home > protein-microarrays > antibody-microarray-limitations > index.php начало> протеин-microarrays> антитяло-microarray-ограничение> index.php
 |
|---|
 |  |  |  |  |  |
|---|---|---|---|---|---|
Protein Array Protocols Протеин множество протоколи | Protein Array Bioinformatics Протеин масив Биоинформатика | Learn about Protein Arrays Научете повече за протеин масиви | Protein Array Kits and Products Протеин масив комплекти и продукти | Protein Array Forum Протеин масив форум | Proteomic News Proteomic Новини |
Protein and Antibody Microarrays Протеин и антитела Microarrays
Availability of Antibodies Наличие на антитела
Another challenge to antibody arrays is to obtain antibodies against the ≥ 100,000 proteins that comprise the human proteome. There are currently a very small fraction of antibodies available of the proteome. Друго предизвикателство за антитела масиви е да получи антитела срещу ≥ 100000 протеини, които се състоят от хора proteome. В момента много малка част от наличните антитела на proteome. In addition, the specificity of many of these antibodies is poorly documented and additional antibodies may be required to В допълнение, спецификата на много от тези антитела е зле документирани и допълнителни антитела може да бъде задължен да
permit the detection of post-translational modifications. The detection of proteins by antibody–antigen interactions is also characterized by a broad range of specificity and affinity. Also, it is difficult to obtain a large set of highly specific antibody разрешение за откриване на пост-translational модификации. откриването на протеини от антиген-антитяло взаимодействия е също характеризира с широк кръг от спецификата и афинитет. Също така, че е трудно да се сдобиете с много голям набор от специфични антитела
molecules. молекули. Therefore, most antibody arrays are limited in their use and contain a few well-defined capture agents directed at a particular class of protein markers (9,17) Затова, най-антитяло масиви са ограничени в тяхната употреба и съдържа няколко добре дефинирани за улавяне на агенти, насочена към определен клас протеин маркери (9,17)
-to not act similar glycosylation - да не действат подобни glycosylation
Other Problems Facing Antibody Microarrays and Possible Solutions Други проблеми на антитела Microarrays и възможните решения на проблема
Classical strategies of antibody generation by animal immunization seem to be impractical. Класическа стратегии на антитела поколение от животински имунизация изглежда да е неприложима. Recombinant antibody display libraries are more promising (59-61). Рекомбинантен антитела показват библиотеки са по-обещаващи (59-61). Recently, many recombinant methods of generating antibodies have been investigated. Напоследък много рекомбинантен методи за генериране на антитела са били разследвани.
These include phage antibody-display, ribosome display, SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment), mRNA display, and affibody display, all of which have been developed to advance the production of antibodies and/or antibody mimics (16,54,56,62). These methods all involve the construction of large repertoires of viable regions with potential binding activity, which are then selected by multiple rounds of affinity purifications. Те включват phage антитяло-дисплей, рибозомата дисплей, SELEX (системно развитие на лиганди от изразител обогатяване), mRNA дисплей, както и affibody дисплей, всички от които са разработени за предварително производство на антитела и / или антитела mimics (16,54, 56,62). Тези методи включват всички строителството на големи репертоарите на жизнеспособни райони с потенциал задължителна дейност, които след това се избират от няколко кръга на афинитет азбучния. Candidate clones can be further selected using maturation selection which improves binding affinities. Кандидат-клонове могат да се използват допълнително разглеждане на съзряването, която подобрява подбора задължителни ориентация. However, an ideal selection system, which is fast, robust, sensitive, low cost, automated, and minimized, is yet to be fully developed (16,54). These smaller antibody fragments usually have decreased cross-reactivity and similar properties upon attachment (7,8,9,27). Все пак, един идеален избор на система, която е бърз, стабилен, чувствителни, ниска цена, автоматизирани системи, както и сведено до минимум, е все още предстои да бъдат напълно развити (16,54). Тези малки фрагменти на антитела, обикновено са намалели по-реактивност и други подобни свойства при запор (7,8,9,27).
Also because recombinant antibodies have a potentially high affinity, high specificity, and their smaller molecular weight, which is usually about 30 kDa while non-recombinant antibodies are about 150 kDa, dense and oriented attachment to support surfaces is facilitated (63,64). Също така, тъй като рекомбинантен антитела са потенциално висок афинитет, висока специфичност, както и техните малки молекулно тегло, което обикновено е около 30 kDa, докато не-рекомбинантен антитела са около 150 kDa, плътен и ориентирани към прикачен файл в подкрепа на повърхности е улеснена (63,64).
Antibodies are not the only molecules that may bind proteins. Антитела са не само молекули, които могат да обвържат протеини. Aptamers are short oligonucleotids that can bind and crosslink covalent target proteins. This facilitates Aptamers са къси oligonucleotids, които могат да обвържат и crosslink ковалентни целеви протеини. Това улеснява
higher stringency wash conditions which promotes detection of specific binding. Furthermore, these molecules are easily selected, arrayed, and synthesized. Purified protein target is a requirement for their use however, and aptamers can exhibit biased binding as RNAs tend to be highly negatively charged (9). високи строгост мият условия, което насърчава разкриването на конкретни задължителни. Нещо повече, тези молекули са лесно разглеждане, подредена и синтезиран. Пречистена протеин целта е изискване за тяхната употреба, обаче, и aptamers да проявяват biased задължителен, както RNAs тенденция да бъде силно отрицателно натоварени ( 9). A group (Somalogic) recently used immobilized anti-human immunodeficiency virus-gp120 aptamer to detect subnanomolar concentrations of target protein in 5% human serum (65). А група (Somalogic) наскоро използвани в движение анти-човешки имунодефицитен вирус-gp120 aptamer за откриване subnanomolar концентрации на таргетния протеин при 5% човешки серум (65).
Next: Protein Microarray Detection Methods and Analysis Следваща: протеин Microarray методите за откриване и анализ
References for Protein and Antibody Microarrays Препратки за протеин и Antibody Microarrays
Back to: Връщане:
Introduction and Background to Protein Chips and Antibody Chips. Въведение и на фона на протеини чипове и Antibody Чипове.
Types of Antibody and Protein Chips Видове на антитела и протеини Чипове
Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Отговорности / Условия за ползване | Поверителност | © 2005-2007 молекулярна Station.com, Всички права запазени.
Send this page to a friend Изпратете страницата на приятел
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
