Welcome to Molecular Station! Добре дошли в молекулярна станция!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Трябва да се регистрирате преди да можете да публикувате на нашите форуми, или да използвате допълнителни функции. Register Now! Регистрирайте се! Its Free and Fast! Тяхното свободно и бързо!

Already registered? Вече сте регистрирани? Login now below. Вход за сега по-долу.

User Name: Име:

Password: Парола:

Remember Me? Запомни ме?

Already registered and Forgot your password? Вече сте регистрирани и Забравили сте паролата си? Click below to recover it. Кликнете по-долу, за да го възстанови.

Recover Lost Password Забравена Забравена парола

Join now - it's fast and free! Присъединете се към момента - това е бързо и безплатно!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Молекулярна станция е най-голямата мрежа от изследователи, учени и любители на науката навсякъде!

Recent Forum Posts Нова Форум постове

PCR Protocols PCR протоколи	PCR Bioinformatics and Databases PCR биоинформатиката и бази данни	Learn about PCR Научете повече за PCR	PCR Kits and Products PCR комплекти и продукти	PCR Forum PCR форум	PCR Books PCR Книги

PCR Samples and Template DNA PCR проби и шаблон на ДНК

Template DNA and Samples for PCR Шаблонът на ДНК, и проби за PCR

Guidelines for template DNA and samples for PCR: Указания за шаблон и ДНК проби за PCR:

PCR Samples:  Types, Amount and Purity PCR пробите: вид, размер и Чистота

Types of Samples for PCR Видове на проби за PCR

Single- or double-stranded DNA of any origin may be a PCR sample. Едно-или двойно усукана ДНК на произход може да бъде PCR проба. Templates that can be used for amplification include animal, bacterial, plant, or viral. Шаблони, които могат да бъдат използвани за усилвателя включват животните, бактериални, растителни или вирусно. Conversion of RNA molecules, including total RNA, poly (A+) RNA, viral RNA, tRNA, or rRNA must occur prior to amplification when using these as templates to so-called complementary DNA (cDNA) by the enzyme reverse transcriptase (either MuLV or recombinant, rTth DNA polymerase). Преобразуване на РНК молекули, включително и общата РНК, поли (A +) РНК, вирусната РНК, tRNA, или rRNA трябва да настъпят преди усилвателя, когато използвате тези по шаблони за така наречените допълнителни ДНК (cDNA) от ензима обратна транскриптаза (или MuLV или рекомбинантен, rTth ДНК полимеразноверижна).

Amount of Material for PCR Сума на материал за PCR

Starting material amount, required for PCR can be as little as a single molecule.  As a basis, up to nanogram amounts of DNA cloned template, up to microgram amounts of genomic DNA, or up to 105 DNA target molecules are best for initial PCR testing. Изходен материал сума, необходима за PCR може да бъде само една единствена молекула. Като база, до nanogram суми на ДНК клонирани шаблон, до размера на микрограма genomic ДНК, или до 105 целева ДНК молекули са най-подходящи за начална PCR тестове .

Purity of Template and Sample for PCR Чистотата на шаблона и проба за PCR

Purity of the DNA sample that will be used for PCR amplification does not need not be high. Чистотата на ДНК проба, която ще бъде използвана за PCR амплификация, не трябва да бъде високо. A single cell, a crude cell lysate, or even a small sample of degraded DNA template is usually adequate for successful amplification. Една клетка, един суров клетки lysate, или дори една малка извадка от деградирали ДНК храм обикновено е достатъчно за успешното усилвателя. The requirements of sample purity must be that the target contains at least one intact DNA strand encompassing the amplified region and that the impurities associated with the target be dilute so as to not inhibit enzyme activity. Изискванията на проба за чистота трябва да бъде, че целта съдържа най-малко един непокътнат ДНК нишка между региона и задълбочени, че примесите, свързани с целта да се размиване, така че да не инхибира ензима дейност. Be that as it may, for some amplifications, such as long PCR, it may be necessary to consider the quality and quantity of the DNA sample. Е този, тъй като тя може, за някои amplifications, като дълго PCR, е необходимо да се разгледа на качеството и количеството на ДНК проба. For example: 1. Например: 1. When more template molecules are available, there is less occurrences of false positives caused by either cross-contamination between samples or “carryover” contamination from previous PCR amplifications. Когато повече шаблон молекули са достъпни, там е по-малко случаи на фалшиви позитиви, причинени от замърсяване или кръстосано между пробите или "прехвърляне" замърсяване от предишни PCR amplifications.

2. When the PCR amplifications lacks specificity or efficiency, or when the target sequences are limited, there is a greater chance of inadequate product yield. Когато PCR amplifications липсва специфика или ефективност, или когато целта последователности са ограничени, има повече шансове за неадекватни продукт добив.

3. When the fraction of starting DNA available to PCR is uncertain, it is increasingly difficult to determine the target DNA content. Когато част от ДНК, започващи на разположение на PCR е сигурно, че е все по-трудно да се определи целева ДНК съдържание.