home > protein-microarrays > antibody-microarray-limitations > index.php home> protein-microarrays> protilátka-Microarray-omezení> index.php
Protein Array Protocols Protein Array protokoly | Protein Array Bioinformatics Protein Array Bioinformatika | Learn about Protein Arrays Získejte informace o Protein Arrays | Protein Array Kits and Products Protein Array sady a produkty | Protein Array Forum Protein Array fórum | Proteomic News Proteomická Novinky |
Protein and Antibody Microarrays Bílkoviny a Antibody Microarrays
Availability of Antibodies Dostupnost Protilátky
Another challenge to antibody arrays is to obtain antibodies against the ≥ 100,000 proteins that comprise the human proteome.˙ There are currently a very small fraction of antibodies available of the proteome. Dalším úkolem, který je protilátka pole je získání protilátek proti ≥ 100000 bílkoviny, které tvoří lidský proteom. V současné době existuje velmi malý zlomek protilátky k dispozici na proteom. ˙In addition, the specificity of many of these antibodies is poorly documented and additional antibodies may be required to Navíc, vzhledem ke specifičnosti mnoha těchto protilátek je špatně dokumentované a další protilátky mohou být požádáni, aby
permit the detection of post-translational modifications.˙ The detection of proteins by antibody–antigen interactions is also characterized by a broad range of specificity and affinity.˙ Also, it is difficult to obtain a large set of highly specific antibody za cíl zjistit post-translační modifikace. Detekce proteinů, které interakcí antigen-protilátka je také charakteristický širokou škálu specifičnost a afinitu. Samozřejmě, že je obtížné získat celé řady vysoce specifických protilátek
molecules. molekul. Therefore, most antibody arrays are limited in their use and contain a few well-defined capture agents directed at a particular class of protein markers (9,17) Proto je většina protilátky pole jsou omezeny v jejich užívání a obsahují několik dobře-definován zachytit agentů zaměřených na určité třídy bílkovin markery (9,17)
-to not act similar glycosylation - aby nepůsobil podobné glykosylačních
Other Problems Facing Antibody Microarrays and Possible Solutions Jiné problémy, kterým čelí Antibody Microarrays a možná řešení
Classical strategies of antibody generation by animal immunization seem to be impractical. Klasická strategie na protilátky generaci zvířat očkování, se zdá být nepraktické. Recombinant antibody display libraries are more promising (59-61). Rekombinantní protilátky displej knihovny jsou slibné (59-61). Recently, many recombinant methods of generating antibodies have been investigated. V poslední době mnoho rekombinantní metody vytváření protilátek byla zkoumána.
These include phage antibody-display, ribosome display, SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment), mRNA display, and affibody display, all of which have been developed to advance the production of antibodies and/or antibody mimics (16,54,56,62).˙ These methods all involve the construction of large repertoires of viable regions with potential binding activity, which are then selected by multiple rounds of affinity purifications. Patří mezi ně bakteriofág protilátka-displej, ribozomu displej, Selex (systematický vývoj ligandy o exponenciální obohacení), mRNA displej, a affibody displeje, z nichž všechny byly vyvinuty, aby předem produkci protilátek a / nebo protilátky napodobuje (16,54, 56,62). Tyto metody zahrnují všechny výstavbu velkých repertoáru z prosperujících regionech s potenciálním závazné činnosti, které jsou pak vybere několik kol na afinitu purifications. Candidate clones can be further selected using maturation selection which improves binding affinities. Kandidátské klony mohou být dále vybrány pomocí zrání výběr, který zlepšuje závazné příslušnosti. ˙However, an ideal selection system, which is fast, robust, sensitive, low cost, automated, and minimized, is yet to be fully developed (16,54).˙ These smaller antibody fragments usually have decreased cross-reactivity and similar properties upon attachment (7,8,9,27). Nicméně, ideální výběr systému, který je rychlý, silný, citlivý, nízké náklady, autoservis, a minimalizuje, je třeba ještě plně vyvinuty (16,54). Tyto menší fragmenty protilátky obvykle se snížil kříž-reaktivita a podobné vlastnosti, na upevnění (7,8,9,27).
Also because recombinant antibodies have a potentially high affinity, high specificity, and their smaller molecular weight, which is usually about 30 kDa while non-recombinant antibodies are about 150 kDa, dense and oriented attachment to support surfaces is facilitated (63,64). Také proto, že rekombinantní protilátky mají potenciálně vysokou afinitou, vysoká specifičnost, a jejich menší molekulovou hmotnost, což je obvykle asi 30 kDa, zatímco non-rekombinantní protilátky jsou asi 150 kDa, hustá a orientované na podporu připojovacích ploch je usnadněn (63,64).
Antibodies are not the only molecules that may bind proteins. Protilátky nejsou jediné molekuly, které se mohou vázat proteiny. ˙Aptamers are short oligonucleotids that can bind and crosslink covalent target proteins.˙ This facilitates Aptamers jsou krátké oligonucleotids, který může zavazovat a crosslink kovalentní cílových proteinů. To usnadňuje
higher stringency wash conditions which promotes detection of specific binding.˙ Furthermore, these molecules are easily selected, arrayed, and synthesized.˙ Purified protein target is a requirement for their use however, and aptamers can exhibit biased binding as RNAs tend to be highly negatively charged (9). vyšší přísnost umýt podmínky, které podporuje detekci specifické závazné. Navíc, tyto molekuly jsou snadno vybrán, seřadil, a syntézou. Vyčištěná bílkovin cíle je podmínkou pro jejich použití však může vystavovat a aptamers neobjektivní závazné, RNAs mají tendenci být velmi negativně nabité ( 9). A group (Somalogic) recently used immobilized anti-human immunodeficiency virus-gp120 aptamer to detect subnanomolar concentrations of target protein in 5% human serum (65). Skupina (Somalogic) nedávno použitých znehybněné anti-virus lidské imunodeficience-gp120 aptamer pro odhalování subnanomolar koncentrace cílových proteinů v 5% lidského séra (65).
Next: Protein Microarray Detection Methods and Analysis Další: Bílkoviny Microarray metod a analýza
References for Protein and Antibody Microarrays Odkazy na bílkoviny a Antibody Microarrays
Back to: Návrat:
Introduction and Background to Protein Chips and Antibody Chips. Úvod a pozadí na Bílkoviny Chips a Antibody Chips.
Types of Antibody and Protein Chips Typy protilátek a bílkovin Chips
Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Podmínky poskytování služeb | Ochrana soukromí | © 2005-2007 molekulární Station.com, Všechna práva vyhrazena.
Send this page to a friend Pošlete tuto stránku svému příteli