom Medium für jedes Gefäß.

15. Erhitzen Sie in flüssigem Dampf Zwanzig Minuten an drei suc cessive Tagen.

16. Am Ende der abschließenden Heizung, legen Sie die Gefäße des Nährbodens in eine geneigte Position, um sich zu verfestigen (lassen Sie den Medium den Stecker nicht berühren), damit eine große Oberfläche sented vor für die Bearbeitung der Mikroorganismen ist. Diese werden Nährbodenschrägen genannt.

Anmerkung. Wenn Nährbodengefäße nur für Nährbodenschrägen verwendet werden sollen, wird kleiner des Mediums im Gefäß als benötigt, wenn sie für Überzug verwendet werden sollen.

17. Eine große Flasche Nährboden entkeimen, Hitze für dreißig Minuten an vier aufeinanderfolgenden Tagen.

 

 

 

Referenzen für Nährboden-bakterielle Kultur

SMITH, ERWIN F.: Bakterium in Beziehung zu Betriebskrankheiten. Vol.. I,

pp. 31-36. Einige Abbildungen. SCHULTZ, N. K.: Zur Frage von Der Bereitung einiger Nahrsubstrate.

Cent. F. Bakt. I. Orig., Bd. 10, 1891, P. 57.