Welcome to Molecular Station! Vítejte na molekulární Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musíte se registrovat, než budete moci odeslat na naše fóra, nebo využít naše moderní prvky. Register Now! Zaregistrujte se nyní! Its Free and Fast! Jeho svobodný a Fast!

Already registered? Už jste se zaregistroval? Login now below. Přihlášení nyní níže.

User Name: Uživatelské jméno:

Password: Heslo:

Remember Me? Zapamatovat si?

Already registered and Forgot your password? Už jste se zaregistroval a Zapomněli jste heslo? Click below to recover it. Klikněte níže k zpětnému to.

Recover Lost Password Získat zpět ztracené heslo

Join now - it's fast and free! Připojte se nyní - je to rychlé a zdarma!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekulární stanice je největší síť výzkumných pracovníků, vědců a vědy milovníky kdekoliv!

Recent Forum Posts Nový fóru

PCR Protocols PCR protokolů	PCR Bioinformatics and Databases PCR Bioinformatika a databáze	Learn about PCR Získejte informace o PCR	PCR Kits and Products PCR sady a produkty	PCR Forum PCR fórum	PCR Books PCR Knihy

Analysis of PCR Products Analýza produktů PCR

Agarose Gel Electrophoresis Analysis of PCR Products Agarózového gelu Elektroforeza Analýza produktů PCR

To quickly and easily analyze and resolve PCR products, a 3% NuSieve can be used GTG agarose (FMC Bioproducts, Rockland, ME) and 1% Seakem GTG agarose (FMC Bioproducts) gel run in either TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA) or TAE (40 mM Tris-acetate, 2 mM EDTA, pH approx 8.5). Chcete-li rychle a snadno analyzovat a vyřešit PCR produktů, což je 3% NuSieve mohou být použity GTG agarózy (FMC bioprodukty, Rockland, ME) a 1% Seakem GTG agarózy (FMC bioprodukty) gel běžet v obou TBE (89 mM Tris-borát, 2 mM EDTA) nebo TAE (40 mM Tris-acetát, 2 mM EDTA, pH cca 8.5). The resolved DNA bands are detected by staining the gels with either approx 0.5 μg/mL of ethidium bromide, followed by destaining with water or SYBR® Green 1 (Molecular Probes Inc., Eugene, OR) and finally photographed under UV illumination. Vyřešen na DNA kapely jsou detekovány na barvení gelů se buď cca 0,5 μ g / ml ethidiumbromidem, následuje destaining s vodou nebo SYBR ® Zelená 1 (molekulární Probes Inc, Eugene, OR) a konečně fotografoval v UV osvětlení. Use a 123-basepair (bp) or 1-kilobasepair (kbp) ladder as a convenient marker for size estimates of the products. Používejte 123-basepair (BP) nebo 1-kilobasepair (kbp) žebřík jako vhodný marker pro velikost odhady produktů.

Other Analytical Methods to Analyze PCR Products Ostatní analytické metody pro analýzu PCR produktů

There are a variety of other detection methods available for PCR product analysis, such as ethidium bromide-stained 8–10% polyacrylamide gels run in TBE buffer, Southern gels or dot/blots, subcloning and direct sequencing, HPLC analysis, and the use of 96-well microplates, to name a few. Existuje celá řada dalších detekčních metod jsou k dispozici pro PCR analýzy produktů, jako jsou například ethidiumbromidem-mořené 8-10% polyakrylamidovém gely spustit v TBE pufru, jižní gely nebo dot / Blot, subcloning a přímého sekvenování, HPLC analýza a využití 96-i microplates, abychom jmenovali alespoň některé. The reverse dot-blot method combines PCR amplification with nonradioactive detection. Reverse dot-vymaž kombinuje metodu PCR amplifikace s neradioaktivní detekce. The introduction of fluorescent dyes to PCR, together with a suitable instrument for real-time, online quantification of PCR products during amplification has led to the development of kinetic PCR or quantitative PCR. Zavedení fluorescenčních barviv k PCR, spolu s vhodným nástrojem pro real-time, on-line kvantitativní PCR produktů během amplifikace vedlo k rozvoji kinetická PCR nebo kvantitativní PCR. Quantitative PCR (QPC) measures PCR product accumulation during the exponential phase of the reaction and before amplification becomes vulnerable, ie, when reagents become limited. Kvantitativní PCR (QPC) opatření PCR produktu akumulace během exponenciální fáze reakce a před amplifikace se stává zranitelným, tj. kdy činidla stávají omezené. The ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) and the LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) are integrated fluorescent detection devices that allow fluorescence monitoring either continuously or once per cycle. Na ABI Prizma 7700 (aplikovaných Biosystems) a LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Německo) jsou integrovány fluorescenční detekční zařízení, které umožňují sledování fluorescence buď kontinuálně, nebo jednou za cyklus. These instruments can also characterize PCR products by their melting characteristics, eg, to discriminate singlebase mutations from a wild-type sequence. Tyto nástroje lze také charakterizovat PCR produktů, jejich tavení vlastností, např. k diskriminaci singlebase mutací z volně žijících-typ sekvence. The recently designed Mx4000™ Multiplex Quantitative PCR System (Strategene, La Jolla, CA) can generate and analyze data for multiple fluorescent real-time QPCR assays. Nedávno navržené Mx4000 ™ Multiplex Kvantitativní PCR systému (Strategene, La Jolla, CA) může generovat a analyzovat data za více fluorescenční real-time QPCR testy.