Welcome to Molecular Station! Velkommen til Molekylær station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du er nødt til at registrere før du kan skrive indlæg på vores fora eller brug vores avancerede funktioner. Register Now! Tilmeld dig nu! Its Free and Fast! Dens frie og hurtigt!

Already registered? Allerede registreret? Login now below. Login nu nedenfor.

User Name: Bruger Navn:

Password:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Allerede registreret og Har du glemt dit password? Click below to recover it. Klik nedenfor for at genoprette den.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Tilmeld dig nu - det er hurtigt og gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekylær Station er det største netværk af forskere, videnskabsmænd og videnskab kærester overalt!

Recent Forum Posts Nyt Forum Posts

Bookmark Bookmark Site Bookmark Bookmark Site

Flow Cytometry Flowcytometri

At flow cytometry, you will find background information and articles on the flow cytometry method, detailed protocols, bioinformatic analysis tools and a flow cytometry forum for all your cell biology research questions and discussions. På flowcytometri, vil du finde baggrundsinformation og artikler om flowcytometri metode, detaljerede protokoller, Bioinformatic analyseværktøjer og en flowcytometri forum for alle dine celle biologi forskning spørgsmål og diskussioner.

Flow Cytometry Background Flowcytometri Baggrund

Flow cytometry (also called FCM) is a molecular biology method which is commonly used to count, quickly examine, analyze and sort cells or even microscopic particles suspended in fluid. Flowcytometri (også kaldet FCM) er en molekylærbiologisk metode, der er almindeligt anvendt til at tælle, hurtigt undersøge, analysere og sortere celler eller selv mikroskopiske partikler suspenderet i væske. Flow cytometers allow a simultaneous multiparametric analysis of the physical and/or chemical characteristics of single cells or particles flowing past an optical and/or a electronic detection apparatus, in a fluid stream using a beam of laser light. Flow cytometers muliggøre en samtidig multiparametric analyse af de fysiske og / eller kemiske egenskaber enkelt celler eller partikler flyder tidligere et optisk og / eller en elektronisk sporing maskine, i en flydende strøm ved hjælp af en bom af laserlys.

The term cytometry derives from the Greek words for measurement (metry), and cell (cyto) giving "flow cytometry" the measurement of single cells as they flow past a detector. Udtrykket cytometry stammer fra det græske ord for måling (metry), og cellen (cyto) at give "flowcytometri" måling af enkelt celler, da de flow fortiden en detektor.

Flow or cell sorting is a further functional capability of flow cytometry allowing the separation of types of cells through the use of electrical or mechanical forces to collect populations of cells with one or more physical or chemical characteristic set by the user. Flow eller celle sortering er en yderligere funktionelle evne til flowcytometri giver mulighed for adskillelse af forskellige typer af celler ved hjælp af elektriske eller mekaniske kræfter til at indsamle populationer af celler med en eller flere fysiske eller kemiske karakteristisk sæt af brugeren.

Flow Cytometry Applications Flowcytometri Applications

Flow cytometry is commonly used in the analysis of the cell cycle, detection and analysis of apoptosis or necrosis, cell sorting, cell surface antigen detection for immunology, and stem cell analysis. Flowcytometri er almindeligt anvendt i analysen af cellens cyklus, afsløring og analyse af apoptose eller nekrose, celle sortering, celle overflade antigen påvisning for immunologi og stamceller analyse.

Flow Cytometry Measurements Flowcytometri Målinger

Flow Cytomers can be used to measure the following parameters, depending on the machine, fluorophore and other: Flow Cytomers kan bruges til at måle følgende parametre, afhængig af maskinen, fluorophore og andre:

• volume of cells Mængden af celler
• morphological characteristics of cells morfologiske egenskaber af celler
• cell surface antigens (Cluster of differentiation (CD) markers) celle-overflade-antigener (Cluster af differentiering (CD) markører)
• detection of cell pigments (ie chlorophyll or phycoerythrin) påvisning af cellen pigmenter (dvs. klorofyl eller phycoerythrin)
• apoptosis (quantification, measurement of DNA degradation, mitochondrial membrane potential, permeability changes, caspase activity) apoptose (kvantificering, måling af DNA nedbrydning, mitokondrier membran potentiale, permeabilitet ændringer, caspase aktivitet)
• cell viability assays celle levedygtighed assays
• assess DNA (eg in cell cycle analysis, cell kinetics, proliferation) vurdere DNA (f.eks i celle cyklus analyse, celle kinetik, spredning)
• assess RNA vurdere RNA
• chromosomal analysis and sorting (for DNA library construction or chromosome painting) kromosomal analyse og sortering (for DNA-bibliotek bygning eller kromosom maleri)
• assess for protein expression and localization vurdere for protein ytringsfrihed og lokalisering
• transgenic products in vivo, particularly the Green fluorescent protein or related fluorescent proteins transgene produkter in vivo, især den grønne fluorescerende protein eller beslægtede fluorescerende proteiner
• enzymatic activity enzymatiske aktivitet
• and many other parameters og mange andre parametre

How Flow Cytometers Work? Hvordan Flow Cytometers Arbejde?

A beam of light (usually laser light) of a single wavelength is directed onto a hydro-dynamically focused stream of fluid. En bom af lys (normalt laserlys) af en enkelt bølgelængde er rettet op på en hydro-dynamisk fokuserede strøm af væske. A number of detectors are aimed at the point where the stream passes through the light beam; one in line with the light beam (Forward Scatter or FSC) and several perpendicular to it (Side Scatter (SSC) and one or more fluorescent detectors). En række af detektorer er rettet mod det punkt, hvor åen passerer gennem lysstrålen; en i tråd med lysstrålen (Forward Scatter eller FSC), og flere vinkelret på den (Side Scatter (VSK) og en eller flere fluorescerende detektorer). Each suspended particle passing through the beam scatters the light in some way, and fluorescent chemicals found in the particle or attached to the particle may be excited into emitting light at a lower frequency than the light source. Hver suspenderet partikel passerer igennem lysbundtets scatters lyset på en måde, og fluorescerende kemikalier findes i partikel eller fastgjort til partikel kan være ophidset i udsender lys til en lavere frekvens end lyskilden. This combination of scattered and fluorescent light is picked up by the detectors, and by analysing fluctuations in brightness at each detector (one for each fluorescent emission peak) it is then possible to extrapolate various types of information about the physical and chemical structure of each individual particle. Denne kombination af spredt og fluorescerende lys samles op af detektorer, og ved at analysere udsving i lysstyrken i hver detektor (en for hver fluorescerende emission peak) er det så muligt at ekstrapolere forskellige typer oplysninger om de fysiske og kemiske struktur af hver enkelt partikel. FSC correlates with the cell volume and SSC depends on the inner complexity of the particle (ie shape of the nucleus, the amount and type of cytoplasmic granules or the membrane roughness). FSC korrelation med den celle volumen og VSK afhænger af den inderste kompleksiteten af partikel (dvs. form af den kerne, størrelsen og typen af cytoplasmic granulat eller membranen ruhed). Some flow cytometers on the market have eliminated the need for fluorescence and use only light scatter for measurement. Nogle flow cytometers på markedet har fjernet behovet for fluorescens og brug kun lys scatter for måling. Other flow cytometers form images of each cell's fluorescence, scattered light, and transmitted light. Andre flow cytometers form billeder af hver celles fluorescens, spredte lys, og fremsendes lys.