Welcome to Molecular Station! Velkommen til Molekylær station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du er nødt til at registrere før du kan skrive indlæg på vores fora eller brug vores avancerede funktioner. Register Now! Tilmeld dig nu! Its Free and Fast! Dens frie og hurtigt!

Already registered? Allerede registreret? Login now below. Login nu nedenfor.

User Name: Bruger Navn:

Password:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Allerede registreret og Har du glemt dit password? Click below to recover it. Klik nedenfor for at genoprette den.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Tilmeld dig nu - det er hurtigt og gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekylær Station er det største netværk af forskere, videnskabsmænd og videnskab kærester overalt!

Recent Forum Posts Nyt Forum Posts

PCR Protocols PCR-protokoller	PCR Bioinformatics and Databases PCR bioinformatik og databaser	Learn about PCR Lær om PCR	PCR Kits and Products PCR Kits og Produkter	PCR Forum PCR Forum	PCR Books PCR Bøger

PCR Samples and Template DNA PCR Prøver og skabelon DNA

Template DNA and Samples for PCR Template DNA og prøver til PCR

Guidelines for template DNA and samples for PCR: Retningslinjer for template DNA og prøver til PCR:

PCR Samples:  Types, Amount and Purity PCR Prøver: Typer, størrelsen og Renhed

Types of Samples for PCR Typer af prøver til PCR

Single- or double-stranded DNA of any origin may be a PCR sample. Enkelt-eller dobbelt-strandede DNA af enhver oprindelse kan være en PCR prøven. Templates that can be used for amplification include animal, bacterial, plant, or viral. Skabeloner, der kan anvendes til forstærkning omfatte dyr, bakterie-, plante-, eller viral. Conversion of RNA molecules, including total RNA, poly (A+) RNA, viral RNA, tRNA, or rRNA must occur prior to amplification when using these as templates to so-called complementary DNA (cDNA) by the enzyme reverse transcriptase (either MuLV or recombinant, rTth DNA polymerase). Omdannelse af RNA-molekyler, herunder samlede RNA, poly (A +) RNA, viral RNA, tRNA, eller rRNA skal ske forud for opformering, når du bruger disse som skabeloner til såkaldte komplementære DNA (cDNA) af enzymet reverse transkriptase (enten MuLV eller rekombinant, rTth DNA-polymerase).

Amount of Material for PCR Beløb af materiale til PCR

Starting material amount, required for PCR can be as little as a single molecule.  As a basis, up to nanogram amounts of DNA cloned template, up to microgram amounts of genomic DNA, or up to 105 DNA target molecules are best for initial PCR testing. Udgangsmateriale beløb, der kræves for PCR kan være lige så lidt som et enkelt molekyle. Som et grundlag, op til nanogram mængder af DNA-klonede skabelon, op til mikrogram mængder af genomisk DNA, eller op til 105 DNA-målet molekyler er bedst for første PCR-test .

Purity of Template and Sample for PCR Renhed af skabelon og Prøve til PCR

Purity of the DNA sample that will be used for PCR amplification does not need not be high. Renhed af DNA-prøve, der vil blive anvendt til PCR-amplifikation ikke behøver ikke være høj. A single cell, a crude cell lysate, or even a small sample of degraded DNA template is usually adequate for successful amplification. En enkelt celle, en primitiv celle lysate, eller endda et lille udsnit af ødelagte DNA-skabelon er normalt passende for vellykket forstærkelse. The requirements of sample purity must be that the target contains at least one intact DNA strand encompassing the amplified region and that the impurities associated with the target be dilute so as to not inhibit enzyme activity. Kravene i prøven renhed skal være, at målet indeholder mindst et intakt DNA streng omfatter de forstærkes regionen, og at urenheder i forbindelse med målet være fortyndet, så for ikke at hæmme enzym aktivitet. Be that as it may, for some amplifications, such as long PCR, it may be necessary to consider the quality and quantity of the DNA sample. Hvorom alting er, kan for nogle forstærkninger, såsom lange PCR, kan det være nødvendigt at overveje kvaliteten og mængden af det DNA-prøve. For example: 1. For eksempel: 1. When more template molecules are available, there is less occurrences of false positives caused by either cross-contamination between samples or “carryover” contamination from previous PCR amplifications. Når mere skabelon molekyler er til rådighed, der er mindre forekomster af falske positiver er forårsaget af enten krydskontaminering mellem prøver eller "overførsel" forurening fra tidligere PCR forstærkninger.

2. When the PCR amplifications lacks specificity or efficiency, or when the target sequences are limited, there is a greater chance of inadequate product yield. Når PCR forstærkninger mangler specificitet og effektivitet, eller når målet sekvenser er begrænset, er der en større chance for mangelfuld vare udbytte.

3. When the fraction of starting DNA available to PCR is uncertain, it is increasingly difficult to determine the target DNA content. Når brøkdel af begyndende dna til rådighed for PCR er usikker, er det stadig vanskeligere at fastlægge de mål-DNA indhold.