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Fluß Cytometry

Am cytometry Fluß, finden Sie Hintergrundinformationen und Artikel auf der cytometry Methode des Flusses, den ausführlichen Protokollen, bioinformatic den Analyse Hilfsmitteln und einem cytometry Forum des Flusses für alle Ihre Zelle Biologieforschung Fragen und Diskussionen.

Fluß Cytometry Hintergrund

Der Fluß, der cytometry ist (auch benannt FCM) ist eine molekulare Biologiemethode, die geläufig verwendet wird, um zu zählen, schnell überprüft, die analysiert und Sortierungzellen oder sogar mikroskopische Partikel, die in der Flüssigkeit verschoben werden. Fluß cytometers erlauben eine simultane multiparametric Analyse der körperlichen und/oder chemischen Eigenschaften der Einzelzellen oder der Partikel, die hinter einen optischen und/oder elektronischen Abfragung Apparat, in einen flüssigen Strom mit einem Lichtstrahl des Laserlichts fließen.

Die Bezeichnung, die cytometry ist, berechnet von den griechischen Wörtern für das Messen (metry), und von der Zelle (cyto)"dem cytometry Fluß" das Messen der Einzelzellen gebend, während sie hinter einen Detektor fließen.

Fluß oder Zelle das Sortieren ist eine weitere Funktionsfähigkeit des Flusses cytometry, die Trennung der Typen der Zellen durch den Gebrauch von elektrischen oder mechanischen Kräften erlaubend, Bevölkerungen der Zellen mit einer oder mehr körperlichen oder Chemikalieeigenschaft zu sammeln, die vom Benutzer eingestellt wird.

Fluß Cytometry Anwendungen

Der cytometry Fluß wird geläufig in der Analyse der Zelle Schleife, der Abfragung und der Analyse von apoptosis oder Nekrose, Zelle des Sortierens, Zelle der Oberflächenantigenabfragung für Immunitätsforschung und der Stammzelleanalyse verwendet.

Fluß Cytometry Messen

Fluß Cytomers kann verwendet werden, um die folgenden Parameter, abhängig von der Maschine, dem fluorophore und dem anderen zu messen:

• Datenträger Zellen
• morphologische Eigenschaften der Zellen
• Zelle Oberflächenantigene (Block Unterscheidung (CD) der Markierungen)
• Abfragung der Zelle Pigmente (d.h. Chlorophyll oder Phykoerythrin)
• apoptosis (Quantifikation, Messen der DNA Verminderung, mitochondrisches Membrane Potential, Permeabilität Änderungen, caspase Aktivität)
• Zelle Entwicklungsfähigkeitproben
• setzen Sie DNA fest (z.B. in der Zelle Schleifeanalyse, in der Zelle Kinetik, in der starken Verbreitung)
• setzen Sie RNS fest
• chromosomale Analyse und Sortieren (für DNA Bibliothekaufbau oder Chromosomanstrich)
• setzen Sie für Proteinausdruck und -lokalisation fest
• transgenic Produkte in vivo, besonders das grüne Leuchtstoffprotein oder die in Verbindung gestandenen Leuchtstoffproteine
• enzymatische Aktivität
• und viele andere Parameter

Wie Fluß Cytometers Arbeit?

Ein Lichtstrahl (normalerweise Laserlicht) einer einzelnen Wellenlänge wird auf einen hydrodynamisch fokussierten Strom der Flüssigkeit verwiesen. Eine Anzahl von Detektoren werden der Punkt angestrebt, wo der Strom durch den Lichtstrahl überschreitet; ein in Übereinstimmung mit dem Lichtstrahl (Vorwärtsstreuung oder FSC) und einiges Senkrechtes zu ihm (seitliche Streuung (SSC) und ein oder mehr Leuchtstoffdetektoren). Jeder verschobene Partikel, der durch den Lichtstrahl überschreitet, zerstreut das Licht auf gewisse Weise, und die Leuchtstoffchemikalien, die im Partikel gefunden werden oder zum Partikel angebracht sind, können in das Ausstrahlen des Lichtes bei einer niedrigeren Frequenz als die Lichtquelle aufgeregt werden. Diese Kombination des zerstreuten und Leuchtstofflichtes wird durch die Detektoren aufgehoben, und indem man Fluktuationen in der Helligkeit an jedem Detektor (einer für jede Leuchtstoffemissionspitze) es ist dann möglich, um verschiedene Typen der Informationen über die körperliche und chemische Struktur jedes einzelnen Partikels zu extrapolieren analysiert. FSC bezieht mit dem Zelle Datenträger aufeinander und SSC hängt von der inneren Kompliziertheit des Partikels ab (d.h. Form des Kernes, der Menge und des Typen der zellplasmatischen Körnchen oder der Membrane Rauheit). Einige fließen cytometers auf dem Markt haben beseitigt die Notwendigkeit an der Fluoreszenz und benutzen nur helle Streuung für Messen. Anderes fließen cytometers Formularbilder der Fluoreszenz jeder Zelle, des zerstreuten Lichtes und des übertragenen Lichtes.