Welcome to Molecular Station! Добре дошли в молекулярна станция!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Трябва да се регистрирате преди да можете да публикувате на нашите форуми, или да използвате допълнителни функции. Register Now! Регистрирайте се! Its Free and Fast! Тяхното свободно и бързо!

Already registered? Вече сте регистрирани? Login now below. Вход за сега по-долу.

User Name: Име:

Password: Парола:

Remember Me? Запомни ме?

Already registered and Forgot your password? Вече сте регистрирани и Забравили сте паролата си? Click below to recover it. Кликнете по-долу, за да го възстанови.

Recover Lost Password Забравена Забравена парола

Join now - it's fast and free! Присъединете се към момента - това е бързо и безплатно!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Молекулярна станция е най-голямата мрежа от изследователи, учени и любители на науката навсякъде!

Recent Forum Posts Нова Форум постове

Protein Protocols Протеин протоколи

Protein Encyclopedia Протеин енциклопедия

Protein Bioinformatics Протеин Биоинформатика

Protein Science Forum Протеин науката форум

Protein Blog Протеин Blog

DNA News ДНК Новини

Lowry Protein Assay Protocol Lowry протеин тест Протокол

Protein Concentration Determination by the Lowry Prtoein Assay Protocol Определяне концентрацията протеин от Lowry Prtoein тест Протокол

Materials Материали

1. Complex-forming reagent: Prepare immediately before use by mixing the following stock solutions in the proportion 100:1:1 (by vol), respectively: Комплекс-формиращи реагент: Подгответе непосредствено преди употреба чрез смесване на следния състав решения в частта 100:1:1 (от об), съответно:
Solution A: 2% (w/v) Na2CO3 in distilled water. Разтвор А: 2% (тегло / обем) Na2CO3 в дестилирана вода.
Solution B: 1% (w/v) CuSO4·5H2O in distilled water. Разтвор Б: 1% (тегло / обем) CuSO4 5H2O в дестилирана вода.
Solution C: 2% (w/v) sodium potassium tartrate in distilled water. С Решение: 2% (тегло / обем) натриев калиев тартарат в дестилирана вода.

2. Prepare 2 N NaOH. Подгответе 2 N NaOH.

3. Folin reagent (commercially available): Use at 1 N concentration. Folin реагент (на пазара): Употреба на 1 N концентрация.

4. Standards: Use a stock solution of standard protein (eg, bovine serum albumin fraction V) containing 2 mg/mL protein in distilled water, stored frozen at –20°C. Стандарти: Използвайте фондова решаване на белтък стандарт (например, от рода на едрия рогат серумния албумин част V), съдържащи 2 мг / мл белтък в дестилирана вода, съхраняват замразени при -20 ° C. Prepare standards by diluting the stock solution with distilled water as follows: Подгответе стандарти от разреждане на запасите разтвор с дестилирана вода, както следва:

Stock solution   (µL)     0         2.5      5          12.5     25        50        125      250      500 Акции разтвор (μ L) 0 2,5 5 12,5 25 50 125 250 500

Water                (µL)     500      498     495      488      475      450      375      250      0 Вода (μ L) 500 498 495 488 475 450 375 250 0
Protein conc. Протеин conc.    (µg/mL) 0          10       20        50        100      200      500      1000    2000 (μ г / mL) 0 10 20 50 100 200 500 1000 2000

Method Метод

1. To 0.1 mL of sample or standard, add 0.1 mL of 2 N NaOH. До 0,1 мл проба или стандарт, добавете 0,1 мл от 2 N NaOH. Hydrolyze at 100°C for 10 min in a heating block or boiling water bath. Hydrolyze при 100 ° C за 10 мин. в един блок за отопление или вряща вода вана.

2. Cool the hydrolysate to room temperature and add 1 mL of freshly mixed complex-forming reagent. Гледай на хидролизат до стайна температура и добавете 1 мл прясно смесен комплекс-формиращи реагент. Let the solution stand at room temperature for 10 min. Нека решаването на стайна температура за 10 мин.

3. Add 0.1 mL of Folin reagent, using a vortex mixer, and let the mixture stand at room temperature for 30–60 min (do not exceed 60 min). Добавете 0,1 мл на Folin реактив, като се използва също миксер и сместа да престои на стайна температура за 30-60 мин. (не надвишава 60 мин.).

4. Read the absorbance at 750 nm if the protein concentration was below 500 µg/mL or at 550 nm if the protein concentration was between 100 and 2000 µg/mL. Прочетете absorbance на 750 мм, ако концентрацията на протеини е под μ 500 г / мл или по 550 мм, ако концентрацията на протеини е между 100 и 2000 μ г / мл.

5. Plot a standard curve of absorbance as a function of initial protein concentration and use it to determine the unknown protein concentrations. Парцел стандартна крива на absorbance като функция на началната протеин, концентрация и да я използват за определяне на протеин, неизвестни концентрации.

Lowry Method References Lowry метод референции

Based on protocol by Jakob H. Waterborg. Въз основа на протокола от Якоб З. Waterborg.

Lowry et al. J. Lowry и др. J. Biol. Biol. Chem . Chem. 193: 265-275 (1951) 193: 265-275 (1951)

Related Protein Concentration Articles Свързани протеин концентрация на членове

Lowry Method Protocol Lowry метод Протокол

Protein Concentration Протеин Концентрация

Protein Concentration Protocol Протеин концентрация Протокол

Lowry Protein Assay Lowry протеин тест

Bradford Assay Брадфорд тест

Bradford Assay Protocol Брадфорд тест Протокол

Protein Articles: Протеин членове:

Western Blot Home Western Blot начало

Immunoprecipitation Home Immunoprecipitation Начало