Welcome to Molecular Station! Добре дошли в молекулярна станция!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Трябва да се регистрирате преди да можете да публикувате на нашите форуми, или да използвате допълнителни функции. Register Now! Регистрирайте се! Its Free and Fast! Тяхното свободно и бързо!

Already registered? Вече сте регистрирани? Login now below. Вход за сега по-долу.

User Name: Име:

Password: Парола:

Remember Me? Запомни ме?

Already registered and Forgot your password? Вече сте регистрирани и Забравили сте паролата си? Click below to recover it. Кликнете по-долу, за да го възстанови.

Recover Lost Password Забравена Забравена парола

Join now - it's fast and free! Присъединете се към момента - това е бързо и безплатно!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Молекулярна станция е най-голямата мрежа от изследователи, учени и любители на науката навсякъде!

Recent Forum Posts Нова Форум постове

PCR Protocols PCR протоколи	PCR Bioinformatics and Databases PCR биоинформатиката и бази данни	Learn about PCR Научете повече за PCR	PCR Kits and Products PCR комплекти и продукти	PCR Forum PCR форум	PCR Books PCR Книги

Analysis of PCR Products Анализ на PCR продукти

Agarose Gel Electrophoresis Analysis of PCR Products Agarose гел-електрофореза анализ на PCR продукти

To quickly and easily analyze and resolve PCR products, a 3% NuSieve can be used GTG agarose (FMC Bioproducts, Rockland, ME) and 1% Seakem GTG agarose (FMC Bioproducts) gel run in either TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA) or TAE (40 mM Tris-acetate, 2 mM EDTA, pH approx 8.5). За бързо и лесно да анализирате и разрешите PCR продукти, от 3% NuSieve могат да бъдат използвани характеристики agarose (ЦНР биопродукти, Rockland, Me) и 1% Seakem характеристики agarose (ЦНР биопродукти) гел тече и в двата TBE (89 мм три-borate, 2 EDTA мм) или TAE (40 мм три-ацетат, 2 мм EDTA, рН около 8,5). The resolved DNA bands are detected by staining the gels with either approx 0.5 μg/mL of ethidium bromide, followed by destaining with water or SYBR® Green 1 (Molecular Probes Inc., Eugene, OR) and finally photographed under UV illumination. В решен ДНК банди са открити от оцветяването на гелове с около 0,5 μ г / мл ethidium бромид, следвани от destaining с вода или SYBR ® Зелена 1 (молекулярна вероятно Инк., Eugene, ИЛИ) и накрая копиран под UV осветление. Use a 123-basepair (bp) or 1-kilobasepair (kbp) ladder as a convenient marker for size estimates of the products. Използвайте 123-basepair (АН), или 1-kilobasepair (kbp) лика като удобен маркер за размера оценки на продуктите.

Other Analytical Methods to Analyze PCR Products Други аналитични методи, за да анализират PCR продукти

There are a variety of other detection methods available for PCR product analysis, such as ethidium bromide-stained 8–10% polyacrylamide gels run in TBE buffer, Southern gels or dot/blots, subcloning and direct sequencing, HPLC analysis, and the use of 96-well microplates, to name a few. Има най-различни други методи за детекция на разположение за анализ на PCR продукт, като ethidium бромид-оцветени 8-10% полиакриламидна гелове тече в TBE буфер, Южна гелове или точкова / blots, subcloning и директни секвениране, HPLC анализ, както и използването на 96-добре microplates, към името на няколко. The reverse dot-blot method combines PCR amplification with nonradioactive detection. На гърба точкови blot метод съчетава PCR амплификация с nonradioactive откриване. The introduction of fluorescent dyes to PCR, together with a suitable instrument for real-time, online quantification of PCR products during amplification has led to the development of kinetic PCR or quantitative PCR. Въвеждането на флуоресцентни бои за PCR, заедно с подходящ инструмент за реално време, онлайн количествено определяне на PCR продукти по време на усилвателя е довело до развитието на кинетичната PCR или количествен PCR. Quantitative PCR (QPC) measures PCR product accumulation during the exponential phase of the reaction and before amplification becomes vulnerable, ie, when reagents become limited. Количествени PCR (QPC) мерки PCR продукт натрупване през изразител фаза на реакция и преди усилвателя става уязвима, т.е., когато реагенти стават ограничени. The ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) and the LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) are integrated fluorescent detection devices that allow fluorescence monitoring either continuously or once per cycle. Помощ призмата на 7700 (Приложни Biosystems) и LightCycler (Roche молекулярна Biochemicals, Манхайм, Германия) са интегрирани флуоресцентни откриване устройства, които позволяват на флуоресценция или постоянно наблюдение или веднъж на цикъл. These instruments can also characterize PCR products by their melting characteristics, eg, to discriminate singlebase mutations from a wild-type sequence. Тези инструменти могат да характеризират PCR продукти от тяхното топене характеристики, например, да разкрива singlebase мутации от дивия тип последователност. The recently designed Mx4000™ Multiplex Quantitative PCR System (Strategene, La Jolla, CA) can generate and analyze data for multiple fluorescent real-time QPCR assays. Наскоро проектирани Mx4000 ™ Мултиплекс Количествени PCR система (Strategene, La Jolla, CA) могат да генерират и анализира данни за различни флуоресцентни в реално време QPCR тестове.