| | | | | |
|---|
| | | Cell Culture Media, Kits, and Products Buňka Kultura Média, sady a výrobky | | |
Subculturing Cells - Cell Culture Subculturing buněk - buňky Kultura
Cell Culture Buněčné kultury
Cell Subculture Protocol Buňka subkultury protokolu
SUBCULTURING CELLS SUBCULTURING BUNĚK
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; Získejte DMEM media 4C; trypsin-20C, BSA-20C; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic Dej v 36mL na DMEM do kuželové trubice plastové Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; Přidat 4mL na BSA média k 36mL DMEM; Get syringe and filter; Získejte stříkačky a filtrů; Suck up media with syringe.˙ Add filter. Sát do médií se stříkačkou. Přidat filtr. Push out media through filter on syringe. Vystrčit médií přes filtr na injekční stříkačce. Repeat twice to get all of volume. Zopakujte dvakrát dostat všechny na objemu. Put into new plastic tube conical. Přidat do nových plastových trubkových kuželovitý. Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) Odstranit staré médií o dumpingu do kádinky; NEPOUŽÍVEJTE dýchací přístroj (dostat kontaminace!) Add 3mL typsin to culture.˙ Trypsin with pull cells off the culture container. Přidat 3ml typsin ke kultuře. Trypsin se tahat buněk z kultury kontejneru. Put container into incubator.˙ Wait 2 min; Take out;˙ look into microscope. Vložte nádobky do inkubátoru. Počkej 2 min; Vem ven, podívat se do mikroskopu. Try to get less clumps.˙ More individual cells. Zkuste se dostat méně clumps. Více jednotlivých buněk. Remove most of trypsin by dumping into beaker. Odstranit většina tripsin o dumpingu do kádinky. Put˙ back into incubator. Vložte zpět do inkubátoru. Check frequently. Zkontrolujte často. Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. Slap kontejneru na stranách ke kontrole spodní méně clumps; pohled do mikroskopu. When see many individual cells floating along; Great! Když najdete mnoho jednotlivých buněk plovoucích podél; Skvělé! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). Přidat k médiím větší nádoby; 1:5 / 1:3 ředění (3-5 kontejnerů větší). Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. Přidat do 10 ml (T75) velké nádobě, 5 ml k (T25) malé nádoby. Suck out Most (5mL of cells from T25). Sát z Most (5 ml buněk z T25). Add to T75. Přidat do T75. Leave some cells in small container.˙ Add media to small container.˙ Check in microscope for single cells;˙ Incubate in 37C incubator. Nechte některých buněk v malém balení. Médií Přidat do malé nádoby. Check in mikroskop pro jednorázové buněk; Inkubujte v inkubátoru 37c. See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . Viz další Cell-protokoly v naší buněčné biologie a buněčné kultury protokolu Directory.
Send this page to a friend Pošlete tuto stránku svému příteli 
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
