Welcome to Molecular Station! Vítejte na molekulární Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musíte se registrovat, než budete moci odeslat na naše fóra, nebo využít naše moderní prvky. Register Now! Zaregistrujte se nyní! Its Free and Fast! Jeho svobodný a Fast!

Already registered? Už jste se zaregistroval? Login now below. Přihlášení nyní níže.

User Name: Uživatelské jméno:

Password: Heslo:

Remember Me? Zapamatovat si?

Already registered and Forgot your password? Už jste se zaregistroval a Zapomněli jste heslo? Click below to recover it. Klikněte níže k zpětnému to.

Recover Lost Password Získat zpět ztracené heslo

Join now - it's fast and free! Připojte se nyní - je to rychlé a zdarma!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekulární stanice je největší síť výzkumných pracovníků, vědců a vědy milovníky kdekoliv!

Recent Forum Posts Nový fóru

siRNA and RNAi Protocols siRNA RNAi a protokoly	siRNA and RNAi Bioinformatics siRNA RNAi a bioinformatika	siRNA and RNAi FAQ siRNA RNAi a FAQ	siRNA and RNAi Kits and Products siRNA RNAi a sady a produkty	siRNA and RNAi Forum siRNA RNAi a fórum	siRNA and RNAi News siRNA RNAi a Novinky

siRNA Protocols and RNAi Protocols siRNA RNAi protokoly a protokoly

siRNA Transfection Protocol transfekce siRNA protokolu

siRNA transfection protocol : Transfect 6 well plates transfekce siRNA protokol: Transfect 6 a desky

1. apply first siRNA treatment when cells are 60% confluent (measure confluency with voltmeter); plate 1.5x10^6 cells on Friday, transfect on Wednesday. použije první siRNA zacházení, když buňky jsou 60% konfluentní (opatření confluency s voltmetr); deska 1.5x10 ^ 6 clanku v pátek, transfect ve středu. For each well: U každé jamky:

1. Dilute 2.5 ug siRNA (20uM is approximately 0.26ug/ul. 9.62 ul per well of a 6-well plate) with culture media to a final volume of 100 ul. U se barrier pipette tips. You can make a master mix if all the wells will be transfected with the same siRNA. Rozřeďte 2,5 ug siRNA (20uM je přibližně 0.26ug/ul. 9,62 ul na jamku na jeden 6-i deska) s kulturou médií na konečný objem 100 ul. U se hráz špičky pipet. Můžete si mistr mixu jsou-li splněny všechny studny bude transfected se stejným siRNA. Do this in a sterile autoclaved plastic tube. Postup je v sterilní autoklávovaného plastových trubek.
2. Add 12 ul RNAiFect (Qiagen - or any other RNA transfection reagent, see manufacturer's protocol) per siRNA mastermix tube and mix gently. Přidat 12 ul RNAiFect (Qiagen - nebo jakékoli jiné RNA transfekce činidlo, viz výrobce protokol) za siRNA mastermix trubice a jemně promíchejte.
3. Incubate for 15 minutes at room temperature to allow complex formation between siRNA and lipids. Inkubujte po dobu 15 minut při pokojové teplotě, aby se umožnilo komplexní formace mezi siRNA a lipidů.
4. Aspirate media from cells and add 900ul fresh media to each well. Aspirujte médií z buněk a přidat 900ul čerstvého média do každé jamky.
5. Add siRNA mixture (112 ul per well) drop-wise while gently swirling plate. Přidat siRNA směsi (112 ul na jamku) drop-moudrý a zároveň jemně víření desce.
• Apply second siRNA treatment 2 days later, following the steps outlined above. Použít druhý siRNA ošetření 2 dny později kroků uvedených výše. The second transfection will add to decrease expression of the gene of interest. Druhá transfekce se přidat k poklesu exprese genu zájmu.

Other siRNA protocols Ostatní siRNA protokoly

Also see our siRNA and RNAi page Také se podívejte na naše a siRNA RNAi stránka


Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Podmínky poskytování služeb | Ochrana soukromí | © 2005-2007 molekulární Station.com, Všechna práva vyhrazena.

Send this page to a friend Pošlete tuto stránku svému příteli