Welcome to Molecular Station! Vítejte na molekulární Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Musíte se registrovat, než budete moci odeslat na naše fóra, nebo využít naše moderní prvky. Register Now! Zaregistrujte se nyní! Its Free and Fast! Jeho svobodný a Fast!

Already registered? Už jste se zaregistroval? Login now below. Přihlášení nyní níže.

User Name: Uživatelské jméno:

Password: Heslo:

Remember Me? Zapamatovat si?

Already registered and Forgot your password? Už jste se zaregistroval a Zapomněli jste heslo? Click below to recover it. Klikněte níže k zpětnému to.

Recover Lost Password Získat zpět ztracené heslo

Join now - it's fast and free! Připojte se nyní - je to rychlé a zdarma!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molekulární stanice je největší síť výzkumných pracovníků, vědců a vědy milovníky kdekoliv!

Recent Forum Posts Nový fóru

Bookmark Bookmark Site Záložka Záložka Site

ELISA Assay ELISA test

ELISA Table of Contents ELISA Obsah

• ELISA Assay Articles ELISA Puncovní články
• ELISA Assay Pictures ELISA Puncovní Obrázky
• ELISA Assay Protocols ELISA Puncovní protokoly
• ELISA Assay Forum ELISA Obsah fóra
• ELISA Assay Videos ELISA Puncovní Video

What is an ELISA? Co je ELISA?

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, or ELISA, is a biochemical technique used mainly in immunology to detect the presence of an antibody or an antigen in a sample. Enzym-Související ImmunoSorbent Puncovní, nebo ELISA, je biochemické technologie používaná hlavně v imunologie ke zjišťování přítomnosti na protilátky nebo antigen ve vzorku. The ELISA has been used as a diagnostic tool in medicine and plant pathology, as well as a quality control check in various industries. ELISA byla použita jako nástroj pro diagnostiku v lékařství a patologie rostlin, stejně jako kontrolu kvality v různých průmyslových odvětvích. In simple terms, in ELISA an unknown amount of antigen is affixed to a surface, and then a specific antibody is washed over the surface so that it can bind to the antigen. Jednoduše řečeno, v ELISA neznámé množství antigenu je umístěná na povrchu, a pak specifické protilátky se vymyje se na hladinu tak, že se může vázat na antigen. This antibody is linked to an enzyme, and in the final step a substance is added that the enzyme can convert to some detectable signal. Tato protilátka je spojena s enzymem, a v konečném kroku je látka, která zní, že enzym může převést do jisté detekovatelný signál. Thus in the case of fluorescence ELISA, when light is shone upon the sample, any antigen/antibody complexes will fluoresce so that the amount of antigen in the sample can be measured. Proto v případě fluorescence ELISA, kdy světlo je zářil na vzorku každý antigen / protilátka zařízení bude nezáří tak, aby bylo množství antigenu ve vzorku může být měřena.

Performing an ELISA involves at least one antibody with specificity for a particular antigen. Účinkují ELISA zahrnuje alespoň jedna protilátka s specifičnost pro konkrétní antigen. The sample with an unknown amount of antigen is immobilized on a solid support (usually a polystyrene microtiter plate) either non-specifically (via adsorption to the surface) or specifically (via capture by another antibody specific to the same antigen, in a "sandwich" ELISA). Vzorek s neznámou částku antigenu je imobilizován na solidní podporu (obvykle polystyrenu mikrotitrační destičky) buď non-specificky (prostřednictvím adsorpce na povrch) nebo zvlášť (přes zachytit jinou protilátky specifické pro stejný antigen, v "sendvič "ELISA). After the antigen is immobilized the detection antibody is added, forming a complex with the antigen. Po antigenu je znehybněné detekci protilátky, které zní, který tvoří komplex s antigenem. The detection antibody can be covalently linked to an enzyme, or can itself be detected by a secondary antibody which is linked to an enzyme through bioconjugation. Detekci protilátky mohou být kovalentně spojeny s enzymu, nebo může být sama o sobě upravena sekundární protilátky, která je spojena s enzymem prostřednictvím bioconjugation. Between each step the plate is typically washed with a mild detergent solution to remove any proteins or antibodies that are not specifically bound. Mezi každým krokem Deska je obvykle s mírný umyv mycího roztoku k odstranění všech proteinů nebo protilátek, které nejsou konkrétně vázány. After the final wash step the plate is developed by adding an enzymatic substrate to produce a visible signal, which indicates the quantity of antigen in the sample. Po závěrečné promývací krok Deska je vyvinuta přidáním substrátu enzymatické vyrábět viditelný signál, který udává množství antigenu ve vzorku. Older ELISAs utilize chromogenic substrates, though newer assays employ fluorogenic substrates with much higher sensitivity. Starší testy ELISA využívá chromogenic substrátů, i když novější testy zaměstnávají fluorogenic substrátů s mnohem vyšší citlivost.

ELISA Assay Applications ELISA Puncovní Aplikace

Because the ELISA can be performed to evaluate either the presence of antigen or the presence of antibody in a sample, it is a useful tool both for determining serum antibody concentrations (such as with the HIV test[1] or West Nile Virus) and also for detecting the presence of antigen. Protože ELISA může být provedena buď vyhodnotit přítomnost antigenu nebo přítomnost protilátky ve vzorku, je užitečným nástrojem jak pro stanovení sérové koncentrace protilátky (například s HIV test [1] nebo West Nil viru) a také pro zjišťování přítomnosti antigenů. It has also found applications in the food industry in detecting potential food allergens such as milk, peanuts, walnuts, almonds, and eggs.[2] ELISA can also be used in toxicology as a rapid presumptive screen for certain classes of drugs. Bylo také zjištěno, aplikace v potravinářském průmyslu při odhalování potenciálních potravinové alergeny, jako jsou mléko, arašídy, vlašské ořechy, mandle, vejce a [2]. ELISA může být rovněž použit v toxikologii jako rychlý pravdepodobnou obrazovky pro některé skupiny léků.

The ELISA test, or the enzyme immunoassay (EIA), was the first screening test commonly employed for HIV. ELISA test, nebo enzymu imunotest (EIA), byla první screeningový test se běžně užívá k HIV. It has a high sensitivity. Má vysokou citlivost. In an ELISA test, a person's serum is diluted 400-fold and applied to a plate to which HIV antigens have been attached. V ELISA testu, osoby sérum se ředí 400-krát a působí na desku, na které HIV antigeny byly připojeny. If antibodies to HIV are present in the serum, they may bind to these HIV antigens. Pokud protilátky proti HIV jsou přítomny v séru, mohou se váží na tyto HIV antigeny. The plate is then washed to remove all other components of the serum. Deska se pak umyl, aby odstranily všechny ostatní složky séra. A specially prepared "secondary antibody" — an antibody that binds to human antibodies — is then applied to the plate, followed by another wash. Speciálně připravené "sekundární protilátky" - Protilátka, která se váže na lidské protilátky - je pak použit na desku, následuje další mycí cyklus. This secondary antibody is chemically linked in advance to an enzyme. Tato sekundární protilátka je chemicky vázána v předstihu, aby enzym. Thus the plate will contain enzyme in proportion to the amount of secondary antibody bound to the plate. Takto Deska bude obsahovat enzym v poměru k výši sekundární protilátky vázané na desce. A substrate for the enzyme is applied, and catalysis by the enzyme leads to a change in color or fluorescence. Substrátem pro enzym je použit, a katalýza pomocí enzymu vede ke změně barvy nebo fluorescence. ELISA results are reported as a number; the most controversial aspect of this test is determining the "cut-off" point between a positive and negative result. ELISA výsledky jsou hlášeny jako číslo; nejvíce kontroverzní aspekt této zkoušky je stanovení "cut-off" místo mezi pozitivním a negativním výsledkem.

One method of determining a cut-off point is by comparison with a known standard. Jednou z metod na určení cut-vypnutí bodu je ve srovnání se známou normu. For example, if an ELISA test will be used in workplace drug screening, a cut-off concentration (eg, 50 ng/mL of drug) will be established and a sample will be prepared that contains that concentration of analyte. Například, pokud ELISA test bude použit v práci s drogami promítání, střih-vypnuto spojení (např. 50 ng / ml drog) bude zřízena a vzorek bude připraven, která obsahuje, že koncentrace analytu. Unknowns that generate a signal that is more positive than the known sample are called "positive" and those that generate a signal less positive than the known sample are called "negative. Neznámé, které generují signál, že je pozitivnější, než je známo vzorku se nazývá "pozitivní" a těch, kteří vytvářejí pozitivní signál menší, než je známo, vzorek se nazývají "negativní.

Darwin's Theory of Evolution Darwinova teorie evoluce

Prior to the development of the EIA/ELISA, the only option for conducting an immunoassay was radioimmunoassay, a technique using radioactively-labeled antigens or antibodies. Před vývoj EIA / ELISA, jediná možnost, jak vede imunotest byl radioimunoanalýza, technika, pomocí radioaktivně označené-antigeny nebo protilátky. In radioimmunoassay, the radioactivity provides the signal which indicates whether a specific antigen or antibody is present in the sample. V radioimunoanalýza, radioaktivity poskytuje signál, který udává, zda je specifický antigen nebo protilátka je přítomna ve vzorku. Radioimmunoassay was first described in a paper by Rosalyn Sussman Yalow and Solomon Berson published in 1960[3]. Radioimunoanalýza byla poprvé popsána v práci Rosalyn Sussman Yalow a Šalomoun osoba zveřejněna v roce 1960 [3].

Because radioactivity poses a health threat, a safer alternative was sought. Protože radioaktivita představuje ohrožení zdraví, je bezpečnější alternativa byl požadován. A suitable alternative to radioimmunoassay would substitute a non-radioactive signal in place of the radioactive signal. Vhodná alternativa k radioimunoanalýza by náhradní bez-radioaktivní signálu v místě radioaktivní signál. When certain enzymes (such as peroxidase) react with appropriate substrates (such as ABTS or 3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine), they can result in changes in color, which can be used as a signal. Jestliže některé enzymy (např. peroxidáza) reagovat s vhodnými substráty (např. ABTS nebo 3,3 ', 5,5'-Tetramethylbenzidine), mohou způsobit změny v barvě, která může být použita jako signál. However, the signal has to be associated with the presence of antibody or antigen, which is why the enzyme has to be linked to an appropriate antibody. Avšak signál musí být spojena s přítomností protilátky nebo antigen, což je enzym proč musí být spojen s vhodnou protilátkou. This linking process was independently developed by Stratis Avrameas and GB Pierce[4]. Toto propojení procesu byla nezávisle vyvinutý Stratis Avrameas GB a Pierce [4]. Since it is necessary to remove any unbound antibody or antigen by washing, the antibody or antigen has to be fixed to the surface of the container, ie the immunosorbent has to be prepared. Vzhledem k tomu, že je nutné odstranit jakékoli nevázaného protilátky nebo antigen praním protilátky nebo antigen musí být stanovena na povrchu nádoby, tj. immunosorbent musí být připraven. A technique to accomplish this was published by Wide and Porath in 1966[5] Technika k dosažení tohoto vydala Široký a Porath v roce 1966 [5]

In 1971, Peter Perlmann and Eva Engvall at Stockholm University in Sweden, as well as Anton Schuurs and Bauke van Weemen in The Netherlands, independently published papers which synthesized this knowledge into methods to perform EIA/ELISA[6][7] V roce 1971, Peter Perlmann a Eva Engvall na Stockholmské univerzitě ve Švédsku, stejně jako Anton Schuurs a Bauke van Weemen v Nizozemsku, samostatně publikovaných článků, které syntézou poznatků do této metody, které vykonávají EIA / ELISA [6] [7]

ELISA Protocol ELISA protokolu

Elisa Assay Videos Elisa Puncovní Video

ELISA Assay Video ELISA Puncovní Video

ELISA Assay video. ELISA test videa. Determination of Chlorpyriphos methyl in wheat samples by enzyme linked immunosorbent assay ELISA from zuhaitz77. Stanovení Chlorpyrifos-methyl v pšenici vzorků pomocí enzymu spojené immunosorbent assay ELISA z zuhaitz77.

Added by: oBWhat Přidal: oBWhat
Tags: elisay assay enzyme linked immunosorbent Tags: elisay rozboru enzymu spojené immunosorbent
Date: 2008-05-04 Datum: 2008-05-04

---