Fluss Cytometry

Der Fluss, der cytometry ist (auch benannt FCM) ist eine Molekularbiologiemethode, die allgemein verwendet ist zu zählen, schnell überprüft, die analysiert und Sortierungzellen oder sogar mikroskopische Partikel, die in der Flüssigkeit verschoben werden. Fluss cytometers erlauben eine simultane multiparametric Analyse der körperlichen und/oder chemischen Eigenschaften der Einzelzellen oder der Partikel, die hinter einen optischen und/oder elektronischen Abfragungsapparat, in einen flüssigen Strom unter Verwendung eines Lichtstrahls des Laserlichts fließen.

Der Ausdruck, der cytometry ist, berechnet von den griechischen Wörtern für das Messen (metry), und von der Zelle (cyto) „dem cytometry Fluss“ das Messen der Einzelzellen gebend, während sie hinter einen Detektor fließen.

Fluss oder das Zellensortieren ist eine weitere Funktionsfähigkeit des Flusses cytometry, die Trennung der Typen der Zellen durch den Gebrauch von elektrischen oder mechanischen Kräften erlaubend, Bevölkerungen der Zellen mit einer oder mehrerer körperlichen oder Chemikalieneigenschaft zu sammeln, die vom Benutzer eingestellt wird.

Der Fluss, der cytometry ist, ist in der Analyse der Zellenschleife, der Abfragung und der Analyse von apoptosis oder Nekrose, des Zellensortierens, Zellender oberflächenantigenabfragung für Immunitätsforschung und der Stammzelleanalyse allgemein verwendet.

Fluss Cytometry Messen

Fluss Cytomers kann verwendet werden, um die folgenden Parameter, abhängig von der Maschine, fluorophore und anderer zu messen:

• Datenträger Zellen
• morphologische Eigenschaften der Zellen
• Zellenoberflächenantigene (Block (der CD) Markierungen) der Unterscheidung
• Abfragung der Zellenpigmente (d.h. Chlorophyll oder Phykoerythrin)
• apoptosis (Quantifikation, Messen der DNA-Verminderung, mitochondrisches Membranenpotential, Permeabilitätsänderungen, caspase Aktivität)
• Zellenentwicklungsfähigkeitproben
• setzen Sie DNA fest (z.B. in der Zellenschleifeanalyse, in der Zellenkinetik, in der starken Verbreitung)
• setzen Sie RNS fest
• chromosomale Analyse und Sortieren (für DNA-Bibliotheksaufbau oder Chromosomanstrich)
• setzen Sie für Proteinausdruck und -lokalisation fest
• transgenic Produkte in vivo, besonders das grüne Leuchtstoffprotein oder die in Verbindung gestandenen Leuchtstoffproteine
• enzymatische Aktivität
• und viele anderen Parameter

Wie Fluss Cytometers Arbeit?

Ein Lichtstrahl (normalerweise Laserlicht) einer einzelnen Wellenlänge wird auf einen hydrodynamisch fokussierten Strom der Flüssigkeit verwiesen. Einige Detektoren werden der Punkt angestrebt, wo der Strom durch den Lichtstrahl überschreitet; ein in Übereinstimmung mit dem Lichtstrahl (Vorwärtsstreuung oder FSC) und einiges Senkrechtes zu ihm (seitliche Streuung (SSC) und eine oder mehrere Leuchtstoffdetektoren). Jedes Schwebeteilchen, das durch den Lichtstrahl überschreitet, streut das Licht auf gewisse Weise, und die Leuchtstoffchemikalien, die im Partikel gefunden werden oder zum Partikel angebracht sind, können in das Ausstrahlen des Lichtes bei einer niedrigeren Frequenz als die Lichtquelle aufgeregt sein. Diese Kombination des gestreuten und Leuchtstofflichtes wird durch die Detektoren aufgehoben, und indem man Fluktuationen in der Helligkeit an jedem Detektor (einer für jede Leuchtstoffemissionspitze) es ist dann möglich, um verschiedene Typen der Informationen über die körperliche und chemische Struktur jedes einzelnen Partikels zu extrapolieren analysiert. FSC bezieht mit dem Zellendatenträger aufeinander und SSC hängt von der inneren Kompliziertheit des Partikels ab (d.h. Form des Kernes, der Menge und des Typen der zellplasmatischen Körnchen oder der Membranenrauheit). Einige fließen cytometers auf dem Markt haben beseitigt die Notwendigkeit an der Fluoreszenz und benutzen nur helle Streuung für Messen. Anderes fließen cytometers Formularbilder der Fluoreszenz jeder Zelle, des gestreuten Lichtes und des übertragenen Lichtes.