Welcome to Molecular Station! Velkommen til Molekylær station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du er nødt til at registrere før du kan skrive indlæg på vores fora eller brug vores avancerede funktioner. Register Now! Tilmeld dig nu! Its Free and Fast! Dens frie og hurtigt!

Already registered? Allerede registreret? Login now below. Login nu nedenfor.

User Name: Bruger Navn:

Password:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Allerede registreret og Har du glemt dit password? Click below to recover it. Klik nedenfor for at genoprette den.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Tilmeld dig nu - det er hurtigt og gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekylær Station er det største netværk af forskere, videnskabsmænd og videnskab kærester overalt!

Recent Forum Posts Nyt Forum Posts

DNA Protocols DNA-protokoller

DNA Encyclopedia DNA Encyclopedia

DNA Bioinformatics DNA Bioinformatik

DNA Forum DNA-Forum

DNA Blog DNA Blog

DNA News DNA Nyheder

DNA Books DNA Bøger

Agarose Purification DNA Fragments Agarose Rensning DNA-fragmenter

Copyright 2007 Molecular Station Copyright 2007 Molekylær Station

DNA Fragment Purification from Agarose Protocol DNA-fragment Rensning fra agarose-protokollen

1. Run DNA on "Low melt" agarose gel. Kør DNA på "Lav smelte" agarosegel.
2. For 600bp DNA fragments to 5kb use1%; For 300- 700bp use 2% agarose. For 600bp DNA-fragmenter til 5kb use1%; For 300 - 700bp bruge 2% agarose. If you need to run smaller fragments use 2% "Nusieve" + 1% "Low melt". Hvis du skal køre mindre fragmenter bruge 2% "Nusieve" + 1% "Low smelte".
3. After bands have separated, visualize the band on a UV box (minimize exposure of DNA to UV) Efter bands har adskilt, visualisere band på en UV-boks (minimere eksponering af DNA til UV)
4. Cut band out (DO NOT scratch the UV filter on the light box!). Klip båndet ud (MÅ IKKE ridse UV-filter på baggrund box!).
5. Add 100 ul of TE buffer (10mM Tris-HCl pH 7.6, 1mM EDTA) to band, crush, heat to 65oC for approx. Tilsæt 100 ul af TE-buffer (10mm Tris-HCl pH 7,6, 1 mm EDTA) til båndet, flammer, varme til 65oC til ca. 5 min, add 200l of phenol, vortex, heat 65°C for 3 min., vortex. 5 min, tilføjer 200l af phenol, vortex-, varme-65 ° C i 3 min., Vortex.
6. Microfuge 5 mins, remove supernant Mikrofugeglas 5 mins, fjerne supernant
7. Add 100 l of TE to phenol, vortex, heat 65°C 3 min. Tilsæt 100 l af TE at phenol, vortex-, varme-65 ° C 3 min. vortex
8. Microfuge, pool supernants. Mikrofugeglas, pool supernants.
9. Chloroform extract (approx. 400 ul), microfuge 3 min. Chloroform ekstrakt (ca. 400 ul), mikrofugeglas 3 min.
10. EtOH precipitate, adding 1/10 vol. EtOH udfældes, tilføjer 1 / 10 vol. 3M Na0Ac, 2.5 vol. 3M Na0Ac, 2,5 vol. EtOH.
11. -20°C 1-2+hrs; spin 30 min., dry down, bring up in suitable vol 0.1X TE -20 ° C 1-2 + hrs; spin 30 min., Tør ned, sætter op i egnede vol. 0.1X TE

Tips for DNA Agarose Gel Purification Tips til DNA agarosegel Rensning

• Set the trans-illuminator to long UV wavelength (or the low-power). Indstil trans-illuminator til lang UV bølgelængde (eller energibesparende). This is a great way to minimise the amount of time and energy of UV DNA exposure. Dette er en fantastisk måde at minimere den tid og energi af UV DNA-eksponering. This will minimize the UV mutagenesis of the DNA. Dette vil minimere UV mutagenese af DNA.
• Trim off as much of agarose from the band as possible without removing DNA. Trim off så meget af agarose fra bandet som muligt uden at fjerne DNA. This helps in minimizing agarose contamination which will enhance DNA purification. Dette hjælper med at minimere agarose forurening, som vil øge DNA-rensning.
• If you are getting problems use commercial kits such as spin-columns.There are some excellent kits for extracting DNA if you can afford them. Hvis du får problemer bruge kommercielle kits såsom spin-columns.There er nogle fremragende kits til udvinding af DNA, hvis du kan give dem. These include kits from Qiagen, Sigma, and other companies. Disse omfatter kits fra Qiagen, Sigma, og andre selskaber.

Related Articles for DNA Purification Relaterede artikler for DNA Purification