Fixierung

Fixiermittel und Konservierungsmittel werden benutzt, um Gewebe für ihre Studie zu konservieren. Geläufige Fixiermittel wie gepuffertes Nullformalin (10% Formaldehyd in phosphatgepuffertem salzigem (PBS)) werden auch verwendet, um die Strukturen der Zelle und die Zellenorganellen zu studieren, die in den einzelnen Zellen gefunden werden (z.B., Kern, rauer Endoplasmanetzmagen und Mitochondrien). Die Gewebe müssen erste in einem Fixiermittel mechanisch und biochemisch zu stabilisieren. Es ist wichtig, der Ansicht zu sein, dass ein Fixiermittel nicht zu seiner Zufuhr zu giftig sein sollte und es das Gewebe nicht beschädigen sollte, das konserviert wird.

Fixierung-Inhaltsverzeichnis

Einleitung in eine Gewebe-Fixierung und Gewebelehre

Wenn ein Gewebe von einer lebenden Bedingung gelöscht wird, werden einige Änderungen in seinen Zellen initialisiert. Bakterium fängt zu mtiltiply an und zerstört sie. Auch Autolyse (Selbst-verdauung), eine Zerstörung oder eine Auflösung der Zellen durch enthaltene Enzyme, setzt ein. Die Enzyme scheinen, ihre Tätigkeit aufzuheben; anstatt, Aminosäuren in Zellenproteine zu synthetisieren an, fangen sie, Proteine in Aminosäuren aufzuspalten. Diese Aminosäuren diffundieren aus den Zellen heraus und da ein Re sult Proteine nicht mehr durch chemische Reagenzien gerinnbar sind. Die oben genannten Änderungen führen zu so genannte Postmortembedingungen. Zwecks der Laborberedsamkeitprüfung ist- es notwendig, das Gewebe zu behandeln, um diese Postmortemeffekte zu verhindern; es ist auch notwendig, die Zellenteile in Materialien zu konvertieren, die während der Nachbehandlung unlöslich bleiben, und die Zellen vor Verzerrung und Schrumpfung zu schützen, wenn es Flüssigkeiten wie Spiritus und heißem Paraffin unterworfen wird. Weitere wichtige Lernziele der Gewebevorbereitung sind, das befleckende Potenzial der Gewebeteile zu verbessern und ihre Brechungskoeffizienten in Richtung zu verbesserter Sicht zu ändern. Die Prozedur, die verwendet wird, um den oben genannten Anforderungen zu genügen, wird Fixierung genannt und die Flüssigkeiten werden Fixiermittel oder Festlegunglösungen genannt. Festlegunglösungen sollten den folgenden allgemeinen Zielsetzungen entsprechen:

Fixierung-Zweck:

Der Zweck Fixierung ist:

1. Dringen Sie schnell ein, um Postmortemänderungen zu verhindern.
2. Gerinnen Sie Zelleninhalt in unlösliche Substanzen.
3. Schützen Sie Gewebe gegen Schrumpfung und Verzerrung während der Dehydratisierung und einbetten und unterteilen.
4. Lassen Sie Zellenteile mittels der Färbungen und der verbesserten Brechungskoeffizienten selektiv und deutlich sichtbar werden.

Fixiermittel

In einigen Fällen kann das Fixiermittel einen beizenden (unlöslich kombinierend) Effekt auf das Gewebe haben, dadurch zusammen esholt esholt die zwei in eine befleckende Tätigkeit und miteinander unterstützt in das Zubehör der Färbungen und der Proteine.

Gewebe müssen in Fixiermittel nach Tod so bald wie möglich gelegt werden. Wenn jedoch Verzögerung, sie gelegt in einen Kühlraum unvermeidbar ist, Autolyse, und Zerfall auf ein Minimum bis das fixa so zu beschränken, das tive ist, angewandt sein kann. Eine einzelne Chemikalie besitzt selten alle erforderlichen Qualitäten eines guten Fixiermittels; eine Festlegunglösung folglich besteht selten aus nur einer Chemikalie. Eine vertraute Ausnahme ist Formalin. Andere zuverlässige Fixiermittel legen tain eine oder mehrere Chemikalien herein, um die Proteine der Zellen zu gerinnen, und eine oder mehrere Chemikalien, zum der Proteine unlöslich zu machen ohne actu verbinden die Gerinnung sie.

Gerinnungsmittelfixiermittel ändern das spongework der Proteine in Ineinander greifen, durch die Paraffin leicht überschreiten kann, so Formular ing ein Gewebe der korrekten Übereinstimmung für die Einteilung. Zusätzlich wird das Protein Gestänge durch Gerinnungsmittel gegen die Aufgliederung während der neueren Prozeduren verstärkt. Jedoch Gerinnungsmittel alleine benutzt haben Sie disadvan tages dadurch, dass sie ein zu grobes Netz für das beste cytologische Detail bilden können. Auch Koagulation neigt, die Anordnung der künstlichen Strukturen (Kunstprodukte) zu verursachen. Noncoagulant Fixiermittel produzieren wenige Kunstprodukte aber, wenn sie alleine verwendet werden, haben den Nachteil des Gebens dem Gewebe eines armen Betrug sistency für die Einbettung.

Es folgt folglich, dass die ideale Festlegungflüssigkeit eine Kombination einer oder mehrerer Proteingerinnungsmittel und einer oder mehrerer nicht Gerinnungsmittel ist. Die leistungsfähigsten Lösungen sind von dieser Natur, und kombinieren, wenn möglich alle Typen Tätigkeit. Dieses schließt die aus, die für die Fixierung irgendeines spezifischen Zellenbestandteils, wie Chromosomen, Glycogen, Mitochondrien bestimmt sind.

Fixierung-Protokolle

Weil sie Bestandteile enthalten, die nach einander fungieren, sind viele Mischungen wenn gebildetes frisches am leistungsfähigsten.

Jedoch können die Einzelteile als auf lagerlösungen normalerweise gebildet werden und zusammen unmittelbar vor Gebrauch gemischt werden. Unter den häufig benutzten Chemikalien sind Formularaldehyde, Äthylalkohol, Essigsäure, picric Säure, Kaliumbichromat, Quecksilber- Chlorverbindung, Chromsäure und Osmium Tetroxide.

Da jede Chemikalie sein eigenes Set Vorteile und Nachteile besitzt, sollte jeder Lösungsbestandteil, wann immer möglich, einen Defekt in irgendeinem anderem Bestandteil zu entschädigen. Z.B. im Falle des am meisten benutzten Fixiermittels, Bouins Lösung: 1. Formaldehyd repariert den Zytoplasma aber, derart dass er Paraffindurchgriff verzögert. Er repariert Chromatin schlecht und bildet Zytoplasma basiphilic. 2. Picric Säure gerinnt cyto Plasma, damit sie Paraffin zulässt, das Gewebe weich verlässt, Chromatin repariert und den Zytoplasma acidophil bildet, aber sie Farbenreinheit Chemikalien allgemein verwendet im acidophilen Zinn der Festlegung-Lösungen 5 schrumpft und bildet. 3. Essigsäure entschädigt beide letzten Defekte. Keine harte und schnelle Richtlinie existiert hinsichtlich der Wahl eines Fixiermittels; gen wirklich Auswahl wird nach dem Typen der Untersuchung festgestellt.

Wenn es irgendeine Frage hinsichtlich der Zukunftspläne für ein Gewebe gibt, ist Formalin eine sichere Wahl; es ermöglicht Sekundär- oder Pfostenfixierung. Einige Vorschläge können enthalten sein. Wenn Gesamtanatomie des tisstie zufrieden stellend ist, können die rotitine Fixiermittel benutzt werden: Formalin, Siisa, Zenker, Helly oder Bouin. Spezielle Fixiermittel für Zelle inckisions sind Carnoy, Flemming, Champy, Helly, Schaudinn, Regand und andere. Für Histochemie wird der Forscher auf Formalin, Azeton oder Äthylalkohol begrenzt. Die meisten Festlegunglösungen werden nach der Person benannt, die sie entsteht; Zenker und Bouin sind Beispiele. Wenn der gleiche Mann mehr als eine Kombination der Chemikalien entstand, sind zusätzliche Mittel der Kennzeichnung sie verwendet worden. Flemmings schwache und starke Lösungen, Allens B3, Ely Serie, Flüssigkeit etc.-Susa wurden von Heidenhain nach den ersten zwei Zeichen von zwei Wörtern benannt: sublimieren Sie und saute.