Welcome to Molecular Station! Добре дошли в молекулярна станция!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Трябва да се регистрирате преди да можете да публикувате на нашите форуми, или да използвате допълнителни функции. Register Now! Регистрирайте се! Its Free and Fast! Тяхното свободно и бързо!

Already registered? Вече сте регистрирани? Login now below. Вход за сега по-долу.

User Name: Име:

Password: Парола:

Remember Me? Запомни ме?

Already registered and Forgot your password? Вече сте регистрирани и Забравили сте паролата си? Click below to recover it. Кликнете по-долу, за да го възстанови.

Recover Lost Password Забравена Забравена парола

Join now - it's fast and free! Присъединете се към момента - това е бързо и безплатно!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Молекулярна станция е най-голямата мрежа от изследователи, учени и любители на науката навсякъде!

Recent Forum Posts Нова Форум постове

FACS

The FACS Technique В FACS техника

Resting lymphocytes comprise many functional subpopulations, which are identified and distinguished from each other on the basis of heir differential expression of cell surface proteins, which can be detected using specific antibodies. Преустановяване на лимфоцити включва много функционална от населението, което се идентифицират и разграничат един от друг, въз основа на наследник на диференциала израз на клетъчната повърхност протеини, които могат да бъдат открити чрез употребата на специфични антитела.

Flow Cytometry Флоуцитометрия

A powerful tool for defining and quantifying lymphocytes is the flow cytometer, which detects and counts individual cells passing in a stream through a laser beam. Мощен инструмент за определяне и количествено лимфоцити е поток cytometer, която открива и си струва отделни клетки, преминаващи в поток чрез лазерен лъч. A flow cytometer equipped to separate the identified cells is called a fluorescence-activated cell sorter (FACS). Поток cytometer оборудвани за отделяне на определени клетки се нарича флуоресценция активирана клетки сортиращи (FACS). These instruments are used to study the properties of cell subsets identified using monoclonal antibodies to cell-surface proteins. Тези инструменти се използват за изследване на свойствата на клетъчната подгрупи, идентифицирани чрез моноклонални антитела към клетъчната повърхност-протеини. Individual cells within a mixed population are first tagged by treatment with specific monoclonal antibodies labeled with fluorescent dyes, or by specific antibodies followed by labeled anti-immunoglobulin antibodies. Индивидуални клетки в смесена популация са маркирани с първото лечение със специфични моноклонални антитела означени с флуоресцентни бои, или от определени антитела, последвана от надписани анти-имуноглобулин антитела. The mixture of labeled cells is then forced with a much arger volume of saline through a nozzle, creating a fine stream of liquid containing cells spaced singly at intervals . Смес от надписани клетки, след това е принуден с много arger обем от разтвор посредством дюза, създаване на глобата поток от течност, съдържаща клетки интервал самостоятелно на равни интервали от време. As each cell passes through a laser beam it scatters the laser light, and any dye molecules bound to the cell will be excited and will fluoresce. Както всяка клетка минава през един лазерен лъч я скатерни на лазерна светлина, както и всички свързани с боядисване на молекули на клетката ще бъдат радостни и ще fluoresce.

Sensitive photomultiplier tubes detect both the scattered light, which gives information on the size and granularity of the cell, and the florescence emissions, which give information on the binding of the labeled monoclonal antibodies and therefore on the expression of cell-surface proteins by each cell. Чувствителна photomultiplier тръби открива едновременно разпръсква светлина, която дава информация за големината и зърнест на клетката, както и florescence емисии, които дават информация за задължителни за надписани моноклонални антитела и затова за изразяване на клетъчната повърхност-протеини от всяка клетка . In the cell sorter, the signals passed back to the computer are used to generate an electric charge, which is passed from the nozzle through the liquid stream at the precise time that the stream breaks up into droplets, each containing no more than a single cell; droplets containing a charge can then be deflected from the main stream of droplets as they pass between plates of opposite charge, so that positively charged droplets are attracted to a negatively charged plate, and vice versa. В клетка сортиращи, сигналите връща на компютъра се използват за генериране на електрически заряд, който е преминал от дюза чрез течен поток в точния момент, че ток до прекъсвания в капчици, всяка от които съдържат не повече от една единствена клетка ; Капки, съдържащи такса може да бъде отклонените от главния поток от капчици, тъй като те преминават между ламарините на противоположните заряд, така че положително натоварени капки са привлечени към отрицателно натоварени табела, и обратно. In this way, specific subpopulations of cells, distinguished by the binding of the labeled antibody, can be purified from a mixed population of cells. По този начин, определени от населението на клетки, отличен със задължителен за надписани антитяло, може да бъде пречистена от смесена популация от клетки. Alternatively, to deplete a population of cells, the same fluorochrome can be used to label different antibodies directed at marker proteins expressed by the various undesired cell types. Освен това, да разрушават население от клетки, същото fluorochrome може да се използва за различни етикета на антитела, насочени към маркер протеини, изразени от страна на различни типове клетки нежелателно.

Cell Sorting Мобилен сортиране

The cell sorter can be used to direct labeled cells to a waste channel, retaining only the unlabeled cells. Клетката сортиращи може да се използва за пряка надписани клетки за отпадъци, канал, се запазва само снет от клетки. When cells are labeled with a single fluorescent antibody, the data from flow cytometer are usually displayed in the form of a histogram of fluorescence intensity vs. cell numbers. Когато клетките са означени с едно флуоресцентен антитяло, данните от потока cytometer обикновено се появява във формата на histogram на интензитет на флуоресценция срещу клетъчни номера. If two or more antibodies are used, each coupled to different fluorescent dye, then the data are more usually displayed in he form of a two-dimensional scatter diagram or as a contour diagram, where the fluorescence of one dye-labeled antibody is plotted against that of a second, with the result that a population of cells labeling with one antibody can be further subdivided by its labeling with the second antibody. Ако две или повече антитела се използва, всяка комбинация на различни флуоресцентни бои, а след това данните са по-обикновено той се показват в формата на двумерен скатерът диаграма или като контурната диаграма, когато флуоресценция на едно боядисване с надпис-антитяло е plotted срещу че от секундата, в резултат на което населението на клетки етикетира с едно антитяло може да бъде допълнително разделена от неговия етикетира с второто антитяло. By examining large numbers of cells, flow cytometry can give quantitative data on the percentage of cells bearing different molecules. Чрез разглеждане на голям брой клетки, флоуцитометрия могат да дадат количествени данни за процента на клетките, носещи различни молекули. As the power of FACS technology has grown, progressively more antibodies labeled with distinct fluorescent dyes can be used at the same time. По силата на технологията FACS е израснала, постепенно повече антитела, означени с различни флуоресцентни бои могат да бъдат използвани по същото време.

Three, four and even five color analyses can now be handled by very powerful machines Три, четири и дори пет цветен анализи, сега може да се борави с много мощни машини

FACS Protocols FACS протоколи